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[发明专利]一种用于动物疫苗效力检验攻毒用菌液的保存方法-CN201511003060.X在审
发明人：王晓丽;李志杰;提金凤;汤少伟;付石军;王永明;王晓东;王栋;林冰钰;王永亮 -专利权人：王晓丽
申请日： 2015-12-28 - 公布日： 2016-05-04 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：一种攻毒用菌液的保存方法，涉及一种用于动物疫苗效力检验攻毒用菌液的保存方法。其特征在于取攻毒用细菌菌种划线接种于适当培养基，37℃培养24h，挑取典型菌落接种液体培养基，37℃培养16h，进行活菌计数，然后将菌液用漩涡震荡器混匀，分装于灭菌冻存管中置于-80℃中保存。本发明的攻毒用菌液的保存方法，菌液存活率高，节省大量人力物力，且保证每次攻毒菌液的稳定性和准确性。
一种用于动物疫苗效力检验攻毒用菌液保存方法

[发明专利]一种绵羊大肠杆菌的攻毒方法-CN201910119205.4在审
发明人：孙伟;鲍建军;金澄艳;吕晓阳;高雯;于嘉瑞;陈炜昊 -专利权人：扬州大学
申请日： 2019-02-18 - 公布日： 2019-04-19 - 主分类号： A01K67/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种绵羊大肠杆菌的攻毒方法，包括以下步骤：将试验羔羊分为健康对照组和攻毒试验组；攻毒第一阶段对试验羔羊饲喂代食料，绘制大肠杆菌生长曲线；攻毒第二阶段对试验羔羊用注射器灌喂F17大肠杆菌菌液；每6小时观察一次羔羊状态，记录羔羊粪便形态，并根据羔羊生理状态结合细菌生长曲线调整大肠杆菌菌液剂量；连续灌喂3 d直至羔羊生理状态维持不变，以“正常”（1型，2型）、“糊状”（3型）、“水样”（4型）三种粪便黏稠度为标准进行记录本发明提出的一种绵羊大肠杆菌的攻毒方法，有针对性地提高了绵羊大肠杆菌的攻毒成功率。
羔羊大肠杆菌绵羊大肠杆菌菌液生理状态粪便试验细菌生长曲线生长曲线试验组黏稠度注射器糊状记录食料水样饲喂成功率绘制观察健康

[发明专利]一种禽巴氏杆菌病灭活疫苗的制备方法-CN201510773653.8在审
发明人：罗青平;邵华斌;张腾飞 -专利权人：湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
申请日： 2015-11-13 - 公布日： 2016-02-03 - 主分类号： A61K39/102 文献下载
摘要：本发明公开了一种禽巴氏杆菌病灭活疫苗的制备方法，包括生产用菌种的制备、制苗菌液的制备、制苗用菌液的灭活和疫苗的制备。本发明方法以A型禽巴氏杆菌为原始菌种，经过限铁环境培养后最终获得菌液，将该菌液与白油佐剂混合即制得禽巴氏杆菌灭活疫苗。本发明方法制备的疫苗免疫地方鸡，攻毒后其保护率达到100％，起到了良好的免疫保护作用。
种禽杆菌病灭活疫苗制备方法

[发明专利]一种鸡白痢沙门氏菌病模型的建立方法-CN201811475650.6在审
发明人：陈雷;单宝龙;王春凤;谷巍;鹿瑶;姜延龙;张甜甜;王红;吕文亮;林显华;徐海燕;刘辉 -专利权人：山东宝来利来生物工程股份有限公司
申请日： 2018-12-04 - 公布日： 2019-03-19 - 主分类号： C12Q1/18 文献下载
摘要：本公开涉及一种鸡白痢沙门氏菌病模型的建立方法，包括：选择鸡白痢沙门氏菌CVCC533作为攻毒菌株，选择0日龄雏鸡开始预饲，预饲至3日龄；攻毒采用经口软管法，于3日龄、4日龄上午分别进行一次攻毒，2次攻毒在24h内完成，攻毒菌液浓度为4.0×10⁸CFU/mL～4.0×10⁹CFU/mL；攻毒后观察雏鸡的精神状态、饮食饮水情况，对死亡雏鸡进行剖检。
日龄鸡白痢沙门氏菌白痢沙门氏菌雏鸡种鸡动物模型发病症状精神状态日龄雏鸡药物研发一致性好饮食饮水重要支撑软管剖检制备成功率感染观察死亡

