[发明专利]一种检测耐甲氧西林金葡菌的CPA引物及试剂盒和检测方法

摘要

本发明公开了一种检测耐甲氧西林金葡菌的CPA引物及其检测试剂盒和检测方法，该CPA引物是针对两个靶点femA及mecA设计的，包括剥离引物4s、5a，交叉扩增引物2a1s，以及特异引物2a、3a，引物序列如前文SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.10所示；其检测方法是建立检测femA和mecA的交叉引物恒温扩增反应体系，进行交叉引物恒温扩增反应，观察两个反应体系颜色变化，若两个反应体系颜色都变为绿色，说明待检测样品中含有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；否则说明检测样品中不含有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。本发明的引物和方法检测时间快，可以在60分钟左右获得检测结果；此外，检测灵敏度高，达到fg/μL的级别。

主权项

1.一组检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的CPA引物，其特征在于包括剥离引物4s、5a，交叉扩增引物2a1s，以及特异引物2a、3a；其核苷酸序列如下所示：靶点femA剥离引物4s：5’‑tcaaatcgcggtccagtg‑3’(SEQ ID NO.1)靶点femA剥离引物5a：5’‑aaccaatcattaccagca‑3’(SEQ ID NO.2)靶点femA交叉引物2a1s：5’‑tacctgtaatctcgccataacatcgttgtctatacct‑3’(SEQ ID NO.3)靶点femA特异引物2a：5’‑tacctgtaatctcgccat‑3’(SEQ ID NO.4)靶点femA特异引物3a：5’‑ggtaaatatggatcgatatg‑3’(SEQ ID NO.5)靶点mecA剥离引物4s：5’‑gcgataatggtgaagtag‑3’(SEQ ID NO.6)靶点mecA剥离引物5a：5’‑gatcaatgttaccgtagtt‑3’(SEQ ID NO.7)靶点mecA交叉引物2a1s：5’‑ttacgatcctgaatgtttatgactgaacgtccgata‑3’(SEQ ID NO.8)靶点mecA特异引物2a：5’‑ttacgatcctgaatgttt‑3’(SEQ ID NO.9)靶点mecA特异引物3a：5’‑tctttaacgcctaaacta‑3’(SEQ ID NO.10)。