本发明公开了一组特异性结合丁香假单胞杆菌豌豆致病型的核酸适配体及其应用,所述核酸适配体的核心序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明的丁香假单胞杆菌豌豆致病的ssDNA适配体亲和性强、特异性高,该适配体能高特异性地检测出丁香假单胞杆菌豌豆致病型,可以为检测丁香假单胞杆菌豌豆致病型的检疫鉴定提供有利依据。
本发明提供了一种从临床血液中检测铜绿假单胞杆菌病原菌的方法,包括以下步骤:(1)血液中铜绿假单胞杆菌基因组DNA的提取;(2)PCR检测:a、利用铜绿假单胞杆菌基因组DNA序列设计特异性的PCR引物,PCR引物包括正向引物和反向引物;正向引物如SEQ ID NO.1所示;反向引物如SEQ ID NO.2所示;引物的扩增片段长度为187bp;b、以从血液中提取的铜绿假单胞杆菌基因组DNA为模板,采用PCR引物进行PCR扩增;c、对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳及检测,扩增出长度为187bp的片段则判定为检测出铜绿假单胞杆菌。本发明方法快速高效,特异性和灵敏度高,对血液中铜绿假单胞杆菌的检测极限达到10CFU/mL,在临床上具有十分广阔的应用前景。