本发明公开了塞内卡病毒分离株、塞内卡病毒病灭活疫苗及其制备方法。本发明从黑龙江省疑似感染塞内卡病毒的发病的猪场分离得到一株猪塞内卡病毒CH‑HLJ株,其全基因序列为SEQ ID No.1所示,其微生物保藏编号是CGMCC NO.18851。本发明进一步提供了一种制备塞内卡病毒病灭活疫苗的方法,包括:(1)病毒增殖后灭活;(2)将疫苗佐剂加热得到油相;(3)病毒液加热得到水相;(5)将油相与水相混合乳化成双相油乳剂。猪免疫实验结果表明,本发明制备的猪塞内卡病毒灭活疫苗能够刺激机体产生高水平的抗体。灭活疫苗的免疫保护效力评估结果表明本发明制备的灭活疫苗对猪塞内卡病毒的攻击能够提供良好的保护。
本发明公开了一种猪塞内卡病毒中和性液相阻断ELISA试剂盒,所述试剂盒包括有效量的猪塞内卡病毒抗原、有效量的猪塞内卡病毒单域抗体1、有效量的猪塞内卡病毒单域抗体2以及配套的检测试剂。所述的猪塞内卡病毒抗原为使用蔗糖密度梯度离心方法纯化出猪塞内卡病毒粒子,纯化后的猪塞内卡病毒粒子的粒径为20~30nm。所述的猪塞内卡病毒单域抗体1的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述的猪塞内卡病毒单域抗体2的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的试剂盒具有高效、简单、灵敏、稳定等优点,与传统诊断方法病毒中和实验有良好的相关性,适用于大范围的应用。
本发明公开了一种猪塞内卡完整病毒粒子夹心ELISA试剂盒,所述试剂盒包括有效量的猪塞内卡完整病毒粒子、有效量的猪塞内卡病毒单域抗体1、有效量的猪塞内卡病毒单域抗体2以及配套的检测试剂。所述的猪塞内卡病毒单域抗体1的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述的猪塞内卡病毒单域抗体2的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明以猪塞内卡完整病毒粒子为诊断抗原,建立了检测塞内卡完整病毒粒子定量的双抗体夹心ELISA试剂盒,该试剂盒具有高效、简单、灵敏、稳定等优点,可用于疫苗质量控制评估,具有良好的应用前景。