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[发明专利]一种在油松下胚轴中进行基因瞬时表达的方法-CN201811496734.8在审
发明人：马晶晶;钮世辉;李悦;李伟;刘双委 -专利权人：北京林业大学
申请日： 2018-12-07 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种在油松下胚轴中实现基因瞬时表达的方法，包括以下步骤：1)油松下胚轴的预处理；2)油松下胚轴组织预侵染的农杆菌菌液培养和处理；3)将下胚轴组织浸泡于导入了35S:Gus基因序列的农杆菌侵染溶液；4)超声波处理组织实现基因转入；5)下胚轴组织侵染后的继续培养。本发明建立的基因瞬时表达方法能够较高效地实现基因在油松下胚轴中表达，操作简单且结果可靠，可为油松基因功能验证和调控关系研究提供技术支持。
胚轴瞬时表达基因下胚轴组织侵染预处理基因功能验证超声波处理农杆菌菌液农杆菌侵染调控关系技术支持胚轴组织油松浸泡转入研究

[发明专利]一种青海大黄下胚轴组培与快繁方法-CN202011501375.8在审
发明人：裘江;张小惠;徐艺珈;赵冰雪 -专利权人：上海应用技术大学
申请日： 2020-12-17 - 公布日： 2021-03-09 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种青海大黄下胚轴组培与快繁方法，包括如下步骤：(1)外植体灭菌处理；(2)初代培养基筛选；(3)下胚轴愈伤组织诱导；(4)下胚轴愈伤组织增殖培养；(5)下胚轴愈伤组织芽分化；(6)生根培养；(7)组培苗移栽；本发明以优质青海大黄种子为外植体，通过灭菌处理、初代培养、愈伤组织诱导、愈伤组织增殖培养、愈伤组织芽分化、生根培养和组培苗移栽，使得下胚轴愈伤组织诱导率可达90％，愈伤组织增殖系数可达
一种青海大黄胚轴方法

[发明专利]一种诱导新麦草上胚轴形成愈伤组织并再生植株的方法-CN202211121398.5有效
发明人：任晓敏;云岚;艾芊;李珍;石凤翎;刘亚玲;孙耀文 -专利权人：内蒙古农业大学
申请日： 2022-09-15 - 公布日： 2023-07-28 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及植物组织培养技术领域，公开了一种诱导新麦草上胚轴形成愈伤组织并再生植株的方法，包括以下步骤：(1)、培养获得无菌幼苗；(2)、获得初代愈伤组织；(3)、获得胚性愈伤组织；(4)、培养得到不定芽；(5)、获得生根无菌苗；(6)、进行驯化和移栽；本发明所述培养基以诱导上胚轴产生愈伤组织，通过继代改善愈伤组织质量，形成胚性愈伤组织，由愈伤组织再分化长出新芽，在生根培养基上培养其生根，直至长出完整的新植株，建立起以上胚轴为外植体的高效新麦草再生体系；本发明采用胚轴这一新的外植体材料，优化缩短了建立新麦草再生体系的时间，提高了诱导和再生效率，并为后续新麦草遗传转化、组培扩繁、脱毒种质研究提供了新途径。
一种诱导麦草胚轴形成组织再生植株方法

[发明专利]一种大豆遗传转化方法-CN201010534520.2无效
发明人：许亦农;吴韩英;王戈亮;刘超;武旺;赵明明 -专利权人：中国科学院植物研究所
申请日： 2010-11-08 - 公布日： 2011-04-06 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明提供的方法，包括如下步骤：将外源基因导入大豆的下胚轴中，得到转基因大豆。所述大豆的下胚轴为含有0.5cm-1cm顶端分生组织的下胚轴；所述大豆的下胚轴按照如下方法制备：大豆种子萌发5天-6天，去除种皮、子叶、顶芽，得到含有0.5cm-1cm顶端分生组织的下胚轴为大豆的下胚轴本发明提供了的利用下胚轴为受体建立大豆遗传转化体系的方法，可在较短时间内快速高效产生不定芽，用于大豆基因工程的基本操作系统，对于大豆品质改良具有重要的理论和现实意义。
一种大豆遗传转化方法

