[发明专利]一种马梨形虫病双重TaqMAN探针荧光定量PCR检测方法有效
| 申请号： | 201910615880.6 | 申请日： | 2019-07-09 |
| 公开（公告）号： | CN110564882B | 公开（公告）日： | 2023-08-08 |
| 发明（设计）人： | 陈启军;姜宁;刘铮 | 申请（专利权）人： | 沈阳农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6893 | 分类号： | C12Q1/6893;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 辽宁沈阳国兴知识产权代理有限公司 21100 | 代理人： | 姜婷婷 |
| 地址： | 110866 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种马梨形虫病双重TaqMAN探针荧光定量PCR检测方法，包括如下步骤：（1）对马梨形虫病两种病原马泰勒虫和驽巴贝斯虫18S核糖体RNA编码基因进行保守性分析，选择特异区域设计两条TaqMAN探针及对应的特异性引物；（2）待测DNA的提取；（3）将步骤（2）中提取的DNA为模板，使用步骤（1）中所设计的引物及探针配制反应体系并设置PCR反应程序，根据反应体系要求，设置荧光定量PCR仪，检测探针所对应的荧光信号；（4）实验中设置标准对照组及空白组，若反应在30循环内检测到探针信号，则为阳性；本发明具有很强的特异性和较好的抗干扰性。 | ||
| 搜索关键词： | 种马 梨形虫病 双重 taqman 探针 荧光 定量 pcr 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种马梨形虫病双重TaqMAN探针荧光定量PCR检测方法，其特征在于包括如下步骤：/n(1)对马梨形虫病两种病原马泰勒虫和驽巴贝斯虫18S核糖体RNA编码基因进行保守性分析，选择特异区域设计两条TaqMAN探针及对应的特异性引物，其中马泰勒虫所对应的荧光探针标记HEX荧光素，驽巴贝斯虫所对应的荧光探针标记为FAM荧光素；/n(2)待测DNA的提取；/n(3)将步骤(2)中提取的DNA为模板，使用步骤(1)中所设计的引物及探针配制反应体系并设置PCR反应程序，根据反应体系要求，设置荧光定量PCR仪，检测探针所对应的荧光信号；/n(4)实验中设置标准对照组及空白组，若反应在30循环内检测到探针信号，则为阳性。/n
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