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[发明专利]一株生产苯酚的重组菌株及其应用-CN201510067424.4有效
发明人：张学礼;李清艳;苗良田;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2015-02-10 - 公布日： 2018-06-01 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一株生产苯酚的重组菌株及其应用，本发明提供了重组菌1，为将编码4‑羟基苯甲酸脱羧酶基因导入大肠杆菌中得到的重组菌1。上述重组菌1为如下重组菌1‑1或重组菌1‑2：所述重组菌1‑1为将所述编码4‑羟基苯甲酸脱羧酶基因及其人工调控元件M1‑12整合到大肠杆菌基因组中得到的重组菌1‑1；所述重组菌1‑2为将所述编码4‑羟基苯甲酸脱羧酶基因通过重组载体导入大肠杆菌得到的重组菌
重组菌苯酚脱羧酶基因羟基苯甲酸大肠杆菌生物发酵法重组菌株大肠杆菌基因组人工调控元件化学合成法生产苯酚合成绿色环保生产应用重组载体菌株可用整合应用

[发明专利]制备重组胱抑素C的方法-CN202111551776.9在审
发明人：蒋析文;黄黉;颜青青;况修丽;肖兰花 -专利权人：广州达安基因股份有限公司
申请日： 2021-12-17 - 公布日： 2022-04-29 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了制备重组胱抑素C的方法，具体地本发明采用了基因工程大肠杆菌重组融合表达Cys C蛋白，表达的Cys C重组蛋白在N端融合了特定标签序列从而实现了在大肠杆菌系统的可溶性高效率表达，且蛋白的稳定性高
制备重组胱抑素方法

[发明专利]一种合成乳链菌肽Nisin的异源表达体系及其应用-CN202111490749.5在审
发明人：周哲敏;崔文璟;索菲娅;钱红宇;韩来闯;程中一;刘中美;周丽;郭军玲 -专利权人：江南大学
申请日： 2021-12-08 - 公布日： 2022-03-29 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供了一种重组大肠杆菌，所述重组大肠杆菌采用pRSFDuet‑1载体过表达了乳酸链球菌素前体肽nisA和修饰蛋白nisB，同时采用pACYCDuet‑1载体过表达了修饰蛋白nisC。本发明提供了一种Nisin在大肠杆菌异源表达的方法，该方法利用大肠杆菌自身对Nisin的抗性，实现了Nisin的组成型表达，从而脱离了宿主代谢和基因表达的双重调节，降低了后期的改在难度，有潜力提高Nisin
一种合成乳链菌肽 nisin 表达体系及其应用

[发明专利]一种人源产肠毒素大肠杆菌粘附素EtpA融合蛋白及其应用-CN201410024763.X有效
发明人：彭健;王荣;蒋思文;潘中勉 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2014-01-20 - 公布日： 2018-06-08 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种人源肠毒素大肠杆菌粘附素EtpA融合蛋白及其应用，本发明提供了一种含有人源肠毒素大肠杆菌的粘附素基因的重组质粒pGEX‑etpA，将该重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)，诱导重组表达菌BL21(DE3)/pGEX‑etpA表达融合蛋白EtpA。利用表达的重组蛋白主动免疫初产蛋鸡，制备了针对这种蛋白的卵黄抗体，提取的卵黄抗体验证了重组蛋白具有良好的抗原性，并利用小鼠肠道攻毒试验及体外实验，证明提纯的卵黄抗体能够抑制ETEC菌株在小鼠肠道内及体外对上皮细胞的粘附
大肠杆菌卵黄抗体融合蛋白人源小鼠肠道重组蛋白肠毒素粘附素重组质粒转化粘附素基因产肠毒素上皮细胞体外实验重组表达重组质粒主动免疫产蛋鸡抗原性提纯菌株体外粘附制备应用诱导蛋白验证试验

[发明专利]一种高产L-苯丙氨酸的大肠杆菌及其构建方法和应用-CN202210148790.2在审
发明人：徐楠;刘立明;郭亮;刘佳 -专利权人：扬州大学;江南大学
申请日： 2022-02-17 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组大肠杆菌及其构建方法和应用，所述重组大肠杆菌可用于L‑苯丙氨酸的生产。本发明利用多轮诱变筛选对L‑苯丙氨酸结构类似物具有高抗性，且具有酪氨酸营养缺陷型突变菌株，并以温敏型重组质粒形式调控L‑苯丙氨酸合成途径中编码3‑脱氧‑7‑磷酸庚酸合酶和分支酸变位酶基因表达。本发明构建的重组大肠杆菌，在5 L发酵罐中，根据菌体生长阶段采取不同控温和补料方式，发酵时间为56 h条件下，L‑苯丙氨酸产量在62 g/L，糖酸转化率为25.2%，具有工业化应用前景和价值。
一种高产苯丙氨酸大肠杆菌及其构建方法应用

