[发明专利]一种毕赤酵母高效转化感受态细胞的制备方法和转化方法有效

专利信息
申请号: 202110597220.7 申请日: 2021-05-28
公开(公告)号: CN113151022B 公开(公告)日: 2023-05-02
发明(设计)人: 廖怡辉;许静兰;陈思龙;符磊 申请(专利权)人: 武汉华美生物工程有限公司
主分类号: C12N1/16 分类号: C12N1/16;C12N15/81;C12R1/84
代理公司: 北京众达德权知识产权代理有限公司 11570 代理人: 张晓冬
地址: 430206 湖北省武汉市东湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要: 发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种毕赤酵母高效转化感受态细胞的制备方法和转化方法,所述方法包括:接种毕赤酵母进行第一培养,后转接进行第二培养,得到第一菌液;将所述第一菌液进行第三培养,得到第二菌液;将所述第二菌液依次用细胞渗透压保护液、细胞膜透性增强液、细胞稳定液和细胞DNA保护液进行重悬活化,得到感受态细胞。该方法得到的感受态细胞,所述感受态细胞的活性度为85%‑95%,具有极高的转化效率,用质粒(浓度为5ug/ul)转化,可以得到2×103个转化子;PCR鉴定成功率达到90%以上。
搜索关键词: 一种 酵母 高效 转化 感受态 细胞 制备 方法
【主权项】:
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