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[发明专利]一种提高博落回中血根碱含量的方法及应用-CN202210415471.3在审
发明人：曾建国;孙梦姗;黄鹏;刘薇 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2022-04-20 - 公布日： 2022-06-24 - 主分类号： C12N15/54 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高博落回中血根碱含量的方法及应用。通过沉默博落回中的McSMT基因表达或者敲除McSMT基因，提高博落回中血根碱含量。本发明采用CRISPR/Cas9基因编辑体系敲除McSMT基因，用于培育提高血根碱含量的博落回新种质。主要针对目前博落回传统育种无法快速获得高血根碱含量种质材料的问题，首次在博落回植物应用基因编辑技术获得具有重要应用价值的高血根碱博落回种质材料。
一种提高博落回中血根碱含量方法应用

[发明专利]过表达小檗碱桥接酶提高博落回中BAIs含量的方法及应用-CN201811338282.0在审
发明人：黄鹏;曾建国 -专利权人：湖南美可达生物资源股份有限公司
申请日： 2018-11-12 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明提供一种过表达小檗碱桥接酶提高博落回中BAIs含量的方法及应用，本发明的方法是通过PCR技术扩增博落回中参与生物碱代谢的关键基因小檗碱桥接酶(BBE)全长编码序列并结合In‑Fusion同源重组法高效率载体构建技术将博落回中BBE基因成功整合到植物表达载体pCAMBIA2301D，然后利用农杆菌介导的方法将表达载体导入至博落回外植体中，以提高博落回中BAIs(苄基异喹啉类生物碱)的含量。本发明方法获得的过表达博落回阳性植株中的一些BAIs，如(S)‑网状番荔枝碱、(S)‑金黄紫堇碱、(S)‑华紫堇碱、(S)‑四氢非洲防己碱的含量均得到了显著提高，约提高3倍左右，能为深入研究BBE基因功能和提高博落回中苄基异喹啉类生物碱的含量提供前期基础
博落回小檗碱桥接苄基异喹啉类生物碱紫堇碱全长编码序列植物表达载体非洲防己碱农杆菌介导同源重组法表达载体番荔枝碱关键基因基因功能阳性植株载体构建高效率生物碱外植体扩增整合代谢应用基因成功研究

[发明专利]液膜分离提取博落回中生物碱的方法-CN200710035400.6无效
发明人：马铭;梁锋;陈波;姚守拙 -专利权人：湖南师范大学
申请日： 2007-07-20 - 公布日： 2007-12-26 - 主分类号： A61K36/66 文献下载
摘要：本发明公开了一种液膜分离提取博落回中生物碱的方法。其乳状液的制备是以食用油作膜溶剂，以Span 80或Span 80与助表面活性剂的混合物作为表面活性剂，磷酸脂作载体，再将pH＝4的博落回盐酸提取液或硫酸提取液与乳状液按照乳水体积比为(50∶5～50∶20)加入提取器中，在200转/分～300转/分的低速搅拌提取5－15min；经水浴加热破乳后分出油层，所得水相即为博落回中总生物碱的溶液。可应用于博落回药品、生物农药、兽药等产品的生产和开发及博落回中生物碱的分析测定。
分离提取博落回中生物碱方法

[发明专利]博落回中参与血根碱与白屈菜红碱合成的黄素蛋白氧化酶基因及其应用-CN201610505727.4有效
发明人：曾建国;黄鹏;刘秀斌 -专利权人：湖南美可达生物资源股份有限公司
申请日： 2016-06-30 - 公布日： 2019-05-14 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明公开了博落回中参与血根碱与白屈菜红碱合成的黄素蛋白氧化酶基因及其应用。首次在博落回基因组中发现3个参与血根碱与白屈菜红碱合成的黄素蛋白氧化酶基因，包括Mc20113、Mc6407、Mc6408基因。本发明还通过酿酒酵母异源表达体系比较了博落回与罂粟同功能基因的转化效率，发现博落回基因的转化效率显著高于罂粟。本发明进一步揭示了血根碱在博落回中合成的分子机制，为高血根碱与白屈菜红碱含量博落回育种提供了理论依据和分子辅助育种目标；同时为血根碱与白屈菜红碱的体外人工合成提供了宝贵经验。
博落回中参与血根碱白屈菜合成黄素蛋白氧化酶基因及其应用

[发明专利]博落回中参与血根碱与白屈菜红碱合成的细胞色素P450酶基因及其应用-CN201610510877.4有效
发明人：曾建国;黄鹏;黄三文;尚轶 -专利权人：湖南美可达生物资源股份有限公司
申请日： 2016-06-30 - 公布日： 2019-04-30 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明公开了博落回中参与血根碱与白屈菜红碱合成的细胞色素P450酶基因及其应用。首次在博落回基因组中发现5个参与血根碱与白屈菜红碱合成的细胞色素P450酶基因，包括基因Mc9485、Mc2661、Mc217、Mc11229、Mc11218。本发明还通过酿酒酵母异源表达体系比较了博落回与罂粟和花菱草同功能基因的转化效率，发现博落回基因的转化效率显著高于罂粟和花菱草。本发明进一步揭示了血根碱在博落回中合成的分子机制，为高血根碱与白屈菜红碱含量博落回育种提供了理论依据和分子辅助育种目标；同时为血根碱与白屈菜红碱的体外人工合成提供了宝贵经验。
博落回中参与血根碱白屈菜合成细胞色素 p450 基因及其应用

