[发明专利]高特异性Taq DNA聚合酶变体及其在基因组编辑和基因突变检测中的应用有效

专利信息
申请号: 202110320668.4 申请日: 2021-03-25
公开(公告)号: CN112921015B 公开(公告)日: 2022-08-09
发明(设计)人: 黄启来;刘晓丹;杜平;李博;杨乐乐;任乃霞;李莹莹 申请(专利权)人: 山东大学
主分类号: C12N9/12 分类号: C12N9/12;C12N15/54;C12Q1/6858
代理公司: 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 代理人: 宋海海
地址: 266237 *** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明提供高特异性Taq DNA聚合酶变体及其在基因组编辑和基因突变检测中的应用,属于生物技术领域。本发明通过对野生型全长Taq DNA聚合酶进行了半理性的定向分子进化来提高其特异性。选取Taq酶上与引物/模板复合物有直接相互作用的全部极性氨基酸进行逐个突变,获得40个Taq变体,然后在这些变体及野生型序列的基础上进行广泛的随机诱变,生成Taq突变体文库。在我们的qPCR筛选系统上,以基因组编辑indels质粒为模板,筛选出一系列具有高特异性的Taq突变体,在CRISPR/Cas9编辑效率评估和单细胞克隆基因分型中展现出了极大的优势,因此具有良好的实际应用之价值。
搜索关键词: 特异性 taq dna 聚合 变体 及其 基因组 编辑 基因突变 检测 中的 应用
【主权项】:
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