本发明涉及糖基转移酶、突变体及其应用。具体地,提供了一种体外糖基化方法,包括步骤:在糖基转移酶存在下,将糖基供体的糖基转移到四环三萜类化合物的C‑3位羟基上;从而形成糖基化的四环三萜类化合物;其中,所述的糖基转移酶为如SEQ ID NO.4所示的糖基转移酶或其衍生多肽;或如SEQ ID NO.21所示的糖基转移酶或其衍生多肽。
本发明公开了一种糖基转移酶及其应用。糖基转移酶,其为(a)、(b)或(c)所示的蛋白质:(a):如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b):在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有碳‑糖基化和氧‑糖基化的催化活性的由(a)衍生的蛋白质。(c):与(a)的氨基酸序列同源性≥90%,且具有碳‑糖基化和氧‑糖基化的催化活性的氨基酸序列。本发明首次发现天然的微生物来源的糖基转移酶Gra‑ORF14同时具有碳‑糖基化和氧‑糖基化的催化活性。同时,本发明也在国内外首次公开了糖基转移酶Gra‑ORF14在催化芳香聚酮化合物生成相应的同时含有碳‑糖基化和氧‑糖基化形式的芳香聚酮化合物中的应用。