“原生质”专利关键词查询_检索下载_查询列表_检索列表_行业专利分布_钻瓜专利网

钻瓜专利网为您找到相关结果256023个，建议您升级VIP下载更多相关专利

[发明专利]一种利用原生质体对茶树菇进行提纯复壮的方法及其应用-CN202310128482.8在审
发明人：请求不公布姓名 -专利权人：江西省科学院微生物研究所（江西省流域生态研究所）
申请日： 2023-02-17 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： A01G18/40 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用原生质体对茶树菇进行提纯复壮的方法及其应用，涉及食用菌技术领域。本发明提供了一种利用原生质体对茶树菇进行提纯复壮的方法，通过采用在铺有玻璃纸的平板上培养菌丝的方法制备了茶树菇原生质体，与常用的液体培养的菌丝制备原生质体的方法相比具有制备时间短、操作简单和不易污染的优点
一种利用原生质体茶树进行提纯复壮方法及其应用

[发明专利]一种草莓原生质体的提取及融合方法-CN201110315610.7有效
发明人：冯颖;顾地周;朱俊义;杨丽娟 -专利权人：通化师范学院
申请日： 2011-10-18 - 公布日： 2012-06-20 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明是以草莓的叶片为研究材料，提供一种草莓原生质体分离及融合的最佳方法，通过前处理和酶解相结合的方式获得高活力的原生质体，利用30-45％PEG 6000结合高Ca2+，高pH的方法诱导两者融合，提高了原生质体一对一相融合的概率，本方法作用温和，分离的原生质体活力在85％以上，一对一融合率最高可达到11.7％，操作简便，具备了形成杂种细胞的可能，适合于克服远源杂交障碍进行新品种的诱导及培育，在生物育种方面具有一定的意义。
一种草莓原生质体提取融合方法

[发明专利]一种快速高效的香茅原生质体制备方法-CN202110205896.7有效
发明人：曹建美;储昭庆;张凯;蒋敏;宋昌梅 -专利权人：上海辰山植物园
申请日： 2021-02-24 - 公布日： 2022-11-01 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速高效的香茅原生质体制备方法，属于植物细胞工程领域。采用健康生长的香茅组培苗为实验材料，使用CPW溶液配制酶解液，采用低速震荡酶解法对香茅叶片进行酶解消化，高效的制备原生质体。最后利用蔗糖密度梯度离心法纯化收集高质量的香茅原生质体。本发明简单方便，易于操作，且分离得到的原生质体产量高，细胞完整，呈球形，富含叶绿体，具有较高活力。
一种快速高效香茅原生质体制备方法

[发明专利]一种根癌农杆菌介导的核盘菌的遗传转化方法-CN201010175826.3无效
发明人：姜道宏;肖雪琼;谢甲涛;付艳苹;程家森 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2010-05-10 - 公布日： 2010-10-20 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明提供了一种根癌农杆菌介导的核盘菌的遗传转化方法，将含有双元载体的根癌农杆菌与核盘菌的原生质体混合后共培养，用抗生素筛选，获得转化子，该方法转化效率可达1/5.9×104个原生质体。本发明以核盘菌的原生质体为受体，以根癌农杆菌为介体，克服了核盘菌菌丝细胞为多核，且子囊孢子难以大量获得等原因导致的核盘菌遗传转化困难的问题，提供了一种简单方便、转化效率稳定的核盘菌的遗传转化方法。同时本发明也提供了一种简单高效的核盘菌原生质体制备方法。
一种根癌农杆菌盘菌遗传转化方法

[发明专利]一种卡帕藻属海藻原生质体分离培养和再生植株的方法-CN201110003481.8无效
发明人：刘涛;张偲;金月梅 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2011-01-10 - 公布日： 2011-08-24 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种卡帕藻属海藻原生质体分离培养和再生植株的方法，其主要是根据海藻体细胞发育的全能性，利用海藻工具酶分解卡帕藻组织，游离出体细胞原生质体，获得再生细胞壁的体细胞和细胞系，然后将其培养得到再生植株本发明利用体细胞原生质体直接进行育苗，无须培育卡帕藻生殖成熟的藻体；体细胞原生质体再生细胞壁转化为体细胞，相对于有性生殖育苗技术，其优点是无须生殖细胞的有性生殖过程，缩短了育苗周期；并且苗种繁育效率高，
一种卡帕藻属海藻原生质体分离培养再生植株方法

[发明专利]农杆菌介导外源基因转化灵芝的方法-CN01129745.X无效
发明人：李宝健;程度 -专利权人：李宝健;程度
申请日： 2001-10-11 - 公布日： 2002-04-03 - 主分类号： C12N1/15 文献下载
摘要：本发明公开了一种农杆菌介导外源基因转化灵芝的方法,把灵芝菌丝经溶壁酶液酶解后,再纯化灵芝原生质体,然后以含有外源基因的Ti质粒为载体,利用农杆菌侵染灵芝的特性,对该纯化的灵芝原生质体进行转化处理,将处理后的灵芝原生质体进行再生培养和选择性培养本发明方法能有效地将外源基因转化入灵芝原生质体中,并得到稳定的复制和表达,从而建立了灵芝的转化系统。这将为灵芝开辟广阔的应用领域,使得灵芝这一宝贵的资源得到更充分的利用。
杆菌介导外源基因转化灵芝方法

