[发明专利]一种D-阿洛酮糖3-差向异构酶突变体文库的高通量筛选方法及获得的突变体在审
| 申请号： | 202310086878.0 | 申请日： | 2023-01-30 |
| 公开（公告）号： | CN115960879A | 公开（公告）日： | 2023-04-14 |
| 发明（设计）人： | 沐万孟;张文立;陈佳俊;徐炜;朱莺莺;倪大伟 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/90 | 分类号： | C12N9/90;C12N15/61;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/24;C12P19/02;C12Q1/533;G01N21/35;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 赵巧娜 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体文库的高通量筛选方法及获得的突变体，属于酶工程技术领域。本发明所提供的高通量筛选方法是基于在酸性Si(IV)–Mo(Ⅵ)显色液中，D‑果糖可将黄色钼酸盐Mo(Ⅵ)还原，生成蓝色钼酸盐Mo(V/Ⅵ)，其颜色深浅在一定范围内与D‑果糖的含量成正比，且在相同浓度水平下，D‑阿洛酮糖不会干扰D‑果糖的测定。同时，本发明还提供了D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶四点突变体，与该酶野生型相比，其在60℃下孵育1h后的残余酶活提升69.8％，最适温度提高5℃，在60℃下的半衰期值由0.64h增加到7.30h，因此其工业应用潜力得到明显提升。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 阿洛酮糖 差向异构 突变体 文库 通量 筛选 方法 获得 | ||
【主权项】：
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