本发明公开了一种制备(2S,3R)‑2‑苯甲酰氨甲基‑3‑羟基丁酸甲酯的方法,该方法包括:制备含羰基还原酶基因的工程菌和含葡萄糖脱氢酶基因的工程菌;分别制备两种工程菌的静息细胞悬液;将两种静息细胞悬液混合后,再与底物外消旋2‑苯甲酰氨甲基‑3‑羰基丁酸甲酯、氢供体和辅因子混合,进行不对称还原反应,制得(2S,3R)‑2‑苯甲酰氨甲基‑3‑羟基丁酸甲酯;羰基还原酶基因的碱基序列如SEQ ID NO.1所示,所述葡萄糖脱氢酶基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示。该方法可催化底物外消旋2‑苯甲酰氨甲基‑3‑羰基丁酸甲酯反应生成(2S,3R)‑2‑苯甲酰氨甲基‑3‑羟基丁酸甲酯,提高了产物的转化率和纯度。
本发明公开了一种水解酶,所述水解酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,同时提供了一种使用该水解酶合成(R)‑(‑)‑3‑(氨甲酰甲基)‑5‑甲基己酸的方法,以3‑异丁基戊二酰亚胺为底物,在水解酶的催化下合成产物(R)‑(‑)‑3‑(氨甲酰甲基)‑5‑甲基己酸。本发明提供的(R)‑(‑)‑3‑(氨甲酰甲基)‑5‑甲基己酸酶催化合成方法,整体工艺简单,反应条件温和,转化率高,具有极高的手性选择性,且绿色环保,适合大规模工业化生产,应用前景广阔。