[实用新型]一种植物组织培养用外植体切刀-CN201520922108.6有效
发明人：张景霞;张军;王芙蓉;张传云;刘国栋;陈煜;周娟;乔清华 -专利权人：山东棉花研究中心
申请日： 2015-11-18 - 公布日： 2016-04-06 - 主分类号： B26B3/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种植物组织培养用外植体切刀，包括金属柄、下胚轴切刀和子叶切刀；下胚轴切刀和子叶切刀分别设置在金属柄的两端；所述子叶切刀包括子叶底座和四个刀口方向一致的子叶刀片，四个子叶刀片依次连接形成矩形刀片框，子叶底座与四个子叶刀片的刀背固定连接；下胚轴切刀包括下胚轴底座和多个下胚轴刀片，下胚轴刀片平行设置在下胚轴底座上。本实用新型所述植物组织培养用外植体切刀，结构简单，通过一次操作即可得到多个外植体；提高外植体的制备速度，操作简单方便。
一种植物组织培养用外植体切刀

[发明专利]一种郁金香胚轴愈伤组织的诱导及再生方法-CN202211339300.3在审
发明人：王艳平;王森;杨江涛;黄含笑;谭明慧;刘开意 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2022-10-28 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种郁金香胚轴愈伤组织的诱导及再生方法，该方法包括以下步骤：1、将郁金香种子进行清洗和消毒后接种到萌发培养基上，所述萌发培养基为1/2MS培养基；2、待郁金香种子萌发后，选取郁金香种子萌发出的胚轴中的一部分作为愈伤诱导外植体，接种到愈伤诱导培养基上并暗培养，3、将胚轴切成0.2～0.3cm的小段，接种在原诱导培养基上继续暗培养；4、诱导培养15天后挑选生长旺盛的愈伤组织进行继代培养获得郁金香胚轴诱导的愈伤组织；5、将郁金香胚轴诱导的愈伤组织转入不定芽诱导培养基本发明采用的外植体为胚轴，该外植体来自于种胚萌发后的胚性器官，具有较高的活力，分生能力强，脱分化潜力大。
一种郁金香胚轴组织诱导再生方法

[发明专利]快速诱导繁殖偏穗鹅观草下胚轴愈伤组织的方法-CN201611178288.7有效
发明人：李葆春;甘敏;王化俊;孟亚雄;马小乐;杨轲;汪军成;任盼荣;姚立蓉;司二静 -专利权人：甘肃农业大学
申请日： 2016-12-19 - 公布日： 2019-01-18 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种植物愈伤组织诱导及培养的方法，尤其是一种偏穗鹅观草无毒条件下种子消毒及快速诱导繁殖其无菌实生苗下胚轴愈伤组织的方法。一种快速诱导繁殖偏穗鹅观草下胚轴愈伤组织的方法，其主要特点在于步骤如下：(1)无毒条件下无菌外植体的获得：(2)愈伤组织诱导：(3)愈伤组织增殖培养：将步骤(2)获得的颜色黄绿，质地疏松的愈伤组织切割成直径约0.1‑0.2cm的小块，然后转接到诱导愈伤组织增殖培养基中，培养25‑30d后继续转接到新的诱导愈伤组织增殖培养基中进行继代增殖，最终获得颜色黄绿，结构致密的优良愈伤组织材料。该方法能够在无毒条件下进行偏穗鹅观草的种子消毒并且快速诱导出其无菌实生苗下胚轴的愈伤组织，经过继代繁殖后，获得大量颜色黄绿，结构松脆的优良愈伤组织材料，可为偏穗鹅观草下胚轴组织培养以及细胞悬浮培养提供技术支撑
快速诱导繁殖偏穗鹅观草下胚轴组织方法