[发明专利]一种猪源大肠杆菌致病性试验方法-CN201611074491.X在审
发明人：董发明;张炳亮;白喜婷;梁立钦;王文文;邱妍;杨国栋 -专利权人：河南科技大学
申请日： 2016-11-29 - 公布日： 2017-01-18 - 主分类号： C12Q1/10 文献下载
摘要：该方法包括攻毒菌株的增菌培养、试验动物攻毒与观察、细菌分离鉴定及结果判定三步操作，方法简单，耗时短，成本低，试验结果准确可靠。其中，增菌培养选用LB培养基能有效缩短攻毒菌株的培养时间，采用分光光度法检测菌液浓度灵敏度高；试验动物攻毒采用腹腔注射菌液的方法能快速制备染病模型，注射后6h即可观察到动物的发病和死亡情况；细菌分离鉴定依次采用营养肉汤培养基
种猪大肠杆菌致病性试验方法

[发明专利]一种建立断奶仔猪炎症反应模型的方法及应用-CN201610354931.0在审
发明人：李海花;朱琪;王世琼;张全红;陈龙宾;乔家运;王文杰 -专利权人：天津市畜牧兽医研究所
申请日： 2016-05-25 - 公布日： 2016-09-07 - 主分类号： A61K49/00 文献下载
摘要：它是用致病性大肠杆菌攻毒断奶仔猪来探讨该病原菌对仔猪血液中白细胞数量和血清中肿瘤坏死因子‑α（TNF‑α）浓度的影响。致病性大肠杆菌菌液浓度为1×10¹⁰~1×10¹¹cfu结果表明：试验组显著提高仔猪血液中白细胞数量和血清中TNF‑α的浓度。由此可见，适当剂量的致病性大肠杆菌攻毒断奶仔猪能够诱导仔猪发生炎症反应。
一种建立断奶仔猪炎症反应模型方法应用

[发明专利]高毒肺炎克雷伯菌的液体气溶胶肺递送小鼠感染模型-CN202010696957.X在审
发明人：胡凌飞;周冬生;曹超越;孙岩松;邱业峰;高波;赵月峨;杨文慧;张丽丽;吕蒙;李越;杨慧盈;熊小路;殷喆;焦俊;于学东 -专利权人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
申请日： 2020-07-20 - 公布日： 2020-10-30 - 主分类号： A01K67/027 文献下载
摘要：本发明公开了高毒肺炎克雷伯菌的液体气溶胶肺递送小鼠感染模型。本发明提供了一种制备高毒肺炎克雷伯菌动物感染模型的方法，包括如下步骤：通过液体气溶胶的方式将高毒肺炎克雷伯菌或其菌液递送至动物的肺部，得到动物模型。通过结果可以看出，最低攻毒11CFU的菌液就可以使得小鼠在4d内全部死亡，该模型的LD50小于11CFU，本实验所得到的致死剂量更低。说明本方法能更好的将菌液递送至下呼吸道。
肺炎克雷伯菌液体气溶胶递送小鼠感染模型

