[发明专利]一种分离纯化猪血浆中白蛋白的方法在审
| 申请号： | 201910754947.4 | 申请日： | 2019-08-15 |
| 公开（公告）号： | CN110317260A | 公开（公告）日： | 2019-10-11 |
| 发明（设计）人： | 杨海;唐青海;王芳宇;杨灿;刘会敬;唐姣玉;龚慧芳;张淇美 | 申请（专利权）人： | 衡阳师范学院 |
| 主分类号： | C07K14/76 | 分类号： | C07K14/76;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30 |
| 代理公司： | 北京权智天下知识产权代理事务所(普通合伙) 11638 | 代理人： | 王新爱 |
| 地址： | 421000 湖*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种分离纯化猪血浆中白蛋白的方法，包括以下步骤：步骤一、白蛋白上清液的制备：调血浆蛋白含量至5％；调pH值以及温度；乙醇加入后调节PH；搅拌温度控制在‑4.5～‑5.0℃，搅拌2小时，离心杯预冷至‑3.0℃～‑4.5℃，装入制品，制品离心，至上清液澄清；步骤二、白蛋白的制作与分离：步骤三、白蛋白的纯化以及过滤；白蛋白沉淀纯化：白蛋白的过滤，除菌过滤、分装。本发明对猪血浆中的单一蛋白建立提取工艺；通过调控温度、pH等参数，利用乙醇沉淀和超滤技术分离目的蛋白，目的蛋白具有高纯度和高提取率；采用的材料价格低廉，降低成本；整个分离纯化过程不到10h，分离效率高；获得的猪血浆白蛋白为高附加值产品，显著提高了猪血浆的加工效益。 | ||
| 搜索关键词： | 白蛋白 猪血浆 分离纯化 目的蛋白 过滤 高附加值产品 材料价格 沉淀纯化 除菌过滤 单一蛋白 分离效率 血浆蛋白 乙醇沉淀 高纯度 离心杯 上清液 超滤 分装 清液 乙醇 预冷 制备 装入 澄清 调控 加工 制作 | ||
【主权项】：
1.一种分离纯化猪血浆中白蛋白的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：步骤一、白蛋白上清液的制备：a、调蛋白含量：通过双缩脲法测定1L血浆的蛋白含量，用0.9％氯化钠稀释血浆至蛋白含量为5％；b、调pH值以及温度：检测稀释后的血浆pH值，并用1M/L柠檬酸调整PH到6.5‑6.8，调节温度至1±0.5℃，加入无水乙醇；c、乙醇加入完毕后再调节PH为6.6±0.1；d、搅拌反应：温度控制在‑4.5～‑5.0℃，搅拌反应2小时，e、离心杯预冷至‑3.0℃～‑4.5℃，装入制品，制品离心，至上清液澄清；步骤二、白蛋白的制作与分离：a、白蛋白的制作：用2M/L的醋酸溶液调节pH＝4.70～4.80，所述醋酸溶液在95％乙醇中溶解，在所述调节pH值的过程中搅拌反应温度为‑7.5℃～‑8.5℃，搅拌时间为2～4小时；b、白蛋白的分离：离心杯预冷至温度‑3.0℃～‑4.5℃，装入制品后开启离心机，离心温度保持在‑5.0℃～‑7.0℃，离心弃上清液，沉淀即为白蛋白；步骤三、白蛋白的纯化以及过滤；a、白蛋白沉淀纯化：将白蛋白分离步骤后得到的白蛋白中加入溶解液，搅拌至完全溶解，控制最终反应温度为‑3.0～‑3.5℃；b、白蛋白的过滤：将白蛋白沉淀纯化后得到的溶液通过除菌滤膜过滤至滤液澄清，将滤液用1M碳酸氢钠调节pH＝6.8～7.1后进行中空纤维超滤脱醇，除菌过滤、分装。
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- 张现忠;杨文江;牟甜甜;唐志刚;王学斌;张俊波;陆洁 - 北京师范大学;北京师宏药物研制中心
- 2009-05-21 - 2009-10-14 - C07K14/76
- 本发明公开了一种氟-18标记的新乳糖白蛋白化合物及其制备方法和应用，该化合物的化学表达式为18FB-NGA。以放射性N-琥珀酰亚胺4-[18F]氟苯甲酸酯([18F]SFB)与新乳糖白蛋白(NGA)在碱性条件下反应制备得到所述的放射性氟-18标记的新乳糖白蛋白化合物；该化合物的化学稳定性及生物性能好、初始摄取值与化学纯度高、制备简单并且使用成本低，作为一种新型的肝脏受体PET显像剂应用在放射性药物化学和临床核医学技术领域中。
- 用于检测和测定黄芩苷的抗体、方法和试剂盒-200810171802.3
- 赵琰;屈会化;王庆国;李宇航;杨爱玲;李翼飞 - 北京中医药大学
- 2008-11-13 - 2009-08-05 - C07K14/76
- 本发明提供包括黄芩苷或其衍生物的半抗原，与赋予抗原性的载体物质结合的前述半抗原的免疫原，与标记试剂结合的前述半抗原的偶联物(包被原)，以及抗前述免疫原的抗体，该抗体能与完整的黄芩苷中的至少一种结构性抗原决定部位结合。本发明还提供用于检测或定量样品中黄芩苷的方法和试剂盒，以及前述偶联物和前述抗体在检测或定量黄芩苷中的用途。本发明对黄芩苷具有特异性，可用于样品中检测黄芩苷的存在和测定黄芩苷的含量。
- 用于检测和测定绿原酸的抗体、方法和试剂盒-200810172700.3
- 王庆国;赵琰;屈会化;任会明;蒋兴凯;杨爱玲;李翼飞 - 北京中医药大学
- 2008-11-13 - 2009-07-22 - C07K14/76
- 本发明提供包括绿原酸或其衍生物的半抗原，与赋予抗原性的载体物质结合的前述半抗原的免疫原，与标记试剂结合的前述半抗原的偶联物(包被原)，以及抗前述免疫原的抗体，该抗体能与完整的绿原酸中的至少一种结构性抗原决定部位结合。本发明还提供用于检测或定量样品中绿原酸的方法和试剂盒，以及前述偶联物和前述抗体在检测或定量绿原酸中的用途。本发明对绿原酸具有特异性，可用于样品中检测绿原酸的存在和测定绿原酸的含量。
- 专利分类