[发明专利]一种在棉花、咖啡、可可、香蕉或葡萄分生组织区选择转基因细胞的方法-CN99808805.6无效
发明人： E·L·雷希菲尔霍;F·J·利马阿拉皋 -专利权人：巴西农业研究公司
申请日： 1999-03-19 - 公布日： 2001-08-22 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明涉及一种在棉花、咖啡、可可、香蕉或葡萄植株中选择转基因分生组织细胞并随之制备转基因植株的方法。该方法包括步骤将外源基因导入棉花、咖啡、可可、香蕉或葡萄植株的胚轴顶端分生组织的细胞或包含所述植株分生组织的组织或器官中;通过将它们的胚轴或包含分生组织的组织培养在包含多发芽诱导剂的培养基中来诱导在前一步骤中改变的顶端分生组织区细胞的多发苗;并选择顶端区的转基因分生组织细胞,其中所述细胞通过将所述胚轴或包含分生组织的组织培养在包含选择剂的培养基中进一步培养或通过将选择剂用于来自分生组织区的细胞的多发芽而被转化。
一种棉花咖啡可可香蕉葡萄分生组织选择转基因细胞方法

[发明专利]一种大花银莲花的快速繁殖方法-CN202111315270.8在审
发明人：李彦慧;佟冠杰;逯锦春;曹丽娜;王金鑫;吴萌;李惠芳;张利英;王鑫颖;喻锌 -专利权人：河北农业大学
申请日： 2021-11-08 - 公布日： 2022-01-21 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种大花银莲花的快速繁殖方法，具体包括以下步骤：(1)种子消毒；(2)无菌苗的获得；(3)叶片和叶柄愈伤组织的诱导及分化；(4)上胚轴和下胚轴的诱导；(5)不定芽的增殖；(6)不定芽的生根诱导本发明以野生花卉大花银莲花(AnemonesilvestrisL.)的种子获得无菌苗，以叶片、叶柄、上胚轴和下胚轴为外植体，依次进行愈伤组织诱导、增殖、生根培养和炼苗移栽，建立了一套高效完整的组织培养快速繁殖体系
一种大花银莲花快速繁殖方法

[发明专利]一种棉花下胚轴单细胞的分离方法-CN202110469528.3在审
发明人：金双侠;张献龙;朱相潜;覃元;许忠平 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2021-04-28 - 公布日： 2021-06-18 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明涉及分子生物技术领域，且公开了一种棉花下胚轴单细胞的分离方法。该棉花下胚轴单细胞的分离方法，基于棉花叶片、愈伤组织、根的原生质体分离技术，对酶促体系进行优化改进，构建了适用于棉花下胚轴单细胞分离的实验体系，利用该方法可得到高质量，数量多的下胚轴单细胞，愈伤组织原生质体酶解方法中，酶解后的原生质体用W5solution重悬，本发明中用PBS+0.04％BSA进行重悬，效果较好，酶解时间只需4‑6小时，两次离心之后过40μm过滤筛，可以得到分散完整的下胚轴单细胞。
一种棉花胚轴单细胞分离方法

[发明专利]一种溪荪愈伤组织的高效诱导方法-CN201911189554.X有效
发明人：王玲;周晟;刘红艳 -专利权人：东北林业大学
申请日： 2019-11-28 - 公布日： 2022-06-07 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种溪荪愈伤组织的高效诱导方法，该方法以溪荪胚轴部分为诱导愈伤组织的外植体。先对成熟的溪荪种子进行消毒，然后接入培养基使其萌发出胚根，接着切取生长为0.5～1cm的胚轴和胚根部分放入诱导培养基，愈伤组织将在胚轴部位诱导出现。其最佳培养基为MS+1.0mg/L 6‑BA+1.5mg/L2,4‑D+30g/L蔗糖+7g/L琼脂，30天时诱导率高达95.34％，该方法为优化组织培养体系及建立遗传转化体系奠定了坚实的基础。
一种溪荪愈伤组织高效诱导方法

