[发明专利]一种马梨形虫病双重荧光RPA检测方法在审
| 申请号： | 201910615885.9 | 申请日： | 2019-07-09 |
| 公开（公告）号： | CN110551836A | 公开（公告）日： | 2019-12-10 |
| 发明（设计）人： | 姜宁;陈启军;刘铮 | 申请（专利权）人： | 沈阳农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6893 | 分类号： | C12Q1/6893;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司： | 21100 辽宁沈阳国兴知识产权代理有限公司 | 代理人： | 姜婷婷 |
| 地址： | 110866 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明涉及一种马梨形虫病双重荧光RPA检测方法，包括如下步骤：（1）对选取马泰勒虫EMA‑1基因与驽巴贝斯虫Bc48基因保守基因序列，按照引物设计原则，设计两组引物及特异性探针；（2）待测DNA的提取；（3）将步骤（2）中提取的DNA为模板，使用步骤（1）中所设计的引物及探针配制反应体系；根据反应体系要求，设置等温扩增仪反应程序及检测探针所对应的荧光信号；实验中设置标准对照组及空白组，若反应检测到探针信号，则为阳性。本发明具有很强的特异性和较好的抗干扰性。 | ||
| 搜索关键词： | 引物 保守基因序列 特异性探针 标准对照 等温扩增 反应程序 反应检测 检测探针 梨形虫病 双重荧光 探针信号 引物设计 荧光信号 基因 空白组 泰勒虫 两组 探针 配制 检测 | ||
【主权项】：
1.一种马梨形虫病双重荧光RPA检测方法，其特征在于包括如下步骤：/n(1)对选取马泰勒虫EMA-1基因与驽巴贝斯虫Bc48基因保守基因序列，按照引物设计原则，设计T-F/T-R，B-F/B-R两组引物及特异性探针；其中，马泰勒虫所对应的荧光探针标记ROX荧光素，驽巴贝斯虫所对应的荧光探针标记FAM荧光素；/n(2)待测DNA的提取；/n(3)将步骤(2)中提取的DNA为模板，使用步骤(1)中所设计的引物及探针配制反应体系；反应温度为39℃30min；根据反应体系要求，设置等温扩增仪反应程序及检测探针所对应的荧光信号；/n(4)实验中设置标准对照组及空白组，若反应检测到探针信号，则为阳性。/n
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