[发明专利]一种提高玉米杂交种子生产效率的方法-CN201810656845.4在审
发明人：不公告发明人 -专利权人：合肥扬扬农业科技有限公司
申请日： 2018-06-24 - 公布日： 2018-11-06 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高玉米杂交种子生产效率的方法,包括以下步骤：S1、将玉米种子培养得到玉米愈伤组织；S2、将玉米愈伤组织分离成玉米原生质体溶液；S3、将玉米原生质体溶液离去上清，沉淀重悬；S4、将玉米原生质体加入PEG1000，90s后向试管中缓慢添加9.5mlHanks溶液，将试管在水浴锅中静置，离心弃上清，向细胞沉淀中加入1ml细胞培养液，轻轻混匀，37℃水浴中培养30min得到活化的玉米原生质体融合细胞；S5、将玉米原生质体融合细胞利用植物离体组织培养的方法培养成玉米再生杂种植株。
玉米原生质育种玉米杂交种子融合细胞生产效率玉米种子愈伤组织试管玉米离体组织培养体细胞杂交细胞培养液细胞沉淀育种周期杂种植株水浴锅后向混匀活化水浴重悬沉淀再生

[发明专利]一种小麦胚乳细胞原生质体制备与转化的方法-CN202010533705.5在审
发明人：李小辉;韩市陈;晏月明 -专利权人：首都师范大学
申请日： 2020-06-12 - 公布日： 2020-08-18 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种小麦胚乳细胞原生质体制备与转化的方法。本发明提供了一种制备小麦胚乳细胞原生质体的方法，包括：取开花后8‑11天新鲜小麦籽粒，沿腹缝剖开，得胚乳组织，置于缓冲液1中浸泡、洗涤，然后置于缓冲液2中酶解，进行冰浴静置时间梯度沉降，得纯化后小麦胚乳细胞原生质体本发明针对含有大量贮藏淀粉颗粒的小麦胚乳细胞提出一种能够高效、经济、快速的原生质体制备与转化方法，该方法能快速有效分离出胚乳细胞原生质体，可用于小麦胚乳表达因子的亚细胞定位、转录因子活性分析、蛋白质互作鉴定和酶活分析
一种小麦胚乳细胞原生质体制备转化方法

[发明专利]一种油茶叶肉原生质体分离与纯化方法-CN202110911066.6在审
发明人：肖诗鑫;李素芳;叶天文 -专利权人：中南林业科技大学
申请日： 2021-08-10 - 公布日： 2021-10-26 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种油茶叶肉原生质体分离与纯化方法，属于植物生物技术领域。切成叶条加入到含EME培养基的无菌瓶中，盖上封瓶膜，负压下抽真空10min～1h；吸出EME培养基、加入酶液；无菌瓶用封口膜封口后酶解6～14h；将酶解后的溶液通过无菌筛过滤，滤液离心后去上清，用W缓冲液对原生质体进行清洗和重悬，冰上静置沉淀后，吸去上清，得到纯净的原生质体。通过本发明方法获得的原生质体形态完整、稳定，产量高达2.8×107个/g·FW，原生质体活力高达91.7％以上。
一种油茶叶肉原生质体分离纯化方法

[发明专利]一种豆科植物根瘤组织原生质体的制备方法-CN202210878147.5在审
发明人：林传勇 -专利权人：广州元信生物科技有限公司
申请日： 2022-07-25 - 公布日： 2022-09-06 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种豆科植物根瘤组织原生质体制备方法，属于生物技术领域。以豆科植物根瘤组织为原始材料，利用酶解液对根瘤组织进行消化解离，并利用50μm尼龙网细胞筛过滤、蔗糖纯化、CPW溶液清洗及离心分层的方法分离出高质量的原生质体。通过本发明主要解决现有技术缺乏豆科植物根瘤组织高质量原生质体制备问题，获得的植物组织原生质体形态较好，产量高，细胞活性高，可满足后续基因工程、遗传转化以及单细胞测序等后续实验，并进一步为其他植物、其他部位的原生质体的制备条件探索提供了可靠的依据
一种豆科植物根瘤组织原生质体制备方法

[发明专利]一种油茶花瓣原生质体的分离及瞬时转化体系构建方法-CN202210724747.6在审
发明人：李宁;林增;黄黎君;袁德义 -专利权人：中南林业科技大学
申请日： 2022-06-24 - 公布日： 2022-10-28 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种油茶花瓣原生质体的分离及瞬时转化体系构建方法。具体地公开了油茶原生质体的分离方法，包括：A1)酶裂解：将油茶花瓣撕去表皮后放入酶解液中，置于28℃黑暗条件下酶解7.5～8h，得到原生质体悬浮液；所述酶解液的组成为：3％(30g/L)纤维素酶R10、本发明还提供了油茶原生质体的瞬时转化方法。本发明方法取材方便，无需无菌组培，省去大量前期准备工作，原生质体分离效率高且损失小，转化率可高达80％以上，为油茶基因功能的研究提供了强力支撑。
一种油茶花瓣原生质体分离瞬时转化体系构建方法

