[发明专利]一种海洋微生物脂肪酶嵌合体及其构建方法和应用有效
申请号: | 202110679849.6 | 申请日: | 2021-06-18 |
公开(公告)号: | CN113481183B | 公开(公告)日: | 2023-01-06 |
发明(设计)人: | 蓝东明;李爽;王永华;杨博;王方华;刘萱 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学 |
主分类号: | C12N9/20 | 分类号: | C12N9/20;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 宫爱鹏 |
地址: | 510640 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明属于酶工程领域,公开了一种海洋微生物脂肪酶嵌合体及其构建方法和应用,脂肪酶嵌合体氨基酸序列如SEQ NO.1所示,编码脂肪酶嵌合体的基因核苷酸序列如SEQ NO.2所示。构建方法如下:(1)pcr扩增出GMGL的N端前160个氨基酸肽段;(2)无缝克隆方式将步骤(1)的氨基酸肽段替换到CoMGL对应肽段得到重组质粒;(3)将测序成功的重组质粒转化到BL21(DE3)感受态细胞内进行异源表达与纯化,得到脂肪酶嵌合体160。改造后的嵌合体160在最适条件的比酶活为741.8U/mg,是野生型CoMGL的4.9倍,是野生型GMGL的2.7倍;最适反应温度为70℃,具有良好的工业应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 海洋 微生物 脂肪酶 嵌合体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
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