[发明专利]一种虹鳟鱼攻毒实验用注射器-CN201911280974.9在审
发明人：曹永生;韩世成;李绍戊;卢彤岩;王荻;徐黎明;赵景壮;孙言春 -专利权人：中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
申请日： 2019-12-13 - 公布日： 2020-03-24 - 主分类号： A61D7/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种虹鳟鱼攻毒实验用注射器，属于水产品攻毒实验技术领域。为解决现有攻毒实验使用的注射器容易造成攻毒效果出现偏差的问题，本发明提供了一种虹鳟鱼攻毒实验用注射器，包括中空针筒、可拆卸的注射部件、可沿针筒内壁移动的推杆和推帽。中空针筒尾端还设有限位结构，用于实现对注射用针进针深度的调节。本发明注射器采用蘸取的方式使攻毒液裹覆在注射用针外表面，以多针头实现同时多点刺入使攻毒液吸收效果更好；采用0.7～1.0mm微针，注射后针眼细小，攻毒液不易渗出；进一步保证了攻毒效果和攻毒实验的平行性。
一种虹鳟鱼实验注射器

[发明专利]一种猪源产气荚膜梭菌致病性试验方法-CN201910557213.7在审
发明人：郝海红;袁宗辉;罗讯;徐紫慧;黄玲利;王玉莲;彭大鹏;王旭;陈冬梅;陶燕飞;潘源虎;谢书宇;程古月;瞿玮;刘振利;谢长清;房诗薇;黄啸 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2019-06-25 - 公布日： 2019-09-17 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：所述方法包括攻毒菌株的增菌传代培养，试验动物的攻毒和观察以及细菌的分离与鉴定三部分。其中细菌增菌培养基选择液体硫乙醇酸盐培养基(FT)，传代培养基选择强化布氏血琼脂培养基，可有效增加细菌攻毒菌数量并且缩短细菌培养时间。攻毒方式为攻毒菌液腹腔注射法，攻毒8h后即观察到动物的发病和死亡现象。
产气荚膜梭菌致病性试验细菌种猪接种生物技术领域选择性培养基血琼脂培养基传代腹腔注射法培养基选择增菌培养基病变组织传代培养方法鉴定分离培养分离细菌菌落形态琼脂基础试验动物死亡动物死亡现象细菌培养亚硫酸盐乙醇酸盐增菌培养培养基多重PCR 单菌落丝氨酸液体硫布氏观察胰胨增菌解剖试验

[发明专利]一种用于虹鳟鱼疫苗评价的攻毒方法-CN201911281010.6有效
发明人：卢彤岩;韩世成;徐黎明;赵景壮;李绍戊;王荻;曹永生 -专利权人：中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
申请日： 2019-12-13 - 公布日： 2022-07-29 - 主分类号： A01K61/13 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于虹鳟鱼疫苗评价的攻毒方法，属于水产品攻毒方法技术领域。为解决现有虹鳟鱼疫苗评价攻毒方法操作不便、攻毒效果平行性差的问题，本发明提供了一种用于虹鳟鱼疫苗评价的攻毒方法，将试验用虹鳟鱼麻醉后，将其置于攻毒实验操作平台上测量体长和体高，将虹鳟鱼背鳍向上固定后测量体宽，根据虹鳟鱼体型规格确定注射器进针深度，对已消毒的鱼背部待注射部位进行攻毒注射，然后将虹鳟鱼放入鱼体苏醒池中苏醒后，由入池导管自行游回鱼体养殖池塘。本发明在虹鳟鱼攻毒实验平台系统中快速高效、安全稳定地完成鱼体麻醉、攻毒和苏醒操作，无需往返运输，省时省力，既可保障鱼体的安全，又能保证攻毒实验的平行性。
一种用于虹鳟鱼疫苗评价方法

[发明专利]副猪嗜血杆菌病4型、5型二价灭活疫苗效力的检验方法-CN201710951910.1在审
发明人：厚华艳;吕茂杰;李蓬飞;付旭彬;郁宏伟;梁武;李守军 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2017-09-30 - 公布日： 2018-01-16 - 主分类号： G01N33/558 文献下载
摘要：上述副猪嗜血杆菌灭活疫苗效力检验的方法，不使用强毒攻击，不产生任何生物安全隐患，缩短试验时间，相对效力测定使用动物为豚鼠，因豚鼠饲养环境稳定，消除了因使用靶动物(仔猪)、攻毒操作人员、攻毒菌液制备、饲养环境等条件导致攻毒保护试验批间差异较大的问题
嗜血杆菌二价疫苗效力检验方法

