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[发明专利]一种小立碗藓中DNA大片段的转化方法-CN202310937739.4在审
发明人：焦雨铃;陈连阁;汪颖 -专利权人：北京大学;中国科学院遗传与发育生物学研究所;中国科学院大学
申请日： 2023-07-28 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种小立碗藓中DNA大片段的转化方法。本发明提供了一种小立碗藓中DNA大片段的转化方法，包括如下步骤：采用聚乙二醇介导小立碗藓原生质体转化，依靠同源重组将外源目的DNA大片段整合入小立碗藓基因组预定位点；所述外源目的DNA大片段为50‑100kb本发明采用聚乙二醇(polyethylene glycol，PEG)介导的小立碗藓原生质体转化方法，将多基因的大片段DNA转入小立碗藓，并通过同源重组插入指定位点，并替换内源基因组序列。
一种小立碗藓中 dna 片段转化方法

[发明专利]一种小立碗藓中DNA大片段的组装方法-CN202310937744.5在审
发明人：焦雨铃;陈连阁;汪颖 -专利权人：北京大学;中国科学院遗传与发育生物学研究所;中国科学院大学
申请日： 2023-07-28 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种小立碗藓中DNA大片段的组装方法。本发明提供了一种小立碗藓中DNA大片段的组装方法，包括如下步骤：采用聚乙二醇介导小立碗藓原生质体转化，依靠同源重组将两个或两个以上20‑30kb的外源目的DNA片段在小立碗藓原生质体内重组成一个目的DNA大片段并整合入小立碗藓基因组预定位点；其中，每相邻的两个所述外源目的DNA片段之间，以及所述外源目的DNA片段和与之相邻的小立碗藓基因组上重组预定位点之间均具有1kb的同源臂。利用本发明技术能够实现小立碗藓大于5kb DNA大片段的组装、定点插入及对天然序列的替换。本发明可以为以小立碗藓为底盘宿主的基因工程，包括大片段DNA组装、生产蛋白药物和具有经济价值的天然代谢产物具有重要意义。
一种小立碗藓中 dna 片段组装方法

[发明专利]小立碗藓ATG3基因在植株衰老和耐盐胁迫中的应用-CN201910129906.6在审
发明人：刘莉;陈则希;李萍;杨红;李飞 -专利权人：中国科学院昆明植物研究所
申请日： 2019-02-21 - 公布日： 2019-04-12 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明提供了小立碗藓ATG3基因在植株衰老和耐盐胁迫中的应用，涉及基因的应用技术领域。本发明所述小立碗藓ATG3基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述小立碗藓ATG3基因的突变体与野生型相比，在正常培养条件下衰老加快，耐盐胁迫能力下降，可用于小立碗藓在植株衰老和耐盐性状方面的研究。
小立碗藓植株衰老基因耐盐胁迫应用技术领域正常培养条件核苷酸序列耐盐性状突变体野生型可用衰老应用研究

[发明专利]诱导小立碗藓产生愈伤组织并分化生成配子体的方法-CN200510026616.7无效
发明人：曹同;陈静文 -专利权人：上海师范大学
申请日： 2005-06-09 - 公布日： 2005-10-26 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种诱导小立碗藓愈伤组织并分化生成配子体的方法，其步骤为：1)将小立碗藓消毒后，切取小立碗藓的茎尖接种到糖浓度为0－2％，并含0－0.5mg/L的6－BA和0－0.5mg/L的KT的一种或两种激素的Knop培养基上进行诱导培养，诱导培养天数为28天；2)将培养28天后产生的小立碗藓愈伤组织转接到Knop分化培养基上进行分化培养；或转接到含0.5mg/L6－BA的Knop分化培养基上进行分化培养；或转接到含本发明运用组织培养技术，在改良的Knop培养基中添加不同种类和浓度配比的植物激素诱导小立碗藓的愈伤组织使其分化出正常的植株，从而大量繁殖小立碗藓，以满足对小立碗藓的大量需求。
诱导小立碗藓产生组织分化生成配子体方法

[发明专利]CRISPR/Cas12a基因编辑系统在小立碗藓基因编辑中的应用-CN201910159312.X有效
发明人：刘莉;普晓俊;刘丽娜;李萍;杨红 -专利权人：中国科学院昆明植物研究所
申请日： 2019-03-04 - 公布日： 2019-12-10 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明提供了CRISPR/Cas12a基因编辑系统在小立碗藓基因编辑中的应用，属于基因工程技术领域，所述应用包括以下步骤：1)构建Cas12a蛋白酶表达载体；2)构建gRNA表达载体；3)采用Cas12a蛋白酶表达载体、gRNA表达载体和表达抗性的质粒对小立碗藓进行转化，经过抗性筛选得到突变体植株。本发明应用于小立碗藓基因编辑的CRISPR/Cas12a基因编辑系统具有基因编辑效率高、脱靶概率小、尤其能够高效编辑多靶标的优点。
基因小立碗藓编辑系统蛋白酶表达表达载体应用构建基因工程技术突变体植株抗性筛选抗性多靶质粒概率转化

[发明专利]小立碗藓原丝体快速繁殖方法-CN201610772610.2有效
发明人：杨红;李萍;刘莉;鲁元学;章成君 -专利权人：中国科学院昆明植物研究所
申请日： 2016-08-30 - 公布日： 2018-12-14 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明提供小立碗藓原丝体快速繁殖方法，将生长5天的小立碗藓原丝体材料经过机械打磨粉碎继代，设置以BCD培养基为基础培养基的不同钙离子浓度的测试平板，经过打磨继代后接种于各种不同浓度的CaCl_{2本发明针对小立碗藓的原丝体培养进行了培养及配方的改进实验表明，在控制培养箱温度为23℃，80μmol photons m^‑²s^‑1光强，}
小立碗藓原丝体快速繁殖方法

