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[发明专利]分步水解大豆分离蛋白制备外啡肽的方法-CN201010137676.7无效
发明人：石彦国;孙冰玉;胡春林;林宇红 -专利权人：哈尔滨商业大学
申请日： 2010-04-01 - 公布日： 2010-07-07 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：分步水解大豆分离蛋白制备外啡肽的方法，它涉及一种制备外啡肽的方法。本发明解决了现有的外啡肽制备方法成本高、制备过程中容易产生有害物质的问题。方法一：胃蛋白酶水解后用胰蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶或中性蛋白酶进行水解；方法二：胰蛋白酶水解后用胃蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶或中性蛋白酶进行水解；方法三：碱性蛋白酶水解后用胃蛋白酶、胰蛋白酶、酸性蛋白酶或中性蛋白酶进行水解；方法四：中性蛋白酶水解后用胃蛋白酶、胰蛋白酶、酸性蛋白酶或碱性蛋白酶进行水解；方法五：酸性蛋白酶水解后用胃蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶或中性蛋白酶。
分步水解大豆分离蛋白制备外啡肽方法

[发明专利]一种荞麦胰蛋白酶抑制剂及其表达和应用-CN200510012385.4无效
发明人：王转花;张政;李玉英;史晓儒 -专利权人：山西大学
申请日： 2005-03-12 - 公布日： 2006-01-11 - 主分类号： A61K38/55 文献下载
摘要：本发明公开了一种荞麦胰蛋白酶抑制剂及其表达和产物在抑制胰蛋白酶水解中的应用。本发明的胰蛋白酶抑制剂是一个由69个氨基酸组成的小分子蛋白，分子量约10kD。该胰蛋白酶抑制剂对胰蛋白酶具有明显的抑制作用，以竞争性抑制的方式与胰蛋白酶形成1∶1的复合物，抑制胰蛋白酶的水解。荞麦胰蛋白酶抑制剂具有一定的促进肿瘤细胞调亡的作用，可用于新型抗肿瘤药物的制备。
一种荞麦胰蛋白酶抑制剂及其表达应用

[发明专利]生产β-胰蛋白酶的方法-CN202180067315.6在审
发明人： P·M·H·马克思;M·梅维斯;C·D·威尔逊;A·A·布加杰夫斯卡-沃勒;D·E·格鲁伯;G·刘易斯 -专利权人：益普生生物制药有限公司
申请日： 2021-10-01 - 公布日： 2023-07-07 - 主分类号： C12N9/76 文献下载
摘要：一种生产β‑胰蛋白酶的方法，所述方法包含：a)使变性胰蛋白酶原复性，从而生产复性胰蛋白酶原，其中所述复性在包含L‑精氨酸的缓冲液中进行；b)通过阴离子交换层析对复性胰蛋白酶原进行纯化，从而提供纯化的复性胰蛋白酶原；和c)在促进胰蛋白酶原的蛋白水解活性的条件下对纯化的复性胰蛋白酶原进行孵育，其中胰蛋白酶原通过所述蛋白水解活性裂解成β‑胰蛋白酶；其中步骤a)和b)在不促进胰蛋白酶原的蛋白水解活性的条件下进行；其中所述方法不包含加入用于将胰蛋白酶原裂解成β‑胰蛋白酶的另外的蛋白酶；其中至少步骤c)在不包含L‑精氨酸的缓冲液中进行；并且其中在步骤c)之前，当存在于不包含L‑精氨酸的缓冲液中时，不使胰蛋白酶原经受8℃的温度超过38小时。
生产胰蛋白酶方法

