该重组菌是通过将苏氨酸脱氨酶基因、氨基酸脱氢酶基因以及甲酸脱氢酶基因转化至宿主菌中得到的;所述苏氨酸脱氨酶基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示;所述氨基酸脱氢酶基因的核苷酸序列如序列表SEQ本发明实施例提供的重组菌,可以实现在同一个载体上同时高效表达苏氨酸脱氨酶、氨基酸脱氢酶以及甲酸脱氢酶;将该重组菌用于转化L‑苏氨酸来制备L‑2‑氨基丁酸,具有转化率高、制备成本低且操作简便等优点。
本发明公开了谷氨酸脱氢酶突变体及其应用,该突变体为下列之一:将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第402位赖氨酸突变为苯丙氨酸或天冬氨酸;第406位异亮氨酸突变为苯丙氨酸或苏氨酸;第121位苏氨酸和123位亮氨酸进行组合突变;第379位丙氨酸和383位亮氨酸进行组合突变。本发明通过定向进化与半理性设计相结合的分子改造方法,显著提高了源于Pseudomonas putida的谷氨酸脱氢酶对2‑羰基‑4‑(羟基甲基膦酰基)丁酸(PPO)的催化活力;解决了还原胺化法制备L‑草铵膦工艺中谷氨酸脱氢酶酶活低的问题