[发明专利]一种小立碗藓原生质体及其制备方法-CN202010638595.9有效
发明人：赵孟楷;李晓政;戴俊彪;胡章立 -专利权人：深圳大学
申请日： 2020-07-06 - 公布日： 2022-06-24 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种小立碗藓原生质体的制备方法，该方法包括以下步骤：S1.取小立碗藓茎叶体或原丝体，打成匀浆后放入BCDAT培养基中16h光照‑8h黑暗交替培养；S2.将混合酶溶解于6％～10％的甘露醇溶液中，涡旋混匀后离心，取上清过滤，得到混合酶溶液；S3.取步骤S1得到的原丝体放入步骤S2配制的混合酶溶液中混合均匀，酶解，过滤，离心去上清并用6％～10％的甘露醇溶液重悬，重复2～3次，得到的悬浮液即为小立碗藓原生质体
一种小立碗藓原生质体及其制备方法

[发明专利]一种提高植物抵抗逆境胁迫能力的孤基因PpDRO及应用-CN202110788150.3有效
发明人：刘莉;董秀梅;张敬斐;温从发;张帆 -专利权人：丽水市润生苔藓科技有限公司
申请日： 2021-07-13 - 公布日： 2023-01-31 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明所述孤基因PpDRO在小立碗藓内的表达具有发育依赖性，在配子体期表达最强；在一个光周期内，PpDRO在12:00表达量最高。本发明证实，在脱水复水、NaCl和ABA处理的小立碗藓配子体中，PpDRO表达增强，而PpDRO基因敲除突变体表现出耐旱性降低，提供外源ABA后可以恢复PpDRO基因敲除突变体的抗旱性。
一种提高植物抵抗逆境胁迫能力基因 ppdro 应用

[发明专利]来源于小立碗藓的miRNA及其应用-CN201410720413.7有效
发明人：何奕騉;王晓琴;李靖云;包方;胡勇 -专利权人：首都师范大学;北京农学院
申请日： 2014-12-02 - 公布日： 2015-03-25 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种来源于小立碗藓的miRNA及其应用。本发明保护的miRNA名称为ppt-mir-83，是SEQ ID No.1所示的RNA。
来源于小立碗藓 mirna 及其应用

[发明专利]小立碗藓抗低温胁迫基因PpMTRS4及其蛋白和载体-CN200810119419.3无效
发明人：何奕昆;王慧;胡勇;崔素霞;孙铭明 -专利权人：首都师范大学
申请日： 2008-09-01 - 公布日： 2010-03-10 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明涉及生物基因工程领域，具体地，本发明涉及小立碗藓抗低温胁迫基因Pp MTRS4及其蛋白和载体。
小立碗藓抗低温胁迫基因 ppmtrs4 及其蛋白载体

[发明专利]一种小立碗藓原生质体的制备方法-CN201610771350.7在审
发明人：杨红;李萍;刘莉;鲁元学;章成君;关艳龙 -专利权人：中国科学院昆明植物研究所
申请日： 2016-08-30 - 公布日： 2016-11-16 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种苔藓‑小立碗藓的原生质体的制备方法，包含下述步骤：原生质体的原材料‑原丝体与无菌超纯水机械打磨粉碎后，转移到10皿BCD培养基，控制pH值4.5，23℃，80μmol photons m
一种小立碗藓原生质体制备方法

[发明专利]小立碗藓抗低温胁迫基因PpHap5a-like及其蛋白、和载体-CN200810111613.7无效
发明人：何奕昆;王慧;胡勇;崔素霞;孙铭明 -专利权人：首都师范大学
申请日： 2008-05-15 - 公布日： 2009-11-18 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明涉及生物基因工程领域，具体地，本发明涉及小立碗藓抗低温胁迫基因PpHap5a-like及其蛋白、和载体。
小立碗藓抗低温胁迫基因 pphap5a like 及其蛋白载体

[发明专利]小立碗藓抗低温胁迫基因PpDBF2及其蛋白和载体-CN200810117191.4无效
发明人：何奕昆;王慧;胡勇;崔素霞;孙铭明 -专利权人：首都师范大学
申请日： 2008-07-25 - 公布日： 2010-01-27 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明涉及生物基因工程领域，具体地，本发明涉及一种小立碗藓抗低温胁迫基因PpDBF2及其蛋白和载体。
小立碗藓抗低温胁迫基因 ppdbf2 及其蛋白载体

[发明专利]一种农杆菌介导的苔藓的稳定遗传转化方法-CN202110185973.7在审
发明人：张道远;周平;刘秀瑾;张燕;李小双;杨红兰 -专利权人：中国科学院新疆生态与地理研究所
申请日： 2021-02-13 - 公布日： 2021-05-28 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明涉及一种农杆菌介导的苔藓的稳定遗传转化方法，该方法涉及苔藓为小立碗藓Physcomitrella patens和银叶真藓
一种杆菌苔藓稳定遗传转化方法

[发明专利]小立碗藓抗低温胁迫基因PpCDC48-3及其编码的蛋白质、含有该基因的载体、和细胞系-CN200810111614.1无效
发明人：何奕昆;王慧;胡勇;崔素霞;孙铭明 -专利权人：首都师范大学
申请日： 2008-05-15 - 公布日： 2009-11-18 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明涉及生物基因工程领域，具体地，本发明涉及小立碗藓抗低温胁迫基因PpCDC48-3及其编码的蛋白质、含有该基因的载体、和细胞系。
小立碗藓抗低温胁迫基因 ppcdc48 及其编码蛋白质含有载体细胞系

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