[发明专利]一种用于制备CAR-T的慢病毒载体及其构建方法和应用有效
申请号: | 201910512556.1 | 申请日: | 2019-06-13 |
公开(公告)号: | CN110055281B | 公开(公告)日: | 2020-09-01 |
发明(设计)人: | 张文;刘江;唐东起 | 申请(专利权)人: | 山东大学第二医院 |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N7/01;C12N5/10 |
代理公司: | 山东济南齐鲁科技专利事务所有限公司 37108 | 代理人: | 张娟 |
地址: | 250000 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于制备CAR‑T的慢病毒载体质粒及其制备方法和用途,含有双启动子;酶切位点充足,易于插入基因;含有T2A序列,T2A序列能使连接的两个基因同时表达;本发明的用于制备CAR‑T的慢病毒载体,酶切位点充足,组件丰富,易于改造,方便载体的构建;本发明的用于制备CAR‑T的慢病毒载体应用广泛,可用于构建单CAR及多CAR、表达自杀基因或筛选基因等,也可用于构建表达细胞因子的第四代CAR,能满足CAR‑T中慢病毒载体质粒同时表达多个基因的要求;利用该慢病毒载体包装的慢病毒滴度高,利用该慢病毒载体质粒制备的慢病毒感染T细胞的效率高,并且制备的CAR‑T细胞具有较大的杀伤力。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 制备 car 病毒 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.一种用于制备CAR‑T的慢病毒载体质粒,其特征在于:含有hPGK和hUbC双启动子;酶切位点充足,易于插入基因;含有T2A序列,T2A序列能使连接的两个基因同时表达;所述酶切位点为XbaI、NdeI、SalI、BamHI、NsiI、PstI和KpnI;其基因序列为SEQ ID NO:3。
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