[发明专利]一种壳聚糖微球固定化胰蛋白酶的方法-CN201010103862.9无效
发明人：夏文水;谭丽;姜启兴 -专利权人：武汉工业学院
申请日： 2010-01-26 - 公布日： 2010-07-14 - 主分类号： C12N11/10 文献下载
摘要：本发明提供了一种壳聚糖微球固定化胰蛋白酶的方法，属于食品加工技术领域。本发明以壳聚糖为固定化载体，将壳聚糖在醋酸溶液中溶解后，利用反相悬浮法制备壳聚糖微球，然后利用戊二醛为交联剂对壳聚糖微球进行交联活化，将交联活化后的壳聚糖微球与胰蛋白酶溶液混合进行固定化，制得固定化胰蛋白酶胰蛋白酶是食品工业中蛋白质改性、水解最常用的酶制剂之一，本发明通过壳聚糖固定化胰蛋白酶，使胰蛋白酶可以重复使用，提高了胰蛋白酶的利用效率，降低了蛋白质水解过程中酶的用量和生产成本，可广泛应用于牛乳、肉类、水产等蛋白质的水解过程与改性。
一种聚糖固定胰蛋白酶方法

[发明专利]蛋白水解物及其制备方法-CN201780086170.8在审
发明人： T.T.朗贝斯;C.E.M.范波美尔;A.M.维特克;敖自华;K.A.丁格斯;K.A.赫廷加 -专利权人： MJN美国控股有限责任公司
申请日： 2017-12-12 - 公布日： 2019-10-08 - 主分类号： A23L33/00 文献下载
摘要：本公开一般涉及制备用于儿科营养组合物中的蛋白水解物的方法。具体而言，可以使用蛋白酶诸如胰蛋白酶(胰蛋白酶样)、胰凝乳蛋白酶(胰凝乳蛋白酶样)、胃蛋白酶和/或纤溶酶，水解富含α‑、β‑和/或κ酪蛋白的酪蛋白、酸性酪蛋白或酪蛋白酸盐，以产生接近人母乳的肽组成的水解物
胰蛋白酶胰凝乳蛋白酶蛋白水解物酪蛋白制备蛋白酶酪蛋白酸盐酸性酪蛋白营养组合物胃蛋白酶水解物纤溶酶母乳儿科富含水解

[发明专利]一种对胰蛋白酶和胃蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶-CN202210242251.5在审
发明人：姚冬生;牛芳园;钱丹;刘大岭;谢春芳 -专利权人：暨南大学
申请日： 2022-03-11 - 公布日： 2022-07-22 - 主分类号： C12N9/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种对胰蛋白酶抗性和胃蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶及其应用。本发明所述的对胰蛋白酶抗性和胃蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶，它是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于粉红螺旋聚孢霉的玉米赤霉烯酮水解酶中制造多个氨基酸取代而产生的、对胰蛋白酶抗性和胃蛋白酶抗性提高的酶本发明通过对玉米赤霉烯酮水解酶进行突变筛选到了一株玉米赤霉烯酮水解酶突变体，经实验表明，所获得的突变体对玉米赤霉烯酮的水解功能不受影响，对胰蛋白酶的抗性半衰期比野生型玉米赤霉烯酮水解酶延长了32％，对胃蛋白酶的抗性半衰期比野生型玉米赤霉烯酮水解酶延长了
一种胰蛋白酶胃蛋白酶抗性提高玉米赤霉烯酮水解

[发明专利]蝉蜕蛋白酶酶解物及其应用-CN201310095752.6在审
发明人：李晓燕;赵韶华;王鑫国;王玉蓉 -专利权人：河北以岭医药研究院有限公司
申请日： 2013-03-23 - 公布日： 2014-09-24 - 主分类号： A61K35/64 文献下载
摘要：本发明公开了一种蝉蜕蛋白酶酶解物及其用途，具体步骤如下：A、净选蝉蜕，粉碎成细粉；B、将蝉蜕细粉置于人工胃液中，然后加入胃蛋白酶水解，得到胃蛋白酶酶解液，离心，所得上清液和残渣备用；C、取上清液，干燥，得到蝉蜕胃蛋白酶酶解物；D、取残渣转入人工肠液中，加入胰蛋白酶水解，得到蝉蜕胰蛋白酶酶解物；步骤C所得胃蛋白酶酶解物与步骤D所得胰蛋白酶酶解物即为蝉蜕蛋白酶酶解物。蝉蜕蛋白酶酶解物具有抗凝血或溶栓的作用。
蝉蜕蛋白酶酶解物及其应用