[发明专利]博落回和/或小果博落回种子油在饲料添加剂中的应用-CN201110243895.8有效
发明人：曾建国;刘秀斌;杨天宁;张雄敏;蔡鹏 -专利权人：曾建国
申请日： 2011-08-24 - 公布日： 2012-01-25 - 主分类号： A23K1/14 文献下载
摘要：博落回和/或小果博落回种子油在饲料添加剂中的应用，本发明涉及从植物博落回(Macleaya cordata(Willd)R.Br.)的种子和/或小果博落回(Macleaya microcarpa(Maxim.)Fedde)的种子中压榨或超临界提取种子油，并对种子油成分进行分析，GC-MS(气相色谱-质谱联用仪)检测结果表明博落回种子油和/或小果博落回中主要含油酸、亚油酸、棕榈酸等，具有芳香性，具有矫味功能
博落回小果博落回种子饲料添加剂中的应用

[发明专利]博落回中参与血根碱与白屈菜红碱合成的甲基转移酶基因及其应用-CN201610507690.9有效
发明人：曾建国;黄鹏;卿志星 -专利权人：湖南美可达生物资源股份有限公司
申请日： 2016-06-30 - 公布日： 2019-05-03 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了博落回中参与血根碱与白屈菜红碱合成的甲基转移酶基因及其应用。首次在博落回基因组中发现6个参与血根碱与白屈菜红碱合成的甲基转移酶基因，包括Mc2833、Mc769、Mc8567、Mc833、Mc830、Mc9487基因。本发明进一步揭示了血根碱在博落回中合成的分子机制，为高血根碱与白屈菜红碱含量博落回育种提供了理论依据和分子辅助育种目标；同时为血根碱与白屈菜红碱的体外人工合成提供了宝贵经验。
博落回中参与血根碱白屈菜合成甲基转移酶基因及其应用

[发明专利]一种从小果博落回中提取分离六种二氢苯并菲啶类生物碱的方法-CN201910628959.2有效
发明人：曾建国;刘兆颖;林莉 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2019-07-12 - 公布日： 2020-08-14 - 主分类号： C07D491/056 文献下载
摘要：本发明公开了一种从小果博落回中提取分离六种二氢苯并菲啶类生物碱的方法，该方法是将小果博落回原料经过溶剂提取、浓缩、分离、纯化，得到6‑(2’‑甲酸乙酯基)二氢血根碱、6‑(2’‑羧酸乙酯基)二氢白屈菜红碱，6‑羧酸甲酯基二氢血根碱，6‑羧酸乙酯基二氢血根碱，6‑(2’‑羧酸乙酯基)二氢血根碱和6‑异羧酸乙酯二氢血根碱；该方法从小果博落回中成功提取分离出六种二氢苯并菲啶类生物碱，提取分离效率高，且获得的生物碱纯度高，提高了小果博落回的资源化利用，为对新药物活性成分的认知研究和提取分离提供有效途径。
一种从小果博落回中提取分离六种二氢苯菲啶类生物碱方法

[发明专利]博落回八氢番茄红素脱氢酶基因的核苷酸序列及应用-CN202010876337.4在审
发明人：曾建国;孙梦姗;黄鹏 -专利权人：湖南美可达生物资源股份有限公司
申请日： 2020-08-27 - 公布日： 2020-11-20 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明提供一种博落回八氢番茄红素脱氢酶基因的核苷酸序列及应用，所述博落回八氢番茄红素脱氢酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明还提供了一种博落回八氢番茄红素脱氢酶的氨基酸序列，所述氨基酸序列如通过引物设计及PCR扩增的方法获得了博落回八氢番茄红素脱氢酶基因，并将其应用于基于CRISPR/Cas9的博落回基因的构建体系，为首次在博落回植物中实现基因编辑，为博落回中功能基因挖掘、种质创新等提供有力途径
博落回八氢番茄脱氢酶基因核苷酸序列应用

[发明专利]博落回总生物碱或其盐在抗血吸虫致肝纤维化中的应用-CN200810031530.7有效
发明人：曾建国;钟明;姚利 -专利权人：长沙世唯科技有限公司
申请日： 2008-06-18 - 公布日： 2008-11-05 - 主分类号： A61K36/66 文献下载
摘要：博落回总生物碱或其盐在抗血吸虫致肝纤维化治疗中的应用，本发明将博落回总生物碱应用于抗血吸虫致肝纤维化治疗。博落回总生物碱是从罂粟科植物博落回中提取分离得到的橙红色粉末，本发明通过从细胞学和血清指标检测实验证实：对肝细胞纤维化症状明显减轻作用；博落回总生物碱对血吸虫病造成肝纤维化具有良好的预防和治疗作用。结果说明博落回总生物碱具有确切的抗血吸虫致肝纤维化作用，因此可用来制备预防和治疗血吸虫致肝纤维化的药物。
博落回总生物碱血吸虫纤维化中的应用