[发明专利]环氧琥珀酸水解酶及其载体和应用-CN201610222929.8有效
发明人：姜岷;赵凤莲;马江锋;董维亮;张越 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2016-04-12 - 公布日： 2019-08-30 - 主分类号： C12N9/14 文献下载
摘要：本发明还设计了含有环氧琥珀酸水解酶的重组质粒以及含有重组质粒的大肠杆菌重组菌，并公开了大肠杆菌重组菌在超声辅助全细胞生产D‑酒石酸中的应用，同时对超声辅助大肠杆菌全细胞催化环氧琥珀酸转化为酒石酸的条件进行了优化
琥珀酸水解及其载体应用

[发明专利]巨大芽孢杆菌ALA2细胞色素P450酶基因及其重组质粒的构建及酶的纯化方法-CN201110350812.5有效
发明人：李迅;王婷;王亮亮 -专利权人：南京林业大学
申请日： 2011-11-09 - 公布日： 2012-04-04 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：巨大芽孢杆菌ALA2细胞色素P450酶基因及其重组质粒的构建及酶的纯化方法，该基因的核苷酸序列cypI如SEQIDNO.1所述。通过对大肠杆菌表达载体的选择和基因的定向改造，选择的pTrc99A载体使重组蛋白的表达量大为增加，比选用的pET20b载体的重组蛋白表达量增加了3.8倍，酶活达到770U/mL。将改造后的编码巨大芽孢杆菌ALA2细胞色素P450酶基因cypI插入pTrc99A，并转化大肠杆菌，其在大肠杆菌中表达的酶活较原始基因cyp提高了32%，酶活达到1020U/mL（图-2）。
巨大芽孢杆菌 ala2 细胞色素 p450 基因及其重组质粒构建纯化方法

[发明专利]一种重组大肠杆菌、制备方法及合成3,4‑二羟基丁酸的方法-CN201710611460.1在审
发明人：高海军;高玉 -专利权人：北京理工大学
申请日： 2017-07-25 - 公布日： 2017-11-03 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及一种重组大肠杆菌、制备方法及合成3,4‑二羟基丁酸的方法，属于生物合成领域。通过敲除大肠杆菌中的木糖异构酶基因xylA、2‑酮酸醛缩酶基因yjhH、2‑酮酸醛缩酶基因yagE和醇脱氢酶基因，过表达木糖脱氢酶基因和/或2‑酮酸脱羧酶基因，过表达醛脱氢酶基因，得到重组大肠杆菌。以木糖为基础底物，还可以在木糖的基础上添加葡萄糖和/或甘油形成复合底物，通过重组大肠杆菌生物合成3,4‑二羟基丁酸，副产物极少且可通过通路代谢优化阻断副产物的形成。
一种重组大肠杆菌制备方法合成羟基丁酸

[发明专利]一种制备具有自絮凝能力的大肠杆菌菌株的方法-CN202111508630.6在审
发明人：李翔宇;汪志明;刘洋;余超;陆姝欢;杨艳红 -专利权人：嘉必优生物技术（武汉）股份有限公司
申请日： 2021-12-10 - 公布日： 2022-04-15 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种制备具有自絮凝能力的大肠杆菌菌株的方法。所述方法包括：将重组唾液酸糖基转移酶基因转化至大肠杆菌中；所述重组唾液酸糖基转移酶基因包括6’唾液酸糖基转移酶基因和3’唾液酸糖基转移酶基因，所述6’唾液酸糖基转移酶基因缺失40％～100％的基因片段。本发明将特定的重组唾液酸糖基转移酶基因导入大肠杆菌中得到一种可以自絮凝的大肠杆菌菌株，其可以在不借助絮凝剂的情况下，形成絮凝状态，进而提高其生产聚唾液酸等唾液酸低聚糖的效率中应用。
一种制备具有絮凝能力大肠杆菌菌株方法

[发明专利]利用葡萄糖生产对羟基苄醇或天麻素的重组大肠杆菌及用途-CN201510264006.4有效
发明人：刘涛;白艳芬;殷华;毕慧萍;庄以彬;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2015-05-21 - 公布日： 2018-11-06 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了利用葡萄糖生产对羟基苄醇或天麻素的重组大肠杆菌及用途，利用葡萄糖生产天麻素的重组大肠杆菌，是所述重组大肠杆菌包括pCDFDuet‑aroG*‑ppsA‑pgm‑galU及pETDuet‑ubiC‑CAR‑Sfp‑ugt73b6本发明通过构建新的对羟基苄醇合成通路，调控从葡萄糖到酪氨酸的代谢流，得到高产天麻素苷元对羟基苄醇的大肠杆菌，对羟基苄醇产量达到240mg/L；引入高效UDP葡萄糖基转移酶突变体，将天麻素与对羟基苄醇的生物合成途径有机地结合在一起
利用葡萄糖生产羟基天麻重组大肠杆菌用途

