[发明专利]一种检测角蛋白酶活力的酶谱方法有效
申请号: | 202010046593.0 | 申请日: | 2020-01-16 |
公开(公告)号: | CN111206070B | 公开(公告)日: | 2023-03-14 |
发明(设计)人: | 陈璐;孙怀强 | 申请(专利权)人: | 四川大学华西医院 |
主分类号: | C12Q1/37 | 分类号: | C12Q1/37;G01N27/447 |
代理公司: | 成都帝鹏知识产权代理事务所(普通合伙) 51265 | 代理人: | 李华 |
地址: | 610000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明提供了一种检测角蛋白酶活力的酶谱方法,在角蛋白底物处理、制胶、电泳及水解条带显色步骤做了改进,包括(A)将10g角蛋白底物和500ml有机溶剂加入回流冷凝装置中,于80‑100℃消煮60‑100min;用两倍体积经4℃预冷的丙酮沉淀角蛋白;离心收集角蛋白沉淀,清洗后于4℃晾干;(B)在制备分离胶时,加入由(A)处理所得角蛋白底物,使得其质量百分含量为0.1%,然后于室温下以100r/min的速度搅拌1h,离心取上清,进行配置质量浓度为12%的分离胶。本发明克服了传统酶谱方法底物特异性低、水解条带区分度低、灵敏度低等局限,提供了一种准确、灵敏的检测角蛋白酶活力的酶谱方法。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 角蛋白 活力 方法 | ||
【主权项】:
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