[发明专利]一种基于滚环扩增反应耦合DNAzyme双重等温扩增技术的exRNA检测方法

摘要

本发明提供了一种基于滚环扩增反应耦合DNAzyme双重等温扩增技术的exRNA检测方法。该策略针对目标exRNA，设计了可与之高特异性结合的锁环探针，同时依赖连接反应增强识别，可实现目标序列的精准靶向；利用滚环扩增反应对低丰度exRNA进行扩增，实现信号的一次放大；进一步将DNAzyme与RCA产物耦合，利用Mg2+依赖的DNAzyme自催化切割自身核糖核酸底物的特点释放荧光信号并实现信号的二次放大。本发明简便可控，具有特异性强、灵敏度高及反应恒温等优点，可检测低至1pM的靶标exRNA，且具有出色的特异性，能有效区分靶标与其它miRNA序列，为低丰度exRNA的精准检测及探索未知外泌体RNA功能提供了新的研究思路。