[发明专利]一种微生物发酵法生产L-羟脯氨酸的方法在审
| 申请号： | 201910416693.5 | 申请日： | 2019-05-20 |
| 公开（公告）号： | CN110016486A | 公开（公告）日： | 2019-07-16 |
| 发明（设计）人： | 王林 | 申请（专利权）人： | 南通普悦生物医药有限公司 |
| 主分类号： | C12P13/24 | 分类号： | C12P13/24;C07D207/16;C12R1/19 |
| 代理公司： | 深圳市科吉华烽知识产权事务所(普通合伙) 44248 | 代理人： | 谢肖雄 |
| 地址： | 226000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种微生物发酵法生产L‑羟脯氨酸的方法，按大肠杆菌接入发酵培养基，发酵培养基中添加有碳源、氮源，在碳源存在下，于水性介质中使碳源转化为L‑羟脯氨酸，再从该水性介质中提取生成的L‑羟脯氨酸；将L‑羟脯氨酸发酵液经过陶瓷膜过滤，得到截留物和滤清液，滤清液送入纳滤膜，进行除杂澄清，得到纳滤清液和纳滤截留液，纳滤清液经反渗透膜过滤浓缩得到浓缩液；浓缩液经活性炭脱色后得L‑羟脯氨酸溶液，将其送入蒸发器，蒸发结晶得到白色的L‑羟脯氨酸晶体。采用多级膜组合过滤浓缩，分离和提取出L‑羟脯氨酸，此工艺既在保证L‑脯氨酸的收率和品质的基础上，又实现了废水的零排放，在发酵培养基中以糖、醇或有机酸为碳源，来直接获得大量的L‑羟脯氨酸。 | ||
| 搜索关键词： | 羟脯氨酸 发酵培养基 微生物发酵法 水性介质 滤清液 浓缩液 纳滤 清液 送入 活性炭脱色 纳滤截留液 陶瓷膜过滤 大肠杆菌 反渗透膜 过滤浓缩 碳源转化 蒸发结晶 组合过滤 多级膜 发酵液 脯氨酸 截留物 零排放 纳滤膜 有机酸 蒸发器 除杂 氮源 收率 澄清 废水 浓缩 生产 保证 | ||
【主权项】：
1.一种微生物发酵法生产L‑羟脯氨酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、按大肠杆菌接入发酵培养基，发酵培养基中添加有碳源、氮源，在旋转式摇床中220‑250rpm震荡或搅拌以维持菌体生长所需的氧气量，pH控制在5‑7，培养温度在25‑37℃，培养时间12‑72小时，在碳源存在下，于水性介质中使碳源转化为L‑羟脯氨酸，再从该水性介质中提取生成的L‑羟脯氨酸；S2、将L‑羟脯氨酸发酵液经过陶瓷膜过滤，得到截留物和滤清液，滤清液送入分子量为800～1000Da的纳滤膜，进行除杂澄清，得到纳滤清液和纳滤截留液，纳滤清液经反渗透膜过滤浓缩得到浓缩液；S3、浓缩液经活性炭脱色后得L‑羟脯氨酸溶液，将其送入蒸发器，蒸发结晶得到白色的L‑羟脯氨酸晶体。
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