[发明专利]利用CRISPR/Cas9技术获得木质素缺陷株型杂交构树的方法在审
申请号: | 202210040014.0 | 申请日: | 2022-01-14 |
公开(公告)号: | CN114350703A | 公开(公告)日: | 2022-04-15 |
发明(设计)人: | 付春祥;徐悦;曹英萍;吴振映;何峰;李瑞;苏昆龙;姜珊珊 | 申请(专利权)人: | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 |
主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84;C12N15/53;A01H4/00;A01H5/00;A01H6/00 |
代理公司: | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人: | 沈小明 |
地址: | 266101 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一利用CRISPR/Cas9技术获得木质素缺陷株型杂交构树的方法,属于植物基因工程技术领域,首先构建CRISPR/Cas9基因敲除载体质粒,热激发将载体质粒转到EHA105农杆菌中制备侵染液,将杂交构树叶子浸泡到侵染液里,真空抽滤5‑8min;吸干侵染液,置于共培养基N6AS共培养两天;将叶子转移到筛选培养基MS5中诱导;将长出的愈伤转移到分化培养基WPMD诱导;将诱导出来的芽转移到生根培养基MS0诱导;当树苗长到6‑8cm高,加入抑菌水,开盖炼苗6‑8天,冲洗掉培养基,在加入生根粉的水里浸泡,然后转移到透气湿润的土里进行种植。本发明在杂交构树中敲除F5H蛋白编码基因,其蛋白表达量活性降低或失活,杂交构树S型木质素单体素含量降低,牧草消化率升高。 | ||
搜索关键词: | 利用 crispr cas9 技术 获得 木质素 缺陷 株型 杂交 方法 | ||
【主权项】:
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