[发明专利]一种水曲柳嫩绿半致密型愈伤组织诱导不定芽再生的方法-CN201910725313.6有效
发明人：詹亚光;于磊;李新宇 -专利权人：东北林业大学
申请日： 2019-08-07 - 公布日： 2022-03-29 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种通过诱导嫩绿半致密愈伤组织这个关键环节，从而实现下水曲柳下胚轴和茎段经愈伤组织途径的不定芽再生与繁殖的方法。从成熟胚培养至子叶展开(21d)时，切取下胚轴，接种于a20培养基中；从无菌苗切取茎段，接种于c12培养基中，经暗/光交替培养，获得嫩绿色半致密型愈伤组织，下胚轴和茎段愈伤组织诱导率分别为88.69％和99.15％，不定芽在愈伤组织块半致密缝隙处形成，诱导率分别为10.52％和33.33％。本发明解决了水曲柳经愈伤组织途径难以分化不定芽瓶颈环节，通过高效的愈伤组织诱导及有效的不定芽再生，为水曲柳快速繁殖技术奠定了坚实的基础。
一种水曲柳嫩绿致密型愈伤组织诱导不定再生方法

[发明专利]利用长春花下胚轴培育再生植株的方法-CN200910195774.3有效
发明人：唐克轩;潘琪芳;王荃;袁芳;王国丰;刑世海;赵静雅 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2009-09-17 - 公布日： 2010-03-17 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：一种生物技术领域的利用长春花下胚轴培育再生植株的方法，包括如下步骤：取长春花种子，置于MS培养基上培养，待长出第一对子叶之时，取下胚轴，置于愈伤组织诱导培养基上进行培养，得愈伤组织；将愈伤组织接种到分化培养基上进行培养，得绿色愈伤组织；将绿色愈伤组织接种到不定芽诱导培养基上进行培养，得不定芽；取不定芽，置入生根培养基中进行培养，得试管苗；取试管苗，利用快速繁殖培养基进行快速繁殖，得再生植株。本发明的方法使得长春花下胚轴的不定芽分化率达81％，不定芽生根率为100％。
利用长春花胚轴培育再生植株方法

[发明专利]一种牡丹离体再生组培方法-CN201710099657.1有效
发明人：张改娜;史国安;侯典云 -专利权人：河南科技大学
申请日： 2017-02-23 - 公布日： 2018-08-10 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：一种牡丹离体再生组培方法，先将牡丹种子灭菌后取其成熟胚，接种在1/2MS培养基上培养；待成熟胚萌发后取其幼嫩的下胚轴，接种在改良MS培养基上培养15‑25天，至下胚轴切口处膨大；再将切口处膨大的下胚轴继代在改良MS培养基上接种14‑30天，至下胚轴膨大的切口处直接分化出牡丹不定芽；待牡丹不定芽长至3‑4cm时，将牡丹不定芽从根部切下，并接种在改良MS培养基上生根，即完成牡丹离体再生。本发明提供的一种牡丹离体再生组培方法，在PEG6000渗透胁迫突然解除及Ca2+和微量元素Mn2+、Zn2+、Mo6+和Cu2+的浓度增加的情况下，下胚轴可不经过愈伤组织而直接产生不定芽，略过了愈伤组织这一过程，解决了愈伤组织分化不定芽却比较困难、不定芽分化率一般比较低的问题。
一种牡丹再生方法

[发明专利]油桐下胚轴愈伤组织诱导及高效再生植株的方法-CN201410326807.4有效
发明人：谭晓风;李泽;张琳;卢锟;龙洪旭;吴玲利;林青;吕佳斌 -专利权人：中南林业科技大学
申请日： 2014-07-10 - 公布日： 2014-10-15 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了油桐下胚轴愈伤组织诱导及高效再生植株的方法,属于植物细胞工程领域。主要通过油桐下胚轴诱导愈伤组织、愈伤组织诱导不定芽、继代增殖培养、壮苗培养、生根培养、炼苗移栽等过程,不仅为快速繁殖优良油桐植株提供了一条途径,而且为以后通过基因工程的方法改良油桐的抗性、加速油桐分子育种进程及提高油脂质量等性状
油桐胚轴组织诱导高效再生植株方法

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