本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及调控棉花黄萎病抗性的棉花钙依赖蛋白激酶GhCPK33基因及应用。本发明通过对陆地棉中接种黄萎病菌后,利用不同时间点RAN‑Seq数据进行分析,筛选得到一种受黄萎病诱导表达的依赖钙离子的蛋白激酶GhCPK33基因,该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;该基因编码的蛋白质序列如通过VIGS体系,在棉花中沉默相应的基因,接种黄萎病菌,快速鉴定该基因在棉花黄萎病抗性中的功能。本发明分离的基因对棉花黄萎病的抗性中起负调控作用,沉默该基因,能够显著提高棉花对黄萎病菌的抗性。
本发明属于植物基因工程技术领域,涉及调控棉花对黄萎病和干旱抗性的转录因子GhWRKY1‑like基因及应用。对陆地棉接种黄萎病菌后不同时间点RAN‑Seq数据进行分析,筛选得到受黄萎病诱导表达的转录因子基因GhWRKY1‑like,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;蛋白质序列如SEQ ID NO:2所示利用VIGS体系,在棉花中沉默GhWRKY1‑like后接种黄萎病菌,快速证实该基因对棉花黄萎病抗性具有正向调控作用。利用GhWRKY1‑like超量表达的棉花和拟南芥材料,进一步验证该基因在黄萎病和干旱抗性中的正向调控功能,即超量表达该基因能够显著提高植物对黄萎病菌和干旱的抗性。
本发明公开了一种抗黄萎病相关蛋白GbVIP1及其编码基因与应用,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明蛋白GbVIP1来自抗黄萎病海岛棉品种海7124,属于bZIP转录因子家族的I亚家族,具有保守的bZIP结构域。本发明研究发现黄萎病菌侵染条件下GbVIP1基因上调表达,沉默GbVIP1基因降低了海岛棉对黄萎病菌的抵抗能力,所以GbVIP1蛋白对棉花抗黄萎病育种具有重要的意义。
本发明公开了棉花GhLecRK1基因在植物抗黄萎病中的应用。本发明棉花GhLecRK1基因核苷酸基序列如SEQ ID NO.1、氨基酸序列如SEQ ID NO.1;本发明GhLecRK1基因在棉花根中表达较其它组织高,且受黄萎病菌诱导表达,通过将棉花中的该基因进行沉默,黄萎病菌更易侵染植株,棉花抗黄萎病能力降低,表明其具有抗黄萎病的作用,可以应用于创制抗病新种质,从而进行植物品种改良。
本发明涉及棉花黄萎病菌致病机理领域,具体涉及棉花黄萎病菌致病相关蛋白及其编码基因、应用和突变体。所述基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。棉花黄萎病菌突变体T1027是一个研究棉花黄萎病菌分子致病机理的理想菌株,其基因和蛋白质的表达和修饰可作为靶位点用于设计和筛选抗真菌药剂,具备良好的应用潜力。