本发明属于农业技术领域,具体涉及一种检测尖孢镰刀菌黄瓜专化型的引物、探针及其应用。本发明的检测尖孢镰刀菌黄瓜专化型的引物和探针,其引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示,所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明选取尖孢镰刀菌黄瓜专化型的基因组中HPEG序列中一段保守序列,针对该序列设计得到特异性引物和探针,设计得到的特异性引物和探针可以扩增出片段单一的目的片段,而在其他细菌中均没有扩增信号,从而本发明利用所述引物及探针能够实现对尖孢镰刀菌黄瓜专化型的特异性检测