本发明提供了一种来源于土壤宏基因文库的阿魏酸酯酶基因,其核苷酸序列和氨基酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。将该酯酶基因插入到质粒pET‑28a(+)后,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中实现异源表达。纯化后的重组酶(BDS4)分子量为38.8kDa。此外,本发明首次提出新型阿魏酸酯酶可以水解邻苯二甲酸二甲酯,邻苯二甲酸二乙酯,邻苯二甲酸二丁酯等多种塑化剂。定点诱变实验表明BDS4的催化三联体由丝氨酸(S158),天冬氨酸(D256)和组氨酸(H286)组成,三者中任何氨基酸的突变都会导致BDS4失去催化能力。在木聚糖酶的存在下,BDS4可明显提高从去淀粉麦麸中释放阿魏酸的量。本发明的新型阿魏酸酯酶,由于其特有的活性及酶学特性,使其可应用于饲料、造纸、食品、制药等领域。
本发明公开了一种富含阿魏酸的功能性黄酒及其生产方法,属于食品酿造技术领域。本发明的黑曲霉CCTCC NOM 2015202阿魏酸酯酶、淀粉酶、纤维素酶活力高,添加到黄酒发酵过程不会影响黄酒的正常发酵,同时加速了黄酒生产过程中原料的糖化,缩短了黄酒生产发酵周期,保持了黄酒原有的风味口感本发明方法以糯米为原料,落缸时接入高产阿魏酸酯酶的黑曲霉菌株孢子悬液,同时添加高含阿魏酸小麦麸皮,然后进行前酵、后酵、压榨,煎酒、灌装、封坛等工序。本发明所生产的黄酒不仅富含阿魏酸,具有抗氧化、降血压、抗血栓、降血脂、抗菌消炎、预防癌症、护肝、治疗糖尿病等功能,而且其生产工艺节能环保,提高了小麦生产副产物的附加值。