[发明专利]一种从森林草莓愈伤组织中提取原生质体的方法-CN202211155765.3在审
发明人：张凯;王亚梅;张洪霞;刘炳福;于慧玲 -专利权人：鲁东大学;招远市盛慧农业技术发展有限公司
申请日： 2022-09-22 - 公布日： 2022-12-27 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种从森林草莓愈伤组织中提取原生质体的方法，属于生物技术领域。将森林草莓组培苗叶片诱导产生愈伤组织，分化培养，挑选浅绿色、质地松软、具颗粒感并且生长旺盛的丛生芽，破碎，过滤，23℃、60rpm酶解3h，离心收集绿色的沉淀，75μm和10μm尼龙网过滤，离心，重悬沉淀，即得到草莓愈伤组织原生质体悬浮液本发明的有益之处在于：成功的提取出了二倍体草莓愈伤组织原生质体，克服了草莓叶片原生质体提取困难的问题，并且通过优化酶解液的配方，将酶解时间由14h以上缩短为3h，大大提高了提取效率；提取出来的草莓愈伤组织原生质体状态良好
一种森林草莓组织提取原生质体方法

[发明专利]一种油莎豆原生质体的制备方法-CN202211130820.3在审
发明人：张向歌;王会伟;朱雅婧;李春鑫;王艳;李居政;王晓青 -专利权人：河南省农业科学院经济作物研究所
申请日： 2022-09-16 - 公布日： 2022-11-29 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种油莎豆原生质体的制备方法，包括以下步骤：(1)分别油莎豆幼嫩根、芽、叶片、茎、匍匐茎和分蘖节6个不同组织；(2)快速将所述组织切成细条或薄片，然后迅速将其转移至盛有酶解液的细胞培养板中，使其完全沉浸于酶解液中；(3)将细胞培养板置于摇床上，避光酶解；(4)将酶解后的酶解液用尼龙网筛过滤，过滤后将残渣夹回原生质体容器中，然后用W5溶液洗涤后再次过滤，直至将残渣充分洗涤，最后再用尼龙网将滤液重复过滤得最终滤液；(5)将最终滤液进行离心，倒掉所述上清液，用W5溶液稀释重悬所述原生质体沉淀，得所述油莎豆原生质体。本发明的制备方法有效地解决了油莎豆原生质体制备效率低、完整性差的难题。
一种油莎豆原生质体制备方法

[发明专利]一种参薯原生质体的制备方法与应用-CN202310492209.3在审
发明人：吴文嫱;夏薇;黄东益;张金兰;梅朋飞;庄赛伟;刘铭 -专利权人：海南大学
申请日： 2023-04-28 - 公布日： 2023-07-04 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明提供一种参薯原生质体的制备方法与应用，本发明包括以下步骤：取参薯组培苗嫩叶，并切成0.5‑1.0mm的条带；在切割过程中，将叶片放置在用甘露醇浸泡的滤纸上，并将叶片放入酶溶液中酶解3‑9h；所述酶溶液包括0.4‑1.2w/w％纤维素酶、0.5‑1.5w/w％离析酶、0.01～0.03w/w％果胶酶；用W5溶液洗涤，过滤，过滤时用W5溶液洗涤，过滤后，通过离心收集叶片释放的原生质体，并将其重新悬浮在W5溶液中本发明可以获得更高的参薯原生质体产量，且原生质体活力达到92％以上。本发明可以高效的获得大量高活力的参薯原生质体，为蛋白质亚细胞定位以及基因功能分析提供良好的实验材料。
一种原生质体制备方法应用

[发明专利]一种PEG4000-CN202211689551.4在审
发明人：张成花;黄秋菊;邓旺秋;程慧娇;黄虹;王刚正;黄浩;李泰辉 -专利权人：广东省科学院微生物研究所（广东省微生物分析检测中心）
申请日： 2022-12-27 - 公布日： 2023-03-07 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明公开了一种PEG4000介导的广东虫草原生质体转化方法及应用。该方法包括将制备好的广东虫草原生质体与添加亚精胺溶液的目的基因转化片段混合冰浴后；加入PEG4000溶液混匀；加入到培养基中进行原生质体再生培养；再覆盖一层含有抗性标记的培养基本发明首次实现了广东虫草原生质体的转化，建立了一套完整的广东虫草遗传转化方法，成功获得了含有潮霉素抗性标记基因的转化子。本发明的广东虫草原生质体转化方法操作简单有效，成本相对较低，应用范围广，为广东虫草分子生物学研究奠定了理论与技术基础。
一种 peg base sub 4000