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[发明专利]外周血多潜能细胞活性物与富血小板血浆复合物及其制备方法和应用-CN201910680291.6在审
发明人：马亚东;黄宗堂;曹娜 -专利权人：丰泽康生物医药（深圳）有限公司
申请日： 2019-07-19 - 公布日： 2021-02-05 - 主分类号： A61K35/16 文献下载
摘要：本发明涉及干细胞制剂技术领域，特别涉及一种外周血多潜能细胞活性物与富血小板血浆复合物及其制备方法和应用。复合物包括多潜能细胞活性物、富血小板血浆裂解液和盐酸法舒地尔，多潜能细胞活性物为外周血多潜能细胞活性物。外周血处理后得到外周血干细胞；然后外周血干细胞体外培养，破碎细胞后离心，收集上清过滤得到外周血多潜能细胞活性提取液，与富血小板血浆裂解液混合，然后加入盐酸法舒地尔。本发明提供的外周血多潜能细胞活性物与富血小板血浆复合物的制备方法和应用，采用外周血多潜能细胞活性与富血小板血浆相互作用的结果，外周血多潜能细胞活性因子的使用可有效促进皮肤创伤愈合，有效促进皮肤溃疡创伤的愈合
外周血多潜能细胞活性血小板血浆复合物及其制备方法应用

[发明专利]多潜能细胞活性物联合富血小板血浆的骨关节炎治疗药物及制法和应用-CN201910647840.X在审
发明人：马亚东;黄宗堂;曹娜 -专利权人：丰泽康生物医药（深圳）有限公司
申请日： 2019-07-14 - 公布日： 2021-02-02 - 主分类号： A61K35/14 文献下载
摘要：本发明涉及干细胞制剂技术领域，特别涉及一种外周血多潜能细胞活性物联合富血小板血浆制备用于骨关节炎治疗的药物的制备方法及其制备方法和应用，包括外周血多潜能细胞活性物冻干粉、富血小板血浆和NSADs。获取外周血多潜能细胞活性物冻干粉，加入富血小板血浆，获得外周血多潜能细胞活性物混悬液，然后向混悬液中逐滴添加NSADs，边加边混合均匀。本发明通过采用外周血多潜能细胞活性物结合富血小板血浆和NSADs，能够阻止炎性介质的释放，减轻炎症反应，从而减轻组织损伤；并且，在减轻患者疼痛的同时提高类风湿性关节炎的治疗效果，不仅缩短了治疗时间，而且不易复发
潜能细胞活性联合血小板血浆骨关节炎治疗药物制法应用

[发明专利]一种提高外周血多潜能细胞向软骨细胞分化的培养方法-CN201811040100.1在审
发明人：马亚东;黄宗堂;曹娜 -专利权人：丰泽康生物医药（深圳）有限公司
申请日： 2018-09-03 - 公布日： 2019-01-01 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明涉及一种提高外周血多潜能细胞向软骨细胞分化的培养方法，属于细胞生物学技术和再生医学领域，取外周血多潜能间充质基质细胞进行原代培养，得到第三代细胞；将第三代传代外周血多潜能间充质基质细胞与人关节软骨细胞按共在诱导培养基中培养，本发明采用的一种提高外周血多潜能细胞向软骨细胞分化的培养方法，外周血多潜能干细胞和软骨细胞共培养，两种细胞相互促进增殖和分化，可减少软骨细胞增殖传代次数并节省软骨细胞数量，提高了分化率，对建立种子细胞源是提供一种高效的方法
外周血软骨细胞多潜能细胞分化间充质基质细胞传代第三代细胞潜能细胞生物学技术多潜能干细胞软骨细胞增殖软骨组织工程人关节软骨诱导培养基医学实验原代培养再生医学种子细胞分化率细胞源增殖