[发明专利]一种家兔魏氏梭菌病的A型产气荚膜梭菌灭活疫苗的制备方法-CN201510098152.4有效
发明人：柴同杰;郭梦娇;王海荣 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2015-03-06 - 公布日： 2017-03-01 - 主分类号： A61K39/114 文献下载
摘要：本发明涉及动物细菌学领域，提供了一种家兔魏氏梭菌病的A型产气荚膜梭菌灭活疫苗的制备方法，该方法以A型产气荚膜梭菌为原始菌种，经过一级和二级培养后最终获得菌液，将该菌液与白油佐剂混合即制得A型产气荚膜梭菌灭活疫苗；本发明所述方法制备的疫苗免疫家兔，攻毒后其保护率达到100％，起到了良好的免疫保护作用。
一种家兔魏氏梭菌病型产气荚膜梭菌灭活疫苗制备方法

[发明专利]一株大肠杆菌O157:H7弱毒株及其应用-CN201710896100.0有效
发明人：张雪寒;张碧成;俞正玉;叶青;孙小涵;郭芸芸;汪伟;茅爱华;周俊明;何孔旺 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2017-09-28 - 公布日： 2021-03-02 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明提供了一株大肠杆菌O157:H7弱毒株及其在应用，属于生物技术领域。该大肠杆菌O157:H7的弱毒株JSC2株的保藏号为CCTCC M 2017356。通过制备该弱毒株菌液，对BALB/c小鼠和乳兔进行攻毒试验发现，该菌株不引起小鼠和乳兔的死亡，不导致明显的组织病理变化。且该弱毒株皮下接种小鼠1次后，可诱导高水平IgG抗体，抗体持续期长，能够提供受免动物良好的免疫效力，可用于大肠杆菌O157:H7疫苗和诊断试剂的研制。
大肠杆菌 o157 h7 弱毒株及其应用

[发明专利]一种蛋鸡小肠肠炎模型的构建方法-CN202110137873.7有效
发明人：王建萍;张红叶;晏磊;毛湘冰;尹华东;白世平;张克英 -专利权人：四川农业大学
申请日： 2021-02-01 - 公布日： 2022-04-05 - 主分类号： A01K67/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种蛋鸡小肠肠炎模型的构建方法，包括以下步骤：选用40只产蛋高峰期罗曼粉蛋鸡，设处理，分别为对照组和4个攻毒处理组；攻毒处理组为球虫疫苗+不同梯度的A型产气荚膜梭菌处理组，分别于试验开始后每天早上9：00先灌服球虫疫苗，半小时以后再灌服产气荚膜梭菌菌液；最后一次灌服后48h进行采样；试验期为7天，饲粮为玉米‑豆粕型基础饲粮，饲养管理按常规饲养管理进行。
一种蛋鸡小肠肠炎模型构建方法

[发明专利]一种鸡传染性鼻炎灭活疫苗-CN201110372941.4无效
发明人：韩建文;周忠号;李平;杜元钊 -专利权人：青岛易邦生物工程有限公司
申请日： 2011-11-22 - 公布日： 2012-03-21 - 主分类号： A61K39/102 文献下载
摘要：该鸡传染性鼻炎灭活疫苗的制备方法，是按常规方法制备的灭活的副鸡嗜血杆菌A型C-Hpg-8株浓缩菌液，用灭菌PBS稀释一定比例后与以卡波姆为主要成分组成的疫苗佐剂按比例进行混合并搅拌摇匀制备而成鸡传染性鼻炎灭活疫苗用本鸡传染性鼻炎灭活疫苗免疫鸡后，可使接种鸡只后产生的抗体效价高，抗体保护期长，攻毒保护率高等优点。
一种传染性鼻炎疫苗

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