[发明专利]一种检测人蛋白C活性的方法

权利要求书

1. 一种检测人蛋白Ｃ活性的方法，其特征是用于检测人蛋白Ｃ的发色底物的方法，包括：①激活和显色: 将用样品稀释液稀释后的样品10-50μL加入96孔板中，然后依次加入约3倍体积的人蛋白Ｃ的特异性的激活剂——一种提取自蝮蛇蛇毒中的蛋白质和活化的人蛋白Ｃ的特异性的显色底物——一种连接对硝基苯胺显色基团的三肽化合物，然后在37℃水浴孵育8-20分钟;②终止:加入约3倍待测样品体积的酸性终止液，终止反应；在“终止”过程中加入的酸性终止液的体积百分浓度为20-50%的醋酸；③读数:在405nm波长读取吸光值。

2.  根据权利要求1所述的一种检测人蛋白Ｃ活性的方法，其特征是在“激活和显色”过程中，所用的样品稀释液为pH 7.2-8.4 的20-50mM的Tris缓冲液或Hepes缓冲液，从而使稀释后的样品pH在7-8之间，与生理情况下血浆的pH相近，进而保证检测的准确性；加入的人蛋白Ｃ激活剂的浓度为0.05-0.4IU/ml，显色底物的浓度为0.05-2mg/ml，保证人蛋白C能完全反应。