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[发明专利]基于液滴微流控的单细胞测序及应用-CN202080091329.7在审
发明人：刘传宇;刘龙奇;黄亚灵;袁月;王明月;王子斐;魏小雨;刘亚;王姗姗;王春青 -专利权人：青岛华大智造普惠科技有限公司
申请日： 2020-01-23 - 公布日： 2022-08-12 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明提供了一种测序文库及其应用，所提供的测序文库包括：第一核酸分子，所述第一核酸分子携带细胞标签序列和液滴标签序列；以及第二核酸分子，所述第二核酸分子携带插入片段和细胞标签序列。
基于液滴微流控单细胞应用

[发明专利]一种长片段DNA文库长配对末端测序方法-CN201910548031.3在审
发明人：罗美中;戴钊钊 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2019-06-22 - 公布日： 2019-09-17 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明属于全基因测序技术领域，具体涉及一种长片段DNA文库长配对末端测序方法。公开了一种基于单分子测序平台的长片段DNA文库长配对末端测序方法。发明的步骤为：提取全基因组DNA构建大片段文库；通过大片段文库克隆混合池DNA构建长末端paired‑end测序文库及克隆混合池，提取长末端paired‑end测序文库克隆混合池的DNA，去载体后进行测序
文库长片段DNA 末端测序混合池配对测序文库长末端基因组构建拼装克隆全基因组DNA 大片测序技术测序平台结构变异末端序列全基因组文库克隆歧义冗余单分子全基因测序位点组装评估

[发明专利]一种检测ctDNA中肿瘤特异基因的突变和甲基化的方法-CN202211600845.5在审
发明人：王思振 -专利权人：无锡泛生子生物科技有限公司
申请日： 2022-12-12 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测ctDNA中肿瘤特异基因的突变和甲基化的方法，包括如下步骤：S1、构建测序文库，并创建肿瘤样本；S2、ctDNA突变程度分析，根据肿瘤样本以及测序文库进行捕获测序得到FASTQ文件，肿瘤样本中的cfDNA携带有预先接入的分子标签；S3、根据测序文库进行若干轮巢式PCR扩增，通过第一轮PCR扩增对产物进行测序；S4、以第一轮PCR的产物为模板，采用引物组合乙进行第二轮PCR扩增，并进行测序，根据第一轮PCR扩增结合第二轮PCR扩增测序结果分析DNA样本中目标甲基化发生情况。本方法制备的测序文库能支持后续检测，每次检测的结果都可以代表全部原始ctDNA标本的突变状况及酶切位点覆盖区域的甲基化修饰情况，且不会造成灵敏度和特异性的降低。
一种检测 ctdna 肿瘤特异基因突变甲基化方法

[发明专利]FH测序文库的构建方法和引物组及试剂盒-CN201811451798.6有效
发明人：李妍珂;李全;陈玥茏;刘永初;刘阳;李阳;吕佩涛 -专利权人：深圳安吉康尔医学检验实验室
申请日： 2018-11-30 - 公布日： 2022-04-26 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明属于基因测序领域，具体涉及一种FH测序文库的构建方法和引物组及试剂盒。该FH测序文库的构建方法，包括如下步骤：获得DNA样本；利用第一引物集和第二引物集分别对DNA样本进行多重PCR扩增，分别得到第一扩增产物和第二扩增产物；将第一扩增产物和第二扩增产物混合，得到混合产物；利用测序接头引物对混合产物进行扩增，得到测序文库；其中，所述第一引物集的序列如SEQ ID NO.1‑130所示；所述第二引物集的序列如SEQ ID NO.131‑260所示。该FH测序文库的构建方法，具有高检测覆盖度和高均一性、样本消耗量少、样本要求低和大量节省检测成本的优点，并能为临床发现新发基因突变提供技术基础。
fh 序文构建方法引物试剂盒

[发明专利]一种单细胞RNA测序文库构建方法-CN201810150576.4有效
发明人：贾俊岭;肖政云;程果;吴超 -专利权人：浙江大学
申请日： 2018-02-13 - 公布日： 2021-06-08 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，本发明提供了一种单细胞RNA测序文库构建方法，所述方法包括：(1)向单细胞裂解体系中加入carrier RNA，以实现建库RNA量，且无需对全长cDNA进行预扩增；(2)利用商品化试剂盒或RNA测序文库构建方法以构建文库；(3)去除文库中carrier RNA转录而成的DNA；(4)高通量测序。本发明免除了现有方法中对于全长cDNA进行预扩增的步骤，文库构建过程中将加入的已知序列的RNA进行酶切剔除，使之不会对测序造成干扰，大幅降低了测序成本。
一种单细胞 rna 序文构建方法

