本发明涉及基因工程技术领域，尤其是涉及一种狂犬病毒的重组基因、重组假病毒及其构建方法和应用。所述重组基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明将重组基因RABV‑G‑N置换慢病毒包膜质粒中的VSV‑G，构建重组包膜质粒pCMV‑RABV‑G‑N，然后将重组包膜质粒与含绿色荧光蛋白报告基因的pLV‑eGFP和psPAX2共转染人胚胎肾细胞HEK‑293T即得到重组假病毒。本发明的重组基因具有与天然狂犬病毒的生物学特性，可以提高假病毒免疫原性，并且制备的重组假病毒包装滴度高，可以替代天然狂犬病毒进行血清中和抗体滴度的评价。
本发明公开了一种融合碳端的重组蛛丝蛋白及其制备方法与基于重组蛛丝蛋白的载药微球，属于蛋白制备领域。融合碳端的重组蛛丝蛋白由8个重复核心序列和碳端序列组成，重组蛛丝蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。为了实现重组蛛丝蛋白的简易表达，本发明将该重组蛛丝蛋白MaSp2(8R)+CT克隆在载体pCold I上，实现了无需克隆甘氨酸‑tRNA的编码序列就能成功诱导表达了重组蛛丝蛋白，并提供了纯化载体pCold I上重组蛛丝蛋白的方法。本发明提供的基于重组蛛丝蛋白的载药微球，相比于现有的载药微球，毒性更小，载药率和释放率更高，具有很好的应用前景。
本发明涉及动物医学领域，特别涉及动物重组蛋白疫苗，重组蛋白含有所述猪圆环病毒的抗原的表位和所述猪繁殖与呼吸综合征病毒的抗原的表位，通过乳化后支撑疫苗；所述重组蛋白通过合成如SEQ ID NO：6所示的目标片段，并和PGEX-4T-1载体组成重组载体，将重组质粒转化至宿主菌诱导表达，并提取重组蛋白而得；用于猪体免疫的重组蛋白含量是宿主菌诱导表达4小时后的产物，采用包涵体回收、溶解、浓缩等过程后提纯浓度达80％以上的重组蛋白质；本发明制备的重组蛋白质性质稳定、不具传播病毒等特点，在研制防制PRRSV和PCV2疫苗具有极大的优势或不可替代的作用。
本发明公开了自身免疫性脑炎相关的NMDAR重组蛋白、其编码序列、制法和应用，属于生物技术领域。本发明的自身免疫性脑炎相关的NMDAR重组蛋白的编码序列如SEQ ID NO.1所示；重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。重组蛋白的制备方法包括：将SEQ ID NO.1所示的编码序列连接重组载体，构建重组蛋白表达载体；转化进大肠杆菌的感受态细胞，培养，得到重组蛋白表达菌株；提取质粒，转染入CHO‑S细胞中培养；收集细胞上清，纯化，得到重组蛋白。本发明的NMDAR重组蛋白通过异源重组表达NR1‑ATD，能被患者血液中的抗NMDAR自身抗体识别，且在体外大量表达，降低生产成本，并能实现定量检测。