[发明专利]用于治疗糖皮质激素依赖性皮炎的多潜能细胞活性物与富血小板血浆复合物及制法和应用-CN201910757192.3在审
发明人：马亚东;黄宗堂;曹娜 -专利权人：丰泽康生物医药(深圳)有限公司
申请日： 2019-08-12 - 公布日： 2019-12-20 - 主分类号： A61K35/51 文献下载
摘要：本发明涉及干细胞制剂技术领域，特别涉及一种用于治疗糖皮质激素依赖性皮炎的外周血多潜能细胞活性物与富血小板血浆的复合物及其制备方法和应用，包括外周血多潜能细胞、间充质干细胞和富血小板血浆。将富血小板血浆与外周血多潜能细胞、间充质干细胞悬液混合，待外周血多潜能细胞、间充质干细胞融入富血小板血浆后，利用兴奋剂使富血小板血浆聚集，形成药物。
富血小板血浆多潜能细胞外周血间充质干细胞间充质干细胞悬液激素依赖性皮炎制备方法和应用干细胞制剂糖皮质激素依赖性皮炎体系稳定协同增效复合物活性物兴奋剂皮肤修复融入治疗

[发明专利]一种检测外周血乙肝表面抗体分泌细胞的方法-CN201710094716.6在审
发明人：吴超;刘勇;田辰;陈雨欣;黄睿 -专利权人：南京鼓楼医院
申请日： 2017-02-16 - 公布日： 2017-06-06 - 主分类号： G01N33/569 文献下载
摘要：本发明涉及一种检测外周血乙肝表面抗体分泌细胞的方法。本发明通过体外刺激活化人外周血单个核细胞(PBMC)，再采用预处理的PVDF板检测PBMC中抗‑HBs分泌细胞，检测到一百万个PBMC中的一个抗‑HBs分泌细胞。本发明克服了目前外周血抗‑HBs分泌细胞的检测困难之处外周血抗‑HBs分泌细胞数量少，检出率低，实验重复性差，操作繁琐、耗时长、难度大，且需要采取的外周血量多，例如CPG、CD40L、美洲商陆丝裂原等B本发明用R848、HBsAg和IL‑2刺激活化人外周血B细胞，并用HBsAg预包被的PVDF板捕获人外周血抗‑HBs分泌细胞，减少了检测用血量，提高了检测的敏感度。
一种检测外周血乙肝表面抗体分泌细胞方法

[发明专利]利用磁珠分离人外周血中CD4⁺和CD25⁺淋巴细胞的方法-CN201310219433.1有效
发明人：许恒毅;魏华;熊勇华;赖卫华 -专利权人：南昌大学
申请日： 2013-06-05 - 公布日： 2013-09-18 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了分离富集外周血中CD4+和CD25+调节性淋巴细胞的方法，更好地为CD4+和CD25+调节性淋巴细胞进行后续研究提供基础，涉及生物医学领域。方法包括多臂井星聚合物与鼠抗人CD4+或CD25+单克隆抗体共价偶联、鼠抗人CD4+或CD25+单克隆抗体修饰的多臂井星聚合物再包被长链生物素分子、鼠抗人CD4+或CD25+单克隆抗体和长链生物素共修饰的多臂井星聚合物捕获外周血样品中的CD4+和CD25+淋巴细胞、链霉亲和素修饰的纳米磁珠识别并偶联外周血中长链生物素化多臂井星聚合物、被捕获CD4+和CD25+淋巴细胞的分离及重悬等步骤。重悬液可以直接进行后续分析，与传统的细胞分离方法相比，该方法更适用于在复杂外周血样品中对CD4+和CD25+淋巴细胞进行磁分离，提高了外周血样品中CD4+和CD25+淋巴细胞分离效率。
利用分离人外周血中 cd4 sup cd25 淋巴细胞方法

[发明专利]直接分离CD4⁺和CD8⁺淋巴细胞的方法-CN201310219459.6有效
发明人：许恒毅;熊勇华;魏华;赖卫华 -专利权人：南昌大学
申请日： 2013-06-05 - 公布日： 2013-09-18 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了分离富集外周血中CD4+和CD8+淋巴细胞的方法，更好地为CD4+和CD8+淋巴细胞进行后续研究提供基础，涉及生物医学领域。方法包括多臂井星聚合物与鼠抗人CD4+或CD8+单克隆抗体共价偶联、鼠抗人CD4+或CD8+单克隆抗体修饰的多臂井星聚合物再包被长链生物素分子、鼠抗人CD4+或CD8+单克隆抗体和长链生物素共修饰的多臂井星聚合物捕获外周血样品中的CD4+和CD8+淋巴细胞、链霉亲和素修饰的纳米磁珠识别并偶联外周血中长链生物素化多臂井星聚合物、被捕获CD4+和CD8+淋巴细胞的分离及重悬等步骤。重悬液可以直接进行后续分析，与传统的细胞分离方法相比，该方法更适用于在复杂外周血样品中对CD4+和CD8+淋巴细胞进行磁分离，提高了外周血样品中CD4+和CD8+淋巴细胞分离效率。
直接分离 cd4 sup cd8 淋巴细胞方法

