本发明涉及高效猪组成型启动子及应用。本发明提供的猪组成型启动子,所述启动子来自猪TMSB10基因的‑1893bp~184bp区,其序列选自如SEQ ID NO:1‑7所示的核苷酸序列。本发明还提供猪杂合启动子,其是将所述猪组成型启动子与hCMV增强子融合获得的启动子。本发明首次从猪中克隆获得高效组成型启动子,并成功构建出含有hCMV增强子序列的猪杂合启动子,并对启动子的活性进行了检测。结果表明,猪杂合启动子的活性约为hCMV启动子活性的1.5倍。本发明的启动子可用于猪TMSB10基因的转录调控机制研究,并用于哺乳动物细胞中进行相关蛋白表达及转基因研究,为转基因技术提供技术支持。
本申请涉及生物技术领域,尤其涉及一种生物素化外源重组蛋白用表达载体及制备方法和应用;所述表达载体包括包括VV启动子,VV启动子用于替换表达载体的Tac启动子,VV启动子是通过改造AV3启动子所得的改造启动子,VV启动子的核苷酸序列包括与如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列同源性>90%的核苷酸序列;通过改造表达载体的AV3启动子得到VV启动子,并通过VV启动子替换表达载体上原始的Tac启动子,可以通过嵌合作用,提高表达蛋白的表达效率,因此可以通过改造启动子序列,改善表达载体在表达外源蛋白时的表达效率,从而提高表达载体在表达生物素化外源重组蛋白的表达率。
本发明涉及一种启动子文库,包括至少两个启动子,其中一个启动子包括SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列,另一个启动子包括SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列。在构建启动子文库时,以整合型载体pDG1730作为出发载体,插入转录终止子T1T2、T0以及报告基因,得到启动子探针载体pDGT‑GFP;再选取四个在枯草杆菌中具有强转录强度的启动子作为出发启动子,设计24条在退火后能形成相同黏性末端的寡核苷酸引物,借助寡核苷酸退火,经载体连接转化得到启动子文库。通过测定转化子的相对荧光强度,筛选得到两个比强启动子P43和出发启动子更强的启动子,经筛选得到的启动子可用于增强蛋白的表达。
一种植物胚乳特异启动子及其应用,涉及一种植物启动子及其应用。本发明的目的是提供一种在水稻胚乳组织中特异性表达的启动子及其表达载体,以及启动子和表达载体的用途。该启动子的DNA序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过农杆菌介导法转化水稻,成功获得转基因植株。经过PCR验证和潮霉素筛选,表明水稻胚乳特异性启动子已经整合到水稻基因组中;GUS组织化学染色以及GFP激发光鉴定证实ZOU基因的启动子为胚乳特异性表达启动子。该启动子在启动目的基因在植物表达中的应用。