[发明专利]土鳖虫蛋白酶酶解物及其应用-CN201310094652.1在审
发明人：李晓燕;赵韶华;王鑫国;王玉蓉 -专利权人：河北以岭医药研究院有限公司
申请日： 2013-03-23 - 公布日： 2014-09-24 - 主分类号： A61K35/64 文献下载
摘要：本发明公开了一种土鳖虫蛋白酶酶解物及其用途，具体步骤为A、净选土鳖虫，粉碎成细粉；B、将土鳖虫细粉置于人工胃液中，然后加入胃蛋白酶水解，得到胃蛋白酶酶解液，离心；C、取上清液，干燥，得到土鳖虫胃蛋白酶酶解物；D、取残渣转入人工肠液，加入胰蛋白酶水解，得到土鳖虫胰蛋白酶酶解物；步骤C所得胃蛋白酶酶解物与步骤D所得胰蛋白酶酶解物即为土鳖虫蛋白酶酶解物。土鳖虫蛋白酶酶解物具有抗凝血或溶栓的作用。
土鳖虫蛋白酶酶解物及其应用

[发明专利]一种细胞制品中残余胰蛋白酶活性的检测方法-CN201510247424.2在审
发明人：韩忠朝;王斌;冯杰;韩之波;耿洁 -专利权人：天津昂赛细胞基因工程有限公司
申请日： 2015-05-14 - 公布日： 2017-01-04 - 主分类号： C12Q1/37 文献下载
摘要：本发明公开了一种细胞制品中残余胰蛋白酶活性的检测方法，主要是利用胰蛋白酶可以催化N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐，水解成为N-苯甲酰-L-精氨酸盐酸盐和乙醇的特点，在水解后的反应体系中检测253nm波长处的吸光值，从而测定胰蛋白酶的活性。本发明设定了最佳反应温度为37℃和最佳检测时间在反应25分钟的时候，获得了一种新的胰蛋白酶活性检测方法，灵敏度更高，从而可用于细胞制品中残留胰蛋白酶活性的检测。因此，本发明是一种简单、灵敏、实用的检测细胞制品中残余胰蛋白酶活性的方法。
一种细胞制品残余胰蛋白酶活性检测方法

[发明专利]一种胰蛋白酶与木瓜蛋白酶水解工艺-CN201711130836.3在审
发明人：顾永军 -专利权人：如皋市坝新肠衣有限公司
申请日： 2017-11-15 - 公布日： 2018-01-19 - 主分类号： C12P21/06 文献下载
摘要：本发明涉及一种胰蛋白酶与木瓜蛋白酶水解工艺，所述水解工艺包括如下步骤（1）水预处理将肠渣粉碎，放入真空罐中，加入蒸馏水，控制罐中真空度0.02‑0.03MPa，温度60‑70℃，加热2‑4h；（2）酶解将预处理溶液打到酶解罐中调节pH至7‑9，加入肠渣质量1.5‑2.5%的混合水解酶，所述混合水解酶为质量比12的胰蛋白酶与木瓜蛋白酶的混合物，酶解；（3）离心分离得到蛋白粉酶解结束后利用碟片式三相离心机以速度为4000‑6000r/min，离心时间为40‑50min，得到蛋白粉。本发明的优点在于本发明胰蛋白酶与木瓜蛋白酶水解工艺完善，成本低，材料利用率高，无浪费，节能减排，生产效率大大提高。
一种胰蛋白酶木瓜蛋白酶水解工艺

[发明专利]一种对胰蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶-CN202111052143.3有效
发明人：姚冬生;牛芳园;钱丹;刘大岭;谢春芳;刘桂祯;黄炯威;莫世艺 -专利权人：暨南大学;广东方善能动物保健有限公司
申请日： 2021-09-08 - 公布日： 2023-06-30 - 主分类号： C12N9/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种对胰蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶，它是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于粉红螺旋聚孢霉(Clonostachys rosea)的玉米赤霉烯酮水解酶中制造单个氨基酸取代而产生的、对胰蛋白酶抗性更强的酶，所述的氨基酸取代是第262位的取代。本发明通过蛋白质工程技术对野生型玉米赤霉烯酮水解酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造，提供了一种对胰蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶突变体，该酶对胰蛋白酶的抗性半衰期比野生型玉米赤霉烯酮水解酶延长了20.8％，其他酶学性质与野生型玉米赤霉烯酮水解酶基本一致。
一种胰蛋白酶抗性提高玉米赤霉烯酮水解