[发明专利]一种富集分离人外周血CD34⁺和CD91⁺淋巴细胞的方法-CN201310219417.2有效
发明人：许恒毅;傅芬;黄小林;刘雯婷;范丽娟;熊勇华 -专利权人：南昌大学
申请日： 2013-06-05 - 公布日： 2013-09-18 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了分离富集外周血中CD34+和CD90+干细胞的方法，更好地为CD34+和CD90+干细胞进行后续研究提供基础，涉及生物医学领域。方法包括多臂井星聚合物与鼠抗人CD34+或CD90+单克隆抗体共价偶联、鼠抗人CD34+或CD90+单克隆抗体修饰的多臂井星聚合物再包被长链生物素分子、鼠抗人CD34+或CD90+单克隆抗体和长链生物素共修饰的多臂井星聚合物捕获外周血样品中的CD34+和CD90+干细胞、链霉亲和素修饰的纳米磁珠识别并偶联外周血中长链生物素化多臂井星聚合物、被捕获CD34+和CD90+干细胞的分离及重悬等步骤。重悬液可以直接进行后续分析，与传统的细胞分离方法相比，该方法更适用于在复杂外周血样品中对CD34+和CD90+干细胞进行磁分离，提高了外周血样品中CD34+和CD90+干细胞分离效率。
一种富集分离人外周血 cd34 sup cd91 淋巴细胞方法

[发明专利]自体脂肪干细胞共培养促进外周血造血干细胞增殖方法-CN201810711449.7在审
发明人：蔡国辉;高守泉 -专利权人：湖南未名三胞转化医学科技有限公司
申请日： 2018-07-03 - 公布日： 2018-12-18 - 主分类号： C12N5/0789 文献下载
摘要：本发明提供一种自体脂肪干细胞共培养促进外周血造血干细胞增殖方法，包括：取人脂肪间充质干细胞经过原代分离培养和传代培养后，进行无血清化，获得多代培养的无血清培养液和多代培养的传代干细胞；合并多代培养的传代干细胞，离心收集得到干细胞上清液；并且，合并所述多代培养的无血清培养液，得到合并培养液；将所述合并培养液和所述细胞上清液混合，再与无血清培养液混合，作为外周血干细胞培养基进行培养，以进行自体脂肪干细胞共培养促进外周血造血干细胞增殖本发明通过自身的脂肪干细胞代替异基因外周血造血干细胞，作为自身造血干细胞的稳定的来源，方法简单，费用低，大大提高了造血干细胞总数，从而满足了临床的需求。
造血干细胞干细胞外周血多代无血清培养液自体脂肪培养液增殖合并传代上清液人脂肪间充质干细胞外周血干细胞脂肪干细胞传代培养离心收集原代分离培养基无血清异基因细胞

[发明专利]一种提高外周血多潜能细胞向软骨细胞分化的无血清培养基-CN201811040115.8在审
发明人：马亚东;黄宗堂;曹娜 -专利权人：丰泽康生物医药（深圳）有限公司
申请日： 2018-08-30 - 公布日： 2019-01-04 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明属于干细胞分化技术领域，具体涉及一种提高外周血多潜能细胞向软骨细胞分化的无血清培养基，包括基础培养基，还添加以下物质：转化生长因子β1、转化生长因子β3、胰岛素样生长因子、黄芪多糖、紫苏籽提取物、本发明提供的细胞培养液中包含多种生长因子和多种提取物，各组分配伍合理，协同促进了诱导外周血多潜能细胞向软骨细胞分化，提高了外周血多潜能细胞向软骨细胞分化的数量并缩短了分化的时间。
多潜能细胞软骨细胞外周血分化转化生长因子β 胰岛素样生长因子无血清培养基紫苏籽提取物干细胞分化基础培养基昆布提取物无血清培养细胞培养液丙酮酸钠地塞米松黄芪多糖抗坏血酸人参皂苷生长因子转铁蛋白提取物配伍诱导协同

