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[发明专利]一种鹅痛风病卵黄抗体的制备方法-CN201811095874.4有效
发明人：李守军;杨燚;刘冠星;郁宏伟;刘海霞;李蓬飞;陈冰;张立霞 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2018-09-19 - 公布日： 2022-02-25 - 主分类号： C07K16/10 文献下载
摘要：一种鹅痛风病卵黄抗体的制备方法。本发明从临床感染的雏鹅病变肝脏及肾脏中分离得到鹅星状病毒RPVA1061株，利用RPVA1061株制备成卵黄抗体用于临床雏鹅痛风病的防治，在解决现有临床鹅痛风病无药物用的问题的同时，提供了一种新的鹅痛风病的临床防治方案，经临床验证，本发明的制备的卵黄抗体对鹅痛风病的防治效果显著。
一种痛风病卵黄抗体制备方法

[发明专利]VP2基因和NP基因重组腺病毒及其应用-CN201711338986.3有效
发明人：高柯柯;李亚杰;郁宏伟;付旭彬;刘海霞;郑文卿;唐荣宏;李蓬飞 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2017-12-14 - 公布日： 2021-05-28 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明提供了一种VP2基因和NP基因重组腺病毒及其应用，从IBDV和AIV的SD株中分别扩增出VP2基因和NP基因，将获得的目的基因克隆到穿梭载体pDC315‑MCS‑EGFP中，利用脂质体转染法将重组腺病毒穿梭质粒pDC315‑VP2‑NP‑EGFP与腺病毒大骨架pBHGlox(delta)E1,3Cre共转染HEK293细胞，重组并包装获得含有VP2基因和NP基因的重组腺病毒pBH‑VP2‑NP‑EGFP。该重组腺病毒可以刺激机体产生抗体，用琼扩法测定IBDV抗体含量达到有效抗体水平，血凝抑制试验方法测定AIV抗体含量均显著优于对照组pBH‑EGFP；攻毒试验结果表明，保护率达到90％。
vp2 基因 np 重组病毒及其应用

[发明专利]一种猪圆环病毒2型(PCV-2)Cap蛋白的重组基因序列及应用-CN201910504113.8有效
发明人：李守军;辛波;孙阳阳;李思洁;王丹娜;刘海霞;李蓬飞 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2019-06-12 - 公布日： 2021-05-28 - 主分类号： C07K14/01 文献下载
摘要：本发明提供了一种猪圆环病毒2型重组Cap蛋白的基因序列及应用，具体为：采用替换Cap蛋白序列逃逸表位的方法，首次将猪圆环病毒2型Cap蛋白位于163‑175位的氨基酸替换为一段T细胞表位HA‑肽，而且所述的T细胞表位HA‑肽与原Cap蛋白中的逃逸表位基酸相似度高，二级结构相同，且替换后没有改变Cap蛋白的空间结构，重组后的Cap蛋白序列有效防止了Cap蛋白自身逃逸表位引发的抗原抗体识别，克服了现有技术中将Cap蛋白包装为病毒样颗粒工艺的不足，简化了工艺，降低了生产成本。本发明首次将一种猪圆环病毒2型重组Cap蛋白基因序列应用于亚单位疫苗的制备，该疫苗较未改造时的免疫保护效力有显著提升。
种猪圆环病毒 pcv cap 蛋白重组基因序列应用

[发明专利]一种针对RSV粘附G蛋白表面抗原的全人源单克隆抗体-CN201610114801.X有效
发明人：戴凯凡;刘国华;李蓬飞;王全英 -专利权人：苏州博泰神州生物技术有限公司
申请日： 2016-03-01 - 公布日： 2019-12-06 - 主分类号： C07K16/10 文献下载
摘要：本发明提供特异性结合呼吸道合胞病毒(RSV)的粘附(G)蛋白的全人源单克隆抗体RSVG71或RSVG78，公开了其编码核酸、包含它们的载体或宿主细胞以及它们的制备方法。本发明还公开了全人源的抗RSV单克隆抗体RSVG71或RSVG78在预防和治疗RSV相关疾病中的应用，以及它们在检测RSV中的应用。
一种针对 rsv 粘附蛋白表面抗原全人单克隆抗体