[发明专利]使用蛋白酶控制限制酶活性-CN202111286567.6有效
发明人：朱振宇;孙大鹏;A·昆比 -专利权人：武汉爱博泰克生物科技有限公司
申请日： 2021-11-02 - 公布日： 2023-10-17 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：蛋白酶是水解蛋白质酶、消除其活性的酶。本发明利用包括蛋白酶K、内切蛋白酶LysC和/或胰蛋白酶的蛋白酶的水解活性来控制限制酶的活性和/或消除或减少不需要的DNA或RNA片段的产生(称为星号活性)。
使用蛋白酶控制限制活性

[发明专利]使用蛋白酶控制限制酶活性-CN202080042396.X有效
发明人：朱振宇;孙大鹏;艾恩·昆比;迈克尔·肖特斯 -专利权人：武汉爱博泰克生物科技有限公司
申请日： 2020-10-17 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：蛋白酶是一种水解蛋白质并消除其活性的酶。本发明中利用蛋白酶包括蛋白酶K、内切蛋白酶LysC和/或胰蛋白酶的水解活性来控制限制酶的活性和/或消除或减少非必要DNA或RNA片段的产生(称为星号活性)。
使用蛋白酶控制限制活性

[发明专利]纳米二氧化硅包裹胰蛋白酶及其制备方法-CN201910448484.9有效
发明人：曹傲能;罗娜娜;王海芳 -专利权人：上海大学
申请日： 2019-05-28 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： C12N9/96 文献下载
摘要：本发明公开了一种纳米二氧化硅包裹胰蛋白酶及其制备方法，能制备纳米二氧化硅包裹的胰蛋白酶，其催化口袋不被纳米壳包裹。纳米二氧化硅对蛋白酶起到保护作用，同时蛋白酶的催化口不被纳米二氧化硅包裹，可以有效地与底物结合反应，进而提高催化反应的传质效率。本发明纳米二氧化硅包裹胰蛋白酶将胰蛋白酶包裹在纳米二氧化硅之中，形成具有胰蛋白酶@SiO2核壳结构的复合纳米颗粒，且胰蛋白酶的催化口袋不被纳米二氧化硅壳包裹，形成胰蛋白酶的催化口袋外露的传质窗口本发明首次实现包封法固定的蛋白酶的催化口袋不被包裹，具有胰蛋白酶@SiO2核壳结构的复合纳米颗粒热稳定性好，水解稳定性好，制备工艺简单，具备很好的应用前景。
纳米二氧化硅包裹胰蛋白酶及其制备方法

[发明专利]水解大豆蛋白产生外啡肽的方法-CN200910073055.4无效
发明人：石彦国;孙冰玉;胡春林 -专利权人：哈尔滨商业大学
申请日： 2009-10-15 - 公布日： 2010-04-07 - 主分类号： C12P21/06 文献下载
摘要：水解大豆蛋白产生外啡肽的方法，它涉及了水解蛋白产生特定肽类的方法。本发明解决了采用现有的方法水解大豆蛋白忽略了阿片肽所具有的生理功能和安全隐患的问题。本发明四种方法分别采用胰蛋白酶/碱性酶、胰蛋白酶/中性酶、胰碱性酶/中性酶及酸性蛋白酶/胃蛋白蛋酶，在相应的条件下进行。本发明四种水解方法确定了同步水解大豆蛋白产生外啡肽的条件及产生量，同步水解产生外啡肽方法的确定为大豆蛋白的后加工的安全性、大豆肽食品的发展奠定了基础。
水解大豆蛋白产生外啡肽方法

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