[发明专利]一种CAR-NK细胞的培养方法-CN202011189833.9在审
发明人：湛振键;齐国光;刘世豪 -专利权人：广东康盾生物工程技术有限公司
申请日： 2020-10-30 - 公布日： 2021-01-26 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明提供了一种CAR‑NK细胞培养方法，包括以下步骤：S1、采集健康供者的外周血，分离得到外周血单个核细胞；S2、从外周血单个核细胞中分选出NK细胞；S3、将带有嵌合抗原受体基因的慢病毒载体感染步骤S2本发明的CAR‑NK细胞培养方法操作简单，培养获得的NK细胞纯度高、数量多，CAR‑NK细胞数量多、杀伤活性高。
一种 car nk 细胞培养方法

[发明专利]一种人外周血淋巴细胞的检测方法-CN201910671950.X在审
发明人：何淼;李国平;张涛 -专利权人：泛肽生物科技(浙江)有限公司
申请日： 2019-07-24 - 公布日： 2019-11-22 - 主分类号： G01N15/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种人外周血淋巴细胞的检测方法。本发明取人抗凝外周血，分别加入抗人CD3、CD4、CD8、CD45单克隆抗体，以及抗人CD3、CD56、CD16、CD45单克隆抗体，然后再加入包含荧光探针的溶血素工作液，从而分别获得人外周血T淋巴细胞亚群和NK淋巴细胞亚群百分比和绝对计数值，实现对人外周血淋巴细胞的检测。本发明具有操作简便，样本稳定保存时间长，精确度高，多指标输出等优点。
人外周血淋巴细胞单克隆抗体人外周血荧光探针多指标工作液溶血素外周血检测人抗亚群样本输出保存

[发明专利]一种采用多参数流式细胞术检测外周血免疫细胞的方法-CN202310688511.6在审
发明人：周清;杨潇蓉;王崧榕;陈志红;徐崇锐;杨明意;高鸣;邓嘉怡 -专利权人：广东省人民医院
申请日： 2023-06-12 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： G16B40/20 文献下载
摘要：一种采用多参数流式细胞术检测外周血免疫细胞的方法，包括如下步骤，步骤A：外周血采集；步骤B：外周血单个核细胞分离和冻存；步骤C：解冻和细胞计数；步骤D：多色流式细胞术；步骤E：数据分析和模型训练。本发明能够预测免疫治疗患者的疗效，一方面基于外周血作为样本，创伤小、能够多次检测监控，另一方面通过联合细胞功能和数量，使得模型的预测准确性达到了89％，此外，本发明基于蛋白质表达，更具有可信度。
一种采用参数细胞检测外周血免疫方法

[发明专利]与G蛋白激酶信号途径修饰剂形成的N－甲酰基肽受体复合物-CN00815686.7无效
发明人： J·A·克拉格特;C·帕尔默 -专利权人：海斯塔泰克有限责任公司
申请日： 2000-10-12 - 公布日： 2005-06-29 - 主分类号： C07K14/00 文献下载
摘要：本发明描述了抑制人外周血单个核细胞或多形核细胞、或固定的组织细胞的促炎反应的方法。使细胞和促炎剂接触，以刺激促炎反应。本发明描述了受体复合物，其中G蛋白激酶信号途径修饰剂与经促炎剂刺激的人外周血单个核细胞或多形核细胞的细胞表面受体结合。
蛋白激酶信号途径修饰形成甲酰基肽受体复合物

[发明专利]一种外周血T细胞的培养方法-CN202111309326.9在审
发明人：马永光;黄国喜 -专利权人：马永光
申请日： 2021-11-06 - 公布日： 2021-12-21 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了一种外周血T细胞的培养方法，包括以下步骤：（1）采集外周血，采用Ficoll密度梯度离心法分离得到外周血单个核细胞；（2）向培养瓶中加入包被液包被过夜，弃去包被液，作为诱导培养瓶备用；（3）将步骤（1）的外周血单个核细胞采用诱导培养基重悬，在步骤（2）的培养瓶中培养2‑3天，完成诱导培养；（4）向培养瓶中添加包被液包被过夜，弃去培养液，作为增殖培养瓶备用；（5）将步骤（3）完成诱导培养的细胞加入步骤本发明提供的培养方法，先用诱导培养基对外周血单个核细胞进行诱导培养，再采用增殖培养基对细胞进行扩增，得到的T细胞活性好，数量多。
一种外周血细胞培养方法

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