[发明专利]检测膜通道蛋白与靶向药物的相互作用的方法及其应用

权利要求书

1.一种检测膜通道蛋白与靶向药物相互作用的方法，其特征在于该方法的具体步骤为：

a. 根据膜通道蛋白上与其靶向药物相互作用位点上的关键氨基酸序列，合成肽链；

b.采用表面等离子共振技术检测步骤a所得的肽链与靶向药物的相互作用。

2.根据权利要求1中所述的检测膜通道蛋白与靶向药物相互作用的方法，其特征在于所述的膜通道为细胞电压门控钠通道，该通道的位点3与其靶向药物相互作用的关键氨基酸序列为DⅣ/S3-S4胞外环，根据该关键氨基酸序列设计的两段肽链为：

rNav1.5  SIVGTVLSDIIQKYFFSPTL

rNav1.8  SIGSLLFSAILKSLENYFSPTL；

所述的靶向药物为钠通道靶向药物BmK I。

3.根据权利要求1所述的检测膜通道蛋白与靶向药物相互作用的方法，其特征在于所述的步骤b的具体方法为：

a. 靶向药物的芯片固化：

注入400mM的N-ethy1-N-(dimethylaminepropyl)-carbodiimid和100mM的N-hydroxy-succimide的按1: 1的体积比混合成的混合液，激活CM5传感器芯片上的偶联基团-COOH；将靶向药物以23μg/ml的配置浓度置于pH5.0、10mM醋酸钠溶液中，取30μl注入芯片；

b.取一系列结合反应终浓度下的肽链分别以20ul/min的流速通过步骤a所得的固化有靶向药物的传感器芯片；所有反应在4℃进行；使用的结合反应液为： NaCl 150 mM，CaCl₂ 1.2 mM，MgCl₂ 1 mM，KCl 3.5 mM，HEPES 10，D-glucose 20 mM，用NaOH调至pH7.4。

4.根据权利要求3所述的检测膜通道蛋白与靶向药物相互作用的方法，其特征在于所述的肽链为：

rNav1.5  SIVGTVLSDIIQKYFFSPTL

rNav1.8  SIGSLLFSAILKSLENYFSPTL；所述的靶向药物为钠通道靶向药物BmK I。