[发明专利]一种博落回提取物的制备方法和应用-CN202210651516.7在审
发明人：王显赫;林培嘉;陈劲;张建会;黄禧恬;罗涵;罗静琳 -专利权人：珠海科技学院
申请日： 2022-06-09 - 公布日： 2022-09-16 - 主分类号： B01D11/02 文献下载
摘要：本发明属于植物提取物技术领域，公开了一种博落回提取物的制备方法和应用。该制备方法，包括以下步骤：向博落回粉末中加入水，然后加压升温至120‑220℃，保持10‑60min；再固液分离得滤液，即制得博落回提取物。本发明在博落回提取物的制备中，将水加压升温至120‑220℃形成亚临界水，利用亚临界水提取博落回。通过控制升温的温度和提取的时间，能够促进博落回中活性成分的溶出，显著提高博落回提取物的抗氧化性能，尤其是ABTS清除能力，能够应用于抗氧化产品的制备。
一种博落回提取物制备方法应用

[发明专利]基于CRISPR/Cas9系统对博落回PDS基因编辑体系的构建方法及应用-CN202010876340.6有效
发明人：曾建国;黄鹏;孙梦姗 -专利权人：湖南美可达生物资源股份有限公司
申请日： 2020-08-27 - 公布日： 2023-08-08 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于CRISPR/Cas9系统对博落回PDS基因编辑体系的构建方法，包括以下步骤：S1、根据SEQ ID NO.1所示的博落回PDS基因的编码区避开内含子区域设计一条如SEQ ID NO.3所示的靶序列；S2、利用步骤S1所述的靶序列，合成一对互补的靶序列，然后构建真核表达载体，筛选出连接正确的重组载体；S3、将步骤S2中连接正确的表达载体转化农杆菌，并进行博落回外植体的侵染，将外植体进行组织培养后，获得突变植株，构建了基于CRISPR/Cas9的博落回基因的构建体系，为首次在博落回植物中实现基因编辑，为博落回中功能基因挖掘、种质创新等提供有力途径。
基于 crispr cas9 系统博落回 pds 基因编辑体系构建方法应用

[发明专利]一种博落回中抗乳腺癌活性成分的制备方法-CN201810617108.3有效
发明人：孙蓉;王岱杰;李晓宇;刘闰平;李晓骄阳;黄娜娜 -专利权人：山东大学
申请日： 2018-06-15 - 公布日： 2020-10-13 - 主分类号： C07D491/153 文献下载
摘要：本发明公开了一种pH‑区带精制逆流色谱分离博落回中生物碱类化合物的方法，所述分离采用了环境友好型的正己烷/乙酸乙酯/异丙醇/水溶剂体系，所述溶剂体系中各试剂的体积比为1:3:1.5:4.5。本发明方法能够高效的从博落回中分离初纯度达到98％以上的血根碱和白屈菜红碱。
一种博落回中抗乳腺癌活性成分制备方法

[发明专利]一种用于林业的杀菌剂-CN202211080975.0在审
发明人：李刚;杜吉麟;杨荣;刘建军;陈金莲;李文 -专利权人：甘肃一禾园林绿化有限公司
申请日： 2022-09-05 - 公布日： 2022-11-22 - 主分类号： A01N65/08 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于林业的杀菌剂，包括博落回乳油、以及茶枯乳油，所述博落回乳油由不同比例的溶剂、乳化剂及博落回提取物配制而成，所述茶枯乳油由不同比例的溶剂、乳化剂及茶枯提取物配制而成，所述博落回乳油的溶剂为二甲基亚砜，乳化剂为吐温20，所述茶枯乳油的溶剂为二甲基亚砜，乳化剂为NP‑40，本发明确定博落回和茶枯的提取物对炭疽病菌和软腐病菌具有较高的生物抑制活性，且博落回中的生物碱成分对炭疽病菌和软腐病菌有较大抑制作用
一种用于林业杀菌剂

[发明专利]一种提高博落回幼苗抗旱性的育苗方法-CN201910905330.8在审
发明人：郑亚杰;曾建国;余林岚;周利 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2019-09-24 - 公布日： 2020-01-24 - 主分类号： A01G22/00 文献下载
摘要：本发明属于作物栽培技术领域，具体涉及一种提高博落回幼苗抗旱性的育苗方法。本发明的育苗方法有助于增强博落回植株体内CAT、SOD和POD等氧化酶的活性，促进植物的光合作用，提升叶绿素含量和叶片含水量，并抑制植物的蒸腾作用，从而提高博落回幼苗的抗旱能力，提高成活率，同时对于博落回中间体生物碱的合成具有一定的促进作用，在博落回植株培育中具有极高的应用价值。
博落回幼苗光合作用育苗叶绿素作物栽培技术叶片含水量幼苗抗旱性吡咯喹啉醌促进作用抗旱能力苗床整理水肥管理幼苗移栽蒸腾作用植株培育种子处理植株生物碱氧化酶喷施成活率移栽大田播种合成体内生长应用

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