本发明提供一种NT‑proBNP蛋白抗原决定簇多肽及其应用。其中所述NT‑proBNP蛋白抗原决定簇多肽的氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示序列。本发明所述的NT‑proBNP蛋白抗原是通过使用所述的抗原决定簇多肽与载体蛋白偶联制备的,所述的NT‑proBNP蛋白抗体是由所述抗原制备成的单克隆抗体或多克隆抗体,所述的单克隆抗体和多克隆抗体用于制备NT‑proBNP蛋白检测试剂盒。本发明所述的NT‑proBNP蛋白抗原决定簇多肽具有良好的抗原性,用其制备的抗原免疫动物能够产生特异性抗体,制备的NT‑proBNP蛋白抗体可以特异性地结合人血清中的NT‑proBNP,制备的NT‑proBNP检测试剂盒可有效检测人血清中的NT‑proBNP蛋白水平。
本发明涉及一种NT-proBNP重组蛋白,其具有选自于下列a)或b)的氨基酸序列:a)SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列;b)上述a)中缺失、替换或插入一个或多个氨基酸后仍具有所述NT-proBNP重组蛋白活性的氨基酸序列;本发明还涉及编码上述NT-proBNP重组蛋白的核苷酸序列及上述NT-proBNP重组蛋白的制备方法。上述的NT-proBNP重组蛋白具有与天然NT-proBNP蛋白相同的免疫原性,而且纯度高,有更好的稳定性,可代替天然NT-proBNP多肽,用作NT-proBNP免疫诊断试剂标准品,并为下一步研究开发NT-proBNP检测试剂盒奠定了基础。
本发明属于多肽化学与免疫学领域,尤其涉及NT‑proBNP抗原表位肽、用该抗原表位肽制备的NT‑proBNP特异性抗体、所述抗体在制备检测NT‑proBNP的用途和定量检测NT‑proBNP的试剂盒。本发明的公开的所述NT‑proBNP抗原表位肽的氨基酸序列具有:(I)SEQ ID NO.1所示;或(II)与(I)所述序列至少有90%同源性的序列。本发明提供的定量检测人NT‑proBNP的试剂盒能有效解决现有的检测NT‑proBNP方法的灵敏度差、检测操作繁琐的缺陷。