[发明专利]以痕量DNA为基础的二代测序文库构建方法-CN201410158326.7有效
发明人：杨祖玉;王开乐;吴大飞;吕雪梅;吴仲义 -专利权人：中国科学院北京基因组研究所
申请日： 2014-04-18 - 公布日： 2014-07-23 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明涉及一种针对痕量DNA样本的二代测序文库的构建方法，利用随机碱基对每一个原始分子进行标定，进而通过现有的二代测序平台获得相应的DNA文库。本方法通过微量细胞分离、总DNA提取、插入片段的构建、PCR扩增基因组文库及及琼脂糖凝胶电泳回收目的片段等步骤，成功构建只需10-40ngDNA起始的全基因组二代测序文库。
痕量 dna 基础二代序文构建方法

[发明专利]一种构建高通量测序文库的方法-CN201510414381.2有效
发明人：高静;蔡亦梅;徐潇;吴超;张睿;王者馥;王绪敏;殷金龙;任鲁风 -专利权人：北京中科紫鑫科技有限责任公司
申请日： 2015-07-15 - 公布日： 2017-09-05 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明属于基因工程及分子生物学领域，具体涉及一种构建高通量测序文库的方法。步骤包括对（1）DNA进行片段化；（2）纯化；（3）连接接头；（4）扩增；（5）小片段去除；（6）文库固定等步骤。本发明的接头连接效率高，利用本发明的方法，能够简单、高效地利用测序板，降低了样品和试剂的损耗，构建高通量测序文库。
一种构建通量序文方法

[发明专利]一种高通量靶向建库的方法和应用-CN202011229857.2在审
发明人：尹东;张寅;汪单兰;黄泳欣;张静源 -专利权人：中山大学孙逸仙纪念医院
申请日： 2020-11-06 - 公布日： 2021-01-26 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明的方法包括如下步骤：基于检测的基因设计并合成靶向捕获探针和PCR扩增引物；将样本基因组DNA和靶向捕获探针杂交过夜，得到捕获的目的片段，环化，酶切，纯化，PCR扩增，得到构建的靶向测序文库；靶向测序文库纯化，检测文库DNA片段浓度和大小，二代测序，根据测序结果分析靶向测序文库的质量和测序信息。本发明能够在一轮PCR反应中扩增上百个检测基因，解决了多重PCR建库只能检测少量基因位点、实验条件难优化的不足；只有一轮PCR，且探针骨架上有随机barcode，减少PCR偏倚，能够区别PCR和测序引入的碱基错误
一种通量靶向方法应用

[发明专利]16SrRNA多重测序文库的构建方法-CN201610645199.2有效
发明人：王绪敏;赵倍伦;刘贵明;任重敢;于军 -专利权人：中国科学院北京基因组研究所
申请日： 2016-08-08 - 公布日： 2018-07-03 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及一种16SrRNA多重测序文库的构建方法。本发明提供的16SrRNA多重测序文库的构建方法获得测序文库测序反应得到的数据质量和平衡性更好，测序结果更加准确；可以实现的文库样品标记数量远大于现有技术；更加适用于土壤样品中细菌多样性的研究；大大提高了样品中细菌多样性研究的准确性
引物测序文库构建细菌分子生物学技术多样性测序反应土壤样品样品标记平衡性测序建库扩增文库研究

[发明专利]一种快速构建血浆DNA测序文库的方法和试剂盒-CN202010641329.1在审
发明人：陈迪;李亚丽;李天成;石燕滨;张江花;吴凯 -专利权人：北京贝瑞和康医学检验实验室有限公司
申请日： 2014-06-24 - 公布日： 2020-10-09 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明提供了用于构建血浆DNA测序文库的方法，包括以下步骤：1)抽提血浆DNA；2)任选将血浆DNA进行末端补平，获得末端补平后的血浆DNA；3)将任选末端补平后的血浆DNA进行3’悬A，获得3’悬A后的血浆DNA；4)将3’悬A后的血浆DNA与测序接头连接，获得连接产物；5)对连接产物进行纯化，获得纯化产物。本发明也提供用于构建血浆DNA测序文库的试剂盒。本发明大大简化了血浆DNA测序文库的构建流程，除去了由于PCR扩增造成的环境以及样本间的污染，降低了血浆DNA文库构建对环境的要求，同时也除去了由于PCR过程造成的基因组覆盖的不均一性，使得血浆样本文库构建更加低成本、高效、快速，血浆DNA测序结果更加真实、有效。
一种快速构建血浆 dna 序文方法试剂盒

