本发明公开了一种检测牛精液中BVDV1型的组合物、试剂盒及应用，属于病毒检测技术领域。组合物包括引物对和探针，其中引物对为如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列，探针为5’端连接FAM且3’端连接BHQ1的如SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列。本发明基于微滴式数字PCR技术，利用引物和探针特异性检测出牛精液中BVDV1型，且最低检测限可低至1copies/μL；在低拷贝数下，本发明提供的检测微滴式数字PCR方法比常规荧光定量PCR方法更灵敏，减少了假阴性的产生，实现了对牛BVDV1型的特异性、灵敏性、绝对定量检测，对动物检疫相关检测部门和企业提供了新的检测方法。
本发明涉及病毒检测领域，具体讲，涉及一种用于同时检测BVDV‑1,BVDV‑2和BVDV‑3的试剂盒及引物和探针。试剂盒中引物和探针的核苷酸序列如SED ID NO:1～SEQ ID NO:6所示。本发明提出一种基于TaqMan技术的三重荧光定量RT‑PCR检测方法，用于快速地鉴定BVDV基因型，具有快速、高灵敏度和高特异性的特点，可用于BVDV的研究或诊断应用中的病毒分型。
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种靶向BVDV非结构蛋白的重组纳米抗体及应用。本发明所述重组纳米抗体的氨基酸序列如SQE ID NO.1所示。本发明所述的重组纳米抗体通过大肠杆菌表达系统表达获得，制备方法简单；而且相较于现有的靶向BVDV非结构蛋白的纳米抗体，本发明所述的重组纳米抗体可自主穿过细胞膜，并能抑制细胞内BVDV的复制，为BVDV的防控提供新的技术手段
