[发明专利]产生病毒的方法和组合物

摘要

本发明涉及一种用于产生用作疫苗的重组腺病毒的方法，该重组腺病毒包含编码目的异源基因的核苷酸序列，该方法包括以下步骤：通过将末端蛋白复合腺病毒基因组DNA(TPC‑Ad gDNA)与多核苷酸重组，将异源目的基因插入腺病毒基因组，该多核苷酸包含编码目的基因的核苷酸序列，并所述核苷酸序列的5’末端和3’末端与在体外重组反应中腺病毒基因组DNA的插入位点序列同源；用来自(i)的体外重组反应混合物的稀释液转染在单个容器中生长的细胞，使得许多这样的单个容器包含被重组腺病毒感染的单个细胞，所述重组腺病毒包含编码目的异源基因的核苷酸序列；鉴定其中单个细胞已被重组腺病毒感染的那些个容器，所述重组腺病毒包含编码目的异源基因的核苷酸序列。适当地，所述TPC‑Ad gDNA包含血清型匹配的末端蛋白和腺病毒基因组，所述目的基因编码单个表位、表位串、抗原区段或完整抗原蛋白。本发明还涉及使用这些方法制备的重组腺病毒和组合物。