[发明专利]一种快速构建血浆DNA测序文库的方法和试剂盒-CN201410311003.7有效
发明人：陈迪;李亚丽;李天成;石燕滨;张江花;吴凯 -专利权人：北京贝瑞和康医学检验实验室有限公司
申请日： 2014-06-24 - 公布日： 2020-07-17 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明提供了用于构建血浆DNA测序文库的方法，包括以下步骤：1)抽提血浆DNA；2)任选将血浆DNA进行末端补平，获得末端补平后的血浆DNA；3)将任选末端补平后的血浆DNA进行3’悬A，获得3’悬A后的血浆DNA；4)将3’悬A后的血浆DNA与测序接头连接，获得连接产物；5)对连接产物进行纯化，获得纯化产物。本发明也提供用于构建血浆DNA测序文库的试剂盒。本发明大大简化了血浆DNA测序文库的构建流程，除去了由于PCR扩增造成的环境以及样本间的污染，降低了血浆DNA文库构建对环境的要求，同时也除去了由于PCR过程造成的基因组覆盖的不均一性，使得血浆样本文库构建更加低成本、高效、快速，血浆DNA测序结果更加真实、有效。
一种快速构建血浆 dna 序文方法试剂盒

[发明专利]一种简化DNA甲基化文库及转录组共测序文库的构建方法-CN202110508599.X在审
发明人：谷红仓;钱飞箭;王云飞;车仙荣 -专利权人：杭州圣庭医疗科技有限公司
申请日： 2021-05-11 - 公布日： 2021-08-13 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开了一种简化DNA甲基化文库及转录组共测序文库的构建方法，包括如下步骤：步骤一，细胞样本准备；步骤二，将gDNA和mRNA分离；步骤三，将mRNA反转录成cDNA，再对cDNA进行文库富集和定量；步骤四，cDNA采用转座法进行文库构建后再PCR孵育；步骤五，准备测序文库；步骤六，限制性内切酶消化；步骤七，末端修复和加碱基“A”；步骤八，采用DNA连接酶连接甲基化接头；步骤九，亚硫酸氢盐转化甲基化文库；步骤十，甲基化文库的PCR富集；步骤十一，准备RRBS测序文库；本发明实现了对同一单细胞进行甲基化和转录组文库构建，提高实验操作便捷性，降低成本，提高了CpG岛的覆盖度。
一种简化 dna 甲基化文库转录组共测序文构建方法

[发明专利]一种高降解DNA测序文库的构建方法及其应用-CN201810870019.X在审
发明人：王进科;武剑 -专利权人：东南大学
申请日： 2018-08-02 - 公布日： 2018-12-21 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开了一种高降解DNA测序文库的构建方法及其应用，该构建方法是先将双链DNA 1变性，在得到的单链DNA 1的3′端连接单链接头，再用DNA聚合酶延伸连接单链接头的单链DNA 2使其成为双链DNA 2，然后向双链DNA 2无单链接头的一端连接标签T接头，成为双链DNA 3，最后用PCR扩增两端连接接头的双链DNA 3使其成为可测序文库。该方法极大的简化了基于ssDNA的NGS文库制备的过程，实现了低成本、高效率、高通量和低偏倚的高降解DNA测序文库构建，可用于高降解DNA片段测序分析。
双链DNA 测序文库构建降解单链单链DNA 测序分析连接接头一端连接低成本高通量高效率变性可用偏倚制备文库应用标签延伸

[发明专利]一种单条秀丽隐杆线虫转录组测序文库的构建方法及测序方法-CN201910161196.5在审
发明人：周京花;徐素宏 -专利权人：浙江大学
申请日： 2019-03-04 - 公布日： 2019-06-14 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种单条秀丽隐杆线虫转录组测序文库的构建方法及测序方法。测序文库在构建时第一步通过将单条秀丽隐杆线虫在加入裂解液的情况下进行研磨以使虫体裂解完全。本发明方法为了克服实验操作性难题，通过改进裂解液及裂解方法等相关裂解技术，改进单细胞文库构建体系，成功攻克了单条线虫裂解的技术难题，成功建立单条成年线虫转录组测序文库，并建立完善的实验技术流程，不仅为特殊处理线虫提供了强有力的技术支持
测序文库单条裂解秀丽隐杆线虫转录组构建处理线裂解液测序线虫转录单条线虫技术保障技术难题技术支持实验技术文库构建研磨虫体改进成功研究

[发明专利]DNA甲基化测序文库及其构建方法和检测方法-CN202111398633.9在审
发明人：陈澍宜 -专利权人：竹石生物科技（苏州）有限公司
申请日： 2021-11-24 - 公布日： 2022-02-11 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本申请公开了一种DNA甲基化测序文库及其构建方法和检测方法。本申请在建立测序文库时并未对双链DNA进行末端修复，而是先将双链DNA变性为单链DNA，然后利用该单链DNA作为建库模板并结合酶学转化法来建立DNA甲基化测序文库，因此，本申请能够避免由于进行末端修复而带来的修复碱基被测序仪读取的现象，从而避免由此造成的测序数据冗余现象。
dna 甲基化序文及其构建方法检测