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[发明专利]用于多重核酸测序的标签和引物-CN201610645098.5有效
发明人：王绪敏;刘贵明;赵倍伦;宋利璞;于军 -专利权人：中国科学院北京基因组研究所
申请日： 2016-08-08 - 公布日： 2019-11-15 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及用于多重核酸测序的标签和用于构建真菌ITS序列多重测序文库的PCR引物。本发明提供的Index经过庞大数量的实际测序检验，将其包含于测序或建库引物后，混合测序反应得到的测序数据平衡性相对较好，进而能够更加真实可靠地反应样品中的真菌组成情况。本发明提供的用于构建真菌ITS序列多重测序文库的PCR引物比现有的常规ITS引物的特异性更高，不仅能够对动物肠道、水体以及大曲等复杂性相对较低的样品类型获得高特异的扩增产物；对土壤和淤泥等高复杂性的样品类型也具有较高的特异性，因此保障了后续测序结果的准确性，进而能够获得相对更加准确的分析结果和更加真实的真菌组成情况。
测序测序文库样品类型真菌组成真菌构建分子生物学技术大曲测序数据动物肠道反应样品核酸测序混合测序扩增产物平衡性等高建库引物淤泥水体标签土壤检验

[发明专利]用于多重核酸测序的Index和引物-CN201610645107.0有效
发明人：王绪敏;刘贵明;赵倍伦;王国良;于军 -专利权人：中国科学院北京基因组研究所
申请日： 2016-08-08 - 公布日： 2019-10-11 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及用于多重核酸测序的Index和构建16SrRNA多重核酸测序文库的PCR引物。本发明提供的Index充分考虑到索引标签之间的序列差异程度、碱基识别率以及测序反应对不同Index序列的数据产出偏好性，将其包含于测序或建库引物后，混合测序反应得到的测序数据平衡性相对较好。本发明提供的PCR引物非常适用于土壤样品，特异性强，目的扩增条带清晰、无弥散现象，使得土壤样品中细菌多样性研究更加高效便捷准确。本发明提供的PCR引物中含有本发明提供的Index，获得的扩增产物中含有两个Index标签，将该Index用于混合样品测序，能够实现对不同测序文库的区分。
用于多重核酸 index 引物

[发明专利]一种多重测序文库的构建方法-CN201610644131.2有效
发明人：刘贵明;王绪敏;赵倍伦;吴双秀;于军 -专利权人：中国科学院北京基因组研究所
申请日： 2016-08-08 - 公布日： 2018-10-30 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及一种ITS序列多重测序文库的构建方法。所述的构建方法包括以下步骤：(1)、扩增PCR：使用引物F1和引物R1构成引物对，PCR扩增样品中的ITS1‑ITS4序列；(2)、建库PCR：使用引物F2和引物R2构成引物对，以步骤(1)获得的PCR产物为模板，进行PCR扩增。本发明提供的构建方法中所使用的40个Index，测序反应得到的数据质量和平衡性更好，测序结果更加准确；能够实现对多达15*15*10个不同文库样品的标记；不仅能够对动物肠道、水体以及大曲等复杂性相对较低的样品类型获得高特异的扩增产物；对土壤和淤泥等高复杂性的样品类型也具有较高的特异性。
一种多重序文构建方法

[发明专利]16SrRNA多重测序文库的构建方法-CN201610645199.2有效
发明人：王绪敏;赵倍伦;刘贵明;任重敢;于军 -专利权人：中国科学院北京基因组研究所
申请日： 2016-08-08 - 公布日： 2018-07-03 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及一种16SrRNA多重测序文库的构建方法。所述的构建方法包括以下步骤：(1)、扩增PCR：使用引物F1和引物R1构成引物对，PCR扩增样品中的16SrRNA序列；(2)、建库PCR：使用引物F2和引物R2构成引物对，以步骤(1)获得的PCR产物为模板，进行PCR扩增。本发明提供的16SrRNA多重测序文库的构建方法获得测序文库测序反应得到的数据质量和平衡性更好，测序结果更加准确；可以实现的文库样品标记数量远大于现有技术；更加适用于土壤样品中细菌多样性的研究；大大提高了样品中细菌多样性研究的准确性。
引物测序文库构建细菌分子生物学技术多样性测序反应土壤样品样品标记平衡性测序建库扩增文库研究

[发明专利]一种基于多维Index的多重测序文库构建方法-CN201610645867.1在审
发明人： 赵倍伦 -专利权人：中国科学院北京基因组研究所
申请日： 2016-08-08 - 公布日： 2016-12-07 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种基于多维Index的多重测序文库构建方法。本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种对样品进行Index标记的多重测序文库构建方法，所述的多重测序文库构建方法基于多维Index设计，通过两轮PCR扩增，在每轮PCR扩增时对同一个样品引入1‑2个Index，从而使得使用相对较少的Index数目，能够获得相对更多的Index组合，大大提高多重测序可混合分析的样品数量。本发明提供的方法能够实现使用40个Index完成对多达10000个不同样品进行标记。
一种基于多维 index 多重序文构建方法