本发明提供了用于检测肺结节良恶性的甲基化标志物及其应用。所述甲基化标志物包括序列为Seq ID No:1至Seq ID No:43所示序列或其完全互补序列中至少一个的片段、或所示序列及其上下游1kb序列在内的片段、所示序列的区域中的DNA甲基化位点、与所示序列具有至少90％以上序列同一性且与其具有相同甲基化位点的变体或所示序列的区域中所覆盖的DNA甲基化单倍型及所述DNA甲基化单倍型的丰度。本发明基于肺结节良性和恶性样本的甲基化测序数据，筛选到甲基化水平在良性肺结节和恶性肺结节中存在明显差异的标志物,可以用于有效鉴别肺结节的良恶性，还利用这些标志物建立良恶性肺结节/肺癌风险预测评估模型。
本发明公开了一种RERG基因启动子区甲基化水平作为筛查宫颈癌或癌前病变生物标志物的用途及检测方法。本发明设计的RERG基因启动子区甲基化扩增引物分为两对，一对是甲基化扩增引物，引物序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示，另一对是非甲基化扩增引物，引物序列如SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示，扩增片段大小在278bp左右，片段包含了25个甲基化位点，扩增后配合Miseq高通量测序仪进行高通量测序。本发明能够通过两次测序获得RERG启动子区25个位点的甲基化情况结果，与常规甲基化探针法相比，能更快更准确地检测目的序列中每个CpG位点的甲基化情况。
本发明公开了一种特定组氨酸甲基化修饰的S100A9蛋白免疫原、多克隆抗体及其制备方法，该特定组氨酸甲基化修饰的S100A9蛋白免疫原包括氨基酸序列如SEQ ID No.1或氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，且在特定组氨酸π位的N上甲基化修饰的多肽；通过该特定组氨酸甲基化修饰的S100A9蛋白免疫原免疫动物可获得特异性识别特定组氨酸甲基化修饰的S100A9蛋白的多克隆抗体，实现快速简易地检测生物样品中S1000A9特定组氨酸甲基化的变化，推动研究特定组氨酸甲基化S100A9蛋白(或钙卫蛋白)的功能影响以及特定生命活动或炎症发生过程中S100A9(或钙卫蛋白)特定组氨酸甲基化动态变化的发展。
