[发明专利]一种提高七稀甲萘醌产量的重组枯草芽孢杆菌及其应用有效
| 申请号： | 201910481658.1 | 申请日： | 2019-06-04 |
| 公开（公告）号： | CN110229772B | 公开（公告）日： | 2021-05-28 |
| 发明（设计）人： | 夏洪志;刘龙;李江波;崔世修;吕雪芹;李江华;堵国成;陈坚;唐波 | 申请（专利权）人： | 南通励成生物工程有限公司;江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P7/66;C12R1/125 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 226000 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种提高七稀甲萘醌产量的重组枯草芽孢杆菌及其应用，属于遗传工程领域。本发明通过对枯草芽孢杆菌染色体上MK‑7生物合成途径相关基因的改造，构建得到14株重组菌BS1～BS14，其中BS6～BS14使得MK‑7的产量得到了显著提高，最高可达33.5mg/L，是原始菌株的野生型枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)168的产量的3.53倍。本发明还提供了一种改造微生物中MK‑7生物合成途径提高MK‑7产量的方法，为构建MK‑7的高产菌株提供了理论依据。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 七稀甲萘醌 产量 重组 枯草 芽孢 杆菌 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种提高七稀甲萘醌产量的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)168为出发菌株，利用P43启动子替换染色体上甲基萘醌异分支酸合成酶基因menF和二羟基萘甲酸合成酶基因menB的天然启动子；利用Phbs启动子替换染色体上O‑琥珀酰苯甲酸‑CoA连接酶基因menE、转酮酶基因tkt的天然启动子；用P43启动子在染色体上表达外源异分支酸合酶entC基因、外源磷酸烯醇式丙酮酸合酶ppsA基因，并敲除染色体上的葡萄糖磷酸转运酶基因ptsG；所述P43启动子的序列如SEQ ID NO.3所示；所述Phbs启动子的序列如SEQ ID NO.5所示。
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