[发明专利]一种盐酸氨溴索注射液有关物质的检测方法

说明书

技术领域

本发明属于药物分析领域，更具体地说，是一种采用高效液相色谱法测定盐酸氨溴索注射液有关物质的检测方法。

背景技术

药品名称：盐酸氨溴索注射液

英文名：Ambroxol Hydrochloride Injection

化学名称：反式-4-[（2-氨基3.5-二溴苄基）氨基]环己醇盐酸盐

结构式：

分子式：C₁₃H₁₈Br₂N₂O·HCl

分子量：414.6

盐酸氨溴索为溴己新在人体内的代谢产物，是一种新的黏痰溶解药，是目前疗效肯定，应用最广泛的祛痰药物。该药具有粘液排除促进作用及溶解分泌物的特性，它可促进呼吸道内粘稠分泌物的排除及减少粘液的滞留，因而显著促进排痰，改善呼吸状况。应用氨溴索治疗时，病人粘液的分泌可恢复至正常状况，咳嗽及痰量通常显著减少，呼吸道粘膜的表面活性物质因而能发挥其正常的保护功能。盐酸氨溴索耐受性良好，可长期服用。主要适用于伴有痰液分泌不正常及排痰功能不良的急性、慢性呼吸道疾病，例如慢性支气管炎急性加重、喘息型支气管炎及支气管哮喘的祛痰疗法；手术后肺部并发症的预防性治疗；早产儿及新生儿的婴儿呼吸窘迫综合症（IRDS）的治疗。

盐酸氨溴索从血液至组织的分布快而显著，主要分布于肺、肝、肾，血浆半衰期约为7小时，无累积效应。主要在肝脏代谢，90%由肾脏清除，代谢产物为溴邻氨基苯甲酸，其生物活性不明确。

目前，欧洲药典和英国药典中盐酸氨溴索的已知杂质共有5个，分别为：盐酸氨溴索杂质A、盐酸氨溴索杂质B、盐酸氨溴索杂质C、盐酸氨溴索杂质D和盐酸氨溴索杂质E。

杂质A                            杂质B

杂质C                            杂质D

杂质E

现有检测盐酸氨溴索注射液中有关物质的相关方法有：

1、《中国药典》2010年版目前未收录盐酸氨溴索注射液的标准，只收录了盐酸氨溴索原料、固体制剂及口服溶液剂标准，其中盐酸氨溴索原料有关物质的测定方法如下：

取样品，用流动相溶解并制成每1ml中含1mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为记录仪满量程的20%-25%；然后分别精密量取供试品溶液和对照溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。供试品溶液中如有杂质峰，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积，即总杂质不得大于1%。所采用的色谱条件为采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.01mol/L磷酸氢二铵溶液（用磷酸溶液调节pH值至7.0）︰乙腈=（50︰50）为流动相；检测波长248nm。

2、CN101865891A：一种盐酸氨溴索的检测方法公开了杂质A（2-氨基-3,5-二溴苯甲醛），即盐酸氨溴索已知杂质E和杂质B（反式-4-[6,8-二溴-1,4-二氢喹唑啉-3(2H)]环己醇）的高效液相检测方法，其色谱条件为：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为0.01mol/L磷酸氢二铵溶液（用磷酸调节pH值至7.0）︰乙腈=（50︰50）；检测波长为杂质A和杂质B的对照品检测波长为248nm，供试品检测波长为238nm。

3、CN102262135A：盐酸氨溴索注射液杂质的检测方法及含量测定方法公开了杂质B（反式-4-[6,8-二溴-1,4-二氢喹唑啉-3(2H)]环己醇）和杂质E（2-氨基-3,5-二溴苯甲醛）的高效液相检测方法，其色谱条件为：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为磷酸盐缓冲液-甲醇体积比：45-55︰55-45；其中，磷酸盐缓冲液是由磷酸氢二铵-磷酸缓冲对组成，其中磷酸氢二铵的浓度为0.002g/ml，缓冲液pH值为4.0，流速为1.0ml/min，柱温为35℃，杂质B的检测波长为250nm，杂质E的检测波长为238nm。

采用以上三种有关检测方法对盐酸氨溴索注射液及五种已知杂质进行液相分析后发现：以上三种检测方法在同一液相条件下无法有效分离盐酸氨溴索五种已知杂质，而通过大量实验和探索，本发明的盐酸氨溴索注射液中有关物质检测方法可以有效分离盐酸氨溴索及五种已知杂质。