[发明专利]一种特异性酶切结合qPCR单碱基分辨定量检测DNA中尿嘧啶的方法在审
申请号: | 202211552186.2 | 申请日: | 2022-12-05 |
公开(公告)号: | CN115725703A | 公开(公告)日: | 2023-03-03 |
发明(设计)人: | 袁必锋;季彤彤;谢能彬 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | C12Q1/6851 | 分类号: | C12Q1/6851;C12Q1/6883 |
代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 常海涛 |
地址: | 430072 湖北省武*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种特异性酶切结合qPCR单碱基分辨定量检测DNA中尿嘧啶的方法,属于生物技术领域。本发明基于UdgX‑H109S能够识别并切割尿嘧啶(U)产生无嘌呤位点(AP),无嘌呤核酸内切酶1(APE1)切割产生的AP位点,产生1个核苷酸间隙,导致Bst 3.0DNA聚合酶的延伸停止。实时荧光定量PCR(qPCR)技术可以放大延伸产物的差异,进而直接检测特定位点尿嘧啶的含量。本发明方法灵敏度高,特异性好,操作简单,效率高,不仅可以用于低丰度生物样品中尿嘧啶的单碱基分辨率测定,同时为研究尿嘧啶在生物体中的功能提供了新方法。 | ||
搜索关键词: | 一种 特异性 切结 qpcr 碱基 分辨 定量 检测 dna 嘧啶 方法 | ||
【主权项】:
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