[发明专利]利用大肠杆菌原核表达系统生产的小麦蛋白质二硫键异构酶及方法和应用-CN201310373089.1有效
发明人：胡松青;张婷婷;侯轶;刘光毅;李琳 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2013-08-23 - 公布日： 2013-12-11 - 主分类号： C12N9/90 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用大肠杆菌原核表达系统生产的小麦蛋白质二硫键异构酶及方法和应用。采用技术方案是：从小麦幼叶中提取小麦总RNA，经RT-PCR获取wPDI基因。将目的基因连接到载体PET-30b中，构建重组质粒。将重组质粒转入到大肠杆菌BL21感受态细胞中，在LB培养基中诱导表达，培养重组大肠杆菌，离心收集菌体细胞；用超声法破碎菌体细胞后，离心后收集上清液；经一次Ni-sepharose亲和层析，获得wPDI。本发明通过大肠杆菌表达系统，实现了wPDI大量表达和简便的纯化工艺；获得的wPDI在面粉的加工品质实验中显示了良好的改善小麦加工品质的作用，可用于面粉加工中。
利用大肠杆菌表达系统生产小麦蛋白质二硫键异构酶方法应用

[发明专利]一种重组大肠杆菌、制备方法及其合成D-1,2,4-丁三醇的方法-CN201711499350.7有效
发明人：高海军;马鹏飞;王金保;董润安 -专利权人：北京理工大学
申请日： 2017-12-29 - 公布日： 2021-01-01 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及一种重组大肠杆菌、制备方法及其合成D‑1，2，4‑丁三醇的方法，属于生物技术领域。在大肠杆菌中敲除xylA、yjhH和yagE，过表达mdlC和xdh的基础上，进一步敲除2‑酮酸还原酶基因、丙酮醛合酶基因、转氨酶基因、转氢酶基因、乙酸激酶基因和磷酸转乙酰基酶基因中的一种以上；和/或过量表达木糖酸脱水酶基因、醇脱氢酶基因和6‑磷酸‑葡萄糖脱氢酶基因中的一种以上，得到重组大肠杆菌。以木糖为基础底物，还可添加葡萄糖、乙酸、甘油形成复合底物，重组大肠杆菌生物合成D‑1，2，4‑丁三醇副产物极少。所述制备方法简单，生产周期短，成本较低，具有很好的工业开发和应用前景。
一种重组大肠杆菌制备方法及其合成丁三醇

[发明专利]一种含α-葡萄糖苷酶基因的重组大肠杆菌及其应用-CN201710655857.0有效
发明人：朱林江;陈小龙;范永仙;陆跃乐;陈路易 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2017-08-03 - 公布日： 2020-10-09 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种含α‑葡萄糖苷酶基因的重组大肠杆菌及其应用，所述重组大肠杆菌是将SEQ ID NO.1所示α‑葡萄糖苷酶基因转入大肠杆菌宿主细胞获得的。本发明所述生产L‑薄荷醇‑α‑糖苷的含α‑葡萄糖苷酶基因的重组大肠杆菌，能够在胞内高效合成α‑葡萄糖苷酶，以L‑薄荷醇为底物，麦芽糖为辅助底物，高效催化L‑薄荷醇的糖基化反应，反应10‑24小时，可得到大于
一种葡萄糖苷酶基因重组大肠杆菌及其应用

[发明专利]一种产酪醇的重组大肠杆菌及其构建方法和应用-CN201910754497.9有效
发明人：陈献忠;徐微;沈微 -专利权人：江南大学
申请日： 2019-08-15 - 公布日： 2021-05-28 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种产酪醇的重组大肠杆菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。所述的大肠杆菌异源表达了密码子优化后的酿酒酵母丙酮酸脱羧酶基因ARO10*。该重组大肠杆菌是在大肠杆菌基因组的lacI位点，trpE位点，pabB位点，pabA位点，pykF位点的五个位点进行删除的同时整合上ARO10*基因，得到了含多个拷贝的ARO10*基因的菌株。在上述重组菌的基础上，随机在多个位点进行了ARO10*基因的整合，发现在yccX位点插入ARO10*基因，能获得高产酪醇的菌株。利用该菌株发酵不需要诱导剂和抗生素。发酵48h，酪醇产量可达到28mM。
一种产酪醇重组大肠杆菌及其构建方法应用

[发明专利]高产琥珀酸的重组大肠杆菌及其构建方法和应用-CN202111299764.1有效
发明人：刘立明;罗旭;王学明;陈修来;刘佳;唐文秀;徐祖伟;高聪;郭亮;胡贵鹏;宋伟 -专利权人：江南大学;淮北创新生物新材料有限责任公司
申请日： 2021-11-04 - 公布日： 2022-12-02 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及一种生物工程技术领域，尤其涉及一种高产琥珀酸的重组大肠杆菌及其构建方法和应用。其中，高产琥珀酸的重组大肠杆菌是将编码大肠杆菌中甲酸脱氢酶的基因fdhF替换为来自假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh1，并上调耐酸胁迫和耐渗透压胁迫的外膜蛋白调节器OmpR。CRISPR‑cas9基因编辑技术将宿主菌FMME‑N‑5中编码甲酸脱氢酶基因fdhF替换为假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh1，并运用RBS序列和启动子策略上调耐酸胁迫和耐渗透压胁迫的关键外膜蛋白调节器OmpR，所得到的重组大肠杆菌没有抗性
高产琥珀酸重组大肠杆菌及其构建方法应用