[发明专利]一种针对RSV粘附G蛋白表面抗原的全人源单克隆抗体-CN201811132563.0在审
发明人：戴凯凡;刘国华;李蓬飞;王全英 -专利权人：苏州博泰神州生物技术有限公司
申请日： 2016-03-01 - 公布日： 2019-01-18 - 主分类号： C07K16/10 文献下载
摘要：本发明提供特异性结合呼吸道合胞病毒(RSV)的粘附(G)蛋白的全人源单克隆抗体RSVG78，公开了其编码核酸、包含它们的载体或宿主细胞以及它们的制备方法。本发明还公开了全人源的抗RSV单克隆抗体RSVG78在预防和治疗RSV相关疾病中的应用，以及它们在检测RSV中的应用。
单克隆抗体粘附呼吸道合胞病毒特异性结合编码核酸表面抗原宿主细胞制备应用蛋白疾病检测预防治疗

[发明专利]一种禽用DNA疫苗组合物-CN201810719974.3在审
发明人：李守军;唐荣宏;范莉莉;郭明丽;康亚男;陈冰;张立霞;刘海霞;李蓬飞;蔡天宁;高华义 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2018-07-03 - 公布日： 2018-11-27 - 主分类号： A61K39/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种禽用DNA疫苗组合物，该组合物由DNA疫苗、抗体、纳米粒子和离子缓冲液组成，所述的DNA疫苗为编码抗原性蛋白的DNA质粒，所述的抗体为相对应的保护性抗体，所述的纳米粒子能包裹抗体起到缓释作用同时包裹DNA提升其细胞转染效率，所述的离子缓冲液能在体液环境中稳定所述抗体的等电点同时稳定所述纳米粒子的疏水性。该DNA疫苗组合物兼具DNA疫苗和抗体治疗的优点，同时规避了二者合用的缺点，兼具治疗与预防的功效，具备机体免疫应答产生快，持续期长，交叉保护广，使用方便等诸多优点。
抗体纳米粒子缓冲液离子保护性抗体编码抗原缓释作用机体免疫交叉保护抗体治疗体液环境细胞转染持续期等电点疏水性性蛋白应答预防治疗

[发明专利]基于鸡源类泛素蛋白融合表达体系的疫苗制备方法-CN201810324885.9在审
发明人：辛波;李守军;黄灿平;付旭彬;刘海霞;陈文娟;李蓬飞;范钟允 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司;天津市滨海新区瑞普生物研究院
申请日： 2018-04-12 - 公布日： 2018-09-14 - 主分类号： A61K39/17 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于鸡源类泛素蛋白融合表达体系的疫苗制备方法，该方法首先对SUMO‑1、SUMO‑2及SUMO‑3核苷酸序列按照大肠杆菌密码子的偏好性进行了优化。在此基础上，将SUMO蛋白编码序列连接至抗原蛋白编码基因N端，并连接到pET28a质粒，转化E.coli DH5α感受态细胞，得到重组质粒。测序确认无核苷酸突变后，转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞。本发明构建的融合表达体系，具有制备基因工程亚单位疫苗的明显优势，新城疫HI效价几何平均值达1:67‑1:80，鸡传染性法氏囊病琼扩效价为1:32‑1:64，均明显高于未使用鸡源SUMO蛋白融合表达效价。该方法还适用于蛋鸡减蛋综合症等鸡传染性疾病的亚单位疫苗制备。
鸡源效价表达体系蛋白融合融合表达疫苗制备泛素制备基因工程亚单位疫苗鸡传染性法氏囊病大肠杆菌密码子感受态细胞核苷酸突变核苷酸序列减蛋综合症亚单位疫苗编码基因编码序列鸡传染性抗原蛋白重组质粒偏好性未使用新城疫测序构建蛋鸡转化疾病优化

[发明专利]一种用于犬病毒性腹泻的治疗药物-CN201711338158.X在审
发明人：李守军;王甜;郁宏伟;杨保收;梁武;苏建东;刘海霞;李蓬飞 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2017-12-14 - 公布日： 2018-06-08 - 主分类号： C12N15/62 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于犬病毒性腹泻的治疗药物，该技术方案选择eae基因作为细菌黏附素表达基因，首先构建了共表达犬α干扰素及细菌黏附素的重组载体，并以原核表达系统表达，产物经GST亲和层析纯化后得到犬α干扰素和细菌黏附素的融合蛋白，从而实现了犬α干扰素在人消化道内的靶向性，增加了肠上皮细胞局部干扰素浓度和作用时间。口服该融合蛋白可显著提升犬α干扰素的治疗效果并延长药效时间，对犬细小病毒病的治疗具有积极的促进作用。
犬α干扰素细菌黏附犬病毒性腹泻融合蛋白治疗药物干扰素技术方案选择犬细小病毒病原核表达系统肠上皮细胞表达基因促进作用人消化道治疗效果重组载体靶向性共表达构建治疗

