[发明专利]一种快速测定囊泡病毒滴度的绝对定量PCR方法有效

专利信息
申请号: 202010064413.1 申请日: 2020-01-20
公开(公告)号: CN111235309B 公开(公告)日: 2022-09-30
发明(设计)人: 黄国华;宋晓慧;李梓琦;黎妮 申请(专利权)人: 湖南农业大学
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/686
代理公司: 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 代理人: 何为;袁颖华
地址: 410128 *** 国省代码: 湖南;43
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摘要: 一种快速测定囊泡病毒滴度的绝对定量PCR方法,是将含囊泡病毒的待测样品超声破碎,然后稀释、过滤,用其感染对数生长期细胞1h,收集细胞悬液、计算细胞数量,提取总DNA;对上述DNA进行qPCR检测,以含有该片段的pGEM‑T载体为标准品,绘制绝对定量PCR检测的标准曲线。根据样品的Ct值计算出每样品中含有的病毒基因组拷贝数。根据感染复数公式,计算感染每个细胞的平均病毒粒子数量,即感染时病毒与细胞数量的比值计算病毒滴度。本方法测定囊泡病毒滴度,当样品浓度为1×102~1×1011病毒基因拷贝/mL时检测时间仅需4‑6h,耗时短,与传统的病毒滴度检测方法相比,操作简单快捷,准确,极大提高了囊泡病毒滴度的检测效率,特别适用于囊泡病毒滴度的快速测定。
搜索关键词: 一种 快速 测定 病毒 绝对 定量 pcr 方法
【主权项】:
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