尼罗罗非鱼补体C9基因克隆及其应用,属探索尼罗罗非鱼感染无乳链球菌后的功能研究。它公开了尼罗罗非鱼免疫相关基因OnC9,该序列为表中SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。以及公布了尼罗罗非鱼免疫相关蛋白OnC9的序列,其氨基酸序列为序列表中SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。本发明利用公布的尼罗罗非鱼OnC9的核苷酸序列设计荧光定量PCR检测的引物(C9‑qf:5’‑GGCTTGAAGTCGCTCTCCA‑3’;C9‑qr:5’‑GCCAAATGCTTCTACACTTCG‑3’),对健康或者感染无乳链球菌的尼罗罗非鱼进行荧光定量PCR检测。该方法可用作研究尼罗罗非鱼感染无乳链球菌后的免疫应答。
本发明公开了一种快速培育YY超雄尼罗罗非鱼的方法,本发明利用一对用于检测尼罗罗非鱼遗传性别的引物,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1~2所示,建立了一种YY超雄尼罗罗非鱼的培育方法,并利用YY超雄尼罗罗非鱼建立了一种快速培育全雄罗非鱼的方法本发明首次从尼罗罗非鱼群体筛选天然XY雌鱼,并将其与遗传性别稳定群体的XY雄鱼交配,获得了YY超雄鱼,获得的YY超雄罗非鱼可以用于罗非鱼遗传性别控制,可以快速获得YY超雄罗非鱼。本发明的方法在天然群体筛选XY雌鱼,适用于罗非鱼遗传性别控制;可用于对不同群体的尼罗罗非鱼性别控制,简化了MAS‑GMT技术操作流程,对推广尼罗罗非鱼性别控制方法具有重要意义。
本发明公开了提高尼罗罗非鱼选育效率的标记、方法、试剂盒及应用,所述标记的SNP标记引物为:上游引物SEQ ID NO:2,5’‑ACTGTCTGACCTCACAAATGTGCTT‑3’;下游引物SEQ 与现有技术相比,本发明具有以下优点:(1)本发明所述方法提供的SNP标记引物不受尼罗罗非鱼年龄、性别及养殖状态限制,可以用于尼罗罗非鱼早期种质鉴定,显著提升罗非鱼的保种、选育工作效率;(2)本发明所述方法选取尼罗罗非鱼Ghrelin基因启动子调控区域的SNP位点作为检测位点,对建立一种提高尼罗罗非鱼摄食行为频率和平均生长速率的辅助育种方法提供了科学依据。