[发明专利]一种GnRH多肽抗原及其用于制备去势疫苗的应用-CN201711339036.2在审
发明人：李守军;任东兴;付旭彬;吕传忠;陈文娟;陈庚;辛波;李蓬飞;李思洁 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2017-12-14 - 公布日： 2018-05-18 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明提供了一种GnRH多肽抗原及其用于制备去势疫苗的应用，该技术方案针对大分子载体蛋白存在空间位阻大、化学偶联质控难和副作用大等缺点，将GnRH改构物与Th表位全合成，形成分子量适中、免疫原性显著、质量可控的全合成多肽抗原，在此基础上根据抗原特性设计了适宜的疫苗制备方法。本发明所制备的去势疫苗在动物体内能够产生较高的免疫原性，副作用小，不会致组织损伤，代谢产物无毒，注射剂量小、效果好，在新型治疗性疫苗领域具有良好的应用前景。
一种 gnrh 多肽抗原及其用于制备去势疫苗应用

[发明专利]副猪嗜血杆菌病4型、5型二价灭活疫苗效力的检验方法-CN201710951910.1在审
发明人：厚华艳;吕茂杰;李蓬飞;付旭彬;郁宏伟;梁武;李守军 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2017-09-30 - 公布日： 2018-01-16 - 主分类号： G01N33/558 文献下载
摘要：本发明提供了一种副猪嗜血杆菌病4型、5型二价灭活疫苗效力的检验方法该方法使用副猪嗜血杆菌4型、5型代表性菌株作为抗原，制备副猪嗜血杆菌灭活疫苗，依据《中国兽药典》质量标准检验疫苗，合格疫苗作为参考品，试制疫苗与参考疫苗免疫豚鼠后采血，间接ELISA测定血清抗体效价，Rel Pot4.0分析试验疫苗与参考疫苗的相对效力，确定试验疫苗的效力。上述副猪嗜血杆菌灭活疫苗效力检验的方法，不使用强毒攻击，不产生任何生物安全隐患，缩短试验时间，相对效力测定使用动物为豚鼠，因豚鼠饲养环境稳定，消除了因使用靶动物(仔猪)、攻毒操作人员、攻毒菌液制备、饲养环境等条件导致攻毒保护试验批间差异较大的问题。
嗜血杆菌二价疫苗效力检验方法

[发明专利]几丁质结合蛋白Bt‑CBP及其编码基因和制备方法与应用-CN201710265395.1在审
发明人：蔡峻;张娜;李蓬飞;陈月华 -专利权人：南开大学
申请日： 2017-04-21 - 公布日： 2017-08-29 - 主分类号： C07K14/32 文献下载
摘要：本发明涉及一种几丁质结合蛋白Bt‑CBP及其编码基因和制备方法与应用,属于基因工程技术领域。本发明首次从一株苏云金芽胞杆菌中克隆出几丁质结合蛋白的编码基因,通过构建原核表达载体，在大肠杆菌中表达了该基因，获得了具有高活性的表达产物。该几丁质结合蛋白Bt‑CBP本身对黄瓜灰霉病菌、尖孢镰刀菌等具有良好的抑制效果。此外，该几丁质结合蛋白Bt‑CBP对几丁质ChiB的催化活性有增效作用,可以促进ChiB高效降解几丁质，并能显著增强ChiB对黄瓜灰霉的抑制效果,具有良好的生物防治功能,为农业领域、抗真菌药物研发的提供新的研究方向,具有广阔应用价值,将产生巨大工业效益和经济价值。
几丁质结合蛋白 bt cbp 及其编码基因制备方法应用

[发明专利]缺失突变的chiB启动子及其组成型表达蛋白的应用-CN201210408862.9有效
发明人：陈月华;罗洋;谢池楚;李蓬飞;蔡峻 -专利权人：南开大学
申请日： 2012-10-24 - 公布日： 2013-03-20 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：一种缺失突变的几丁质酶编码基因chiB启动子及其组成型表达蛋白的应用。本发明首先提供了一种DNA定向分子育种方法，经所述的方法进行DNA操作后获得的缺失突变的几丁质酶编码基因chiB启动子序列——chiBp△135，如序列表SEQ ID No.1所示。所述的启动子序列，可以使与其相连接的目的基因的核苷酸序列以组成型方式表达。可以利用这一突变的启动子在苏云金芽胞杆菌或大肠杆菌细胞中组成型、大量表达目的蛋白。
缺失突变 chib 启动子及其组成表达蛋白应用

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