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[发明专利]一种制备植物促根剂的方法-CN201310444657.2无效
发明人：李兴林;韩广建;曹爱佳;张国运;曹雪飞;赵娜;韩杨;贾士儒 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2013-09-26 - 公布日： 2014-01-29 - 主分类号： A01N43/16 文献下载
摘要：一种制备植物促根剂的方法。属于生物技术领域。香菇多糖对动植物具有多种有益作用。采用香菇子实体等来制备高活性菌丝、对菌丝进行诱变并依次通过酸性液体培养基、珍珠岩固体培养基初步筛选耐酸菌丝突变体；经过多次酸性培养基继代培养和典型的拮抗测试复筛获得耐酸突变体；耐酸突变体经振荡培养形成分散良好的细胞系；优化培养工艺，在pH2.0-4.0的培养基中深层开放式培养；从发酵液收集滤液，经热水浸提→香菇粗多糖→Sevag法脱蛋白→H202脱色→透析脱盐→DEAE-纤维素(DEAE-52)柱层析→Sephadex G-100柱层析→纯多糖(中性多糖、酸性多糖)；纯多糖(中性多糖、酸性多糖)可用作植物根系的促生剂。这种方法可快速、低成本、大规模生产质量稳定的香菇多糖。
一种制备植物促根剂方法

[发明专利]一种植物促根剂-CN201310444590.2无效
发明人：李兴林;张国运;曹爱佳;韩杨;赵娜;曹雪飞;韩广建;贾士儒 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2013-09-26 - 公布日： 2014-01-08 - 主分类号： A01N43/16 文献下载
摘要：一种植物促根剂。属于生物化工领域。制备香菇耐酸突变体的菌丝种子液；发酵培养香菇菌丝，生产培养物；沉淀或离心培养物，获取上清液；从上清液中分离香菇多糖，或直接从香菇子实体中分离香菇多糖；测定糖的组成、结构等；使用质量百分比为0.000001％-100％含量的香菇多糖(含中性多糖和酸性多糖)，通过喷洒、涂抹、浸泡等手段或添加为包衣成分等处理植物根、茎、叶或种子，均取得了对植物根系促生的效果。该促生剂为食用香菇发酵产品，对动植物安全可靠；它能有效促进植物根系的旺盛生长，而对植物的其他器官影响较小，并且不受该物质高浓度的抑制，明显优于植物激素或生长调节剂。该产品可以广泛应用于农林、食品和环境等领域。
一种植物促根剂

[发明专利]一种制备印楝细胞培养物杀虫剂的方法-CN201310444545.7无效
发明人：李兴林;赵娜;韩广建;曹雪飞;韩杨;曹爱佳;张国运;成芳;贾士儒 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2013-09-26 - 公布日： 2014-01-08 - 主分类号： A01N63/02 文献下载
摘要：一种制备印楝细胞培养物杀虫剂的方法。属于生物技术领域。印楝素具有控制多种害虫的作用，一般采用从其种子种仁中提取，因而，印楝素生产受到很大的限制。采用印楝细胞培养工业化生产可以克服这方面的缺陷。先是诱导、继代培养获得松散的印楝愈伤组织；然后振荡培养、过筛、继代培养形成分散性好的细胞系；经过诱变、振荡培养、过筛、鉴定后获得小细胞突变体；优化小细胞突变体的悬浮培养基和培养条件，并确保印楝素能分泌到胞外；从愈伤组织和悬浮培养物获得四种提取液制成的产品；该类产品均具显著的控虫效果。该制剂能有效控制多种农林、仓储害虫，并具降解快、残留量低、生产成本低等特点。
一种制备细胞培养杀虫剂方法

[发明专利]一种制备耐盐解磷种子包衣的方法-CN201310444658.7无效
发明人：李兴林;曹雪飞;韩杨;赵娜;曹爱佳;韩广建;张国运;王春梅;贾士儒 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2013-09-26 - 公布日： 2014-01-08 - 主分类号： C05G3/00 文献下载
摘要：一种制备耐盐解磷种子包衣的方法。该方法属于生物技术领域。可以应用于农林、园艺等领域。这种种衣含耐盐解磷菌，可以溶解土壤中不溶磷，为植物提供可利用的磷。从盐碱地中筛选耐盐菌株，经解磷能力、耐盐能力和生理生化鉴定后确定耐盐解磷菌；用紫外线等对耐盐解磷菌进行诱变、筛选、并经过鉴定后获得脯氨酸的缺失突变体；优化耐盐解磷菌脯氨酸突变体的发酵工艺条件；脯氨酸缺失突变体的发酵，在进入对数生长期后期和稳定期前，停止发酵并浓缩发酵液或制冻干粉以分离耐盐解磷菌；采用质量百分比我3-7％聚乙烯醇+淀粉(2∶1)、0.001-3.0％山梨醇、0.001-3.0％甘露醇、0.001-3.0％脯氨酸制成溶液，同10-20％的含1×105-1×109CFU的解磷菌浓缩发酵液或发酵液冻干粉等制备种子包衣。
一种制备耐盐解磷种子包衣方法

[发明专利]一种干涉膨胀素基因Exp2制备植物悬浮培养小细胞系的方法-CN201210229725.9无效
发明人：李兴林;肖天剑;韩杨;曹爱佳;高洁;张黎明;赵俊;满淑丽;高文远 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2012-07-05 - 公布日： 2012-12-26 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：一种干涉膨胀素基因Exp2制备植物悬浮培养小细胞系的方法，本发明属于生物技术领域。首先，选定基因Exp2两个保守区分别为正向片段I、II以及对应的反向序列I’和II’；构建I-AC-II’-II-CT-I’的RNAi片段；并筛选出其插在pCAMBIA2300植物表达载体的根瘤农杆菌工程菌。然后，以甘草为例，农杆菌介导法依次获得转化的愈伤组织及其稳定表达的悬浮细胞。再次，通过看护培养，利用悬浮细胞，筛选生长速度快、效果好的单细胞系愈伤组织以及由此形成的悬浮细胞系。最后，通过培养工艺优化，获得悬浮细胞生长和产物积累的最佳发酵工艺参数。利用本发明方法获得的密度大、培养周期短、成本低、生产效率高的细胞系，为大规模开发和生产药用植物有效成分提供优质种源。
一种干涉膨胀基因 exp2 制备植物悬浮培养细胞系方法

[发明专利]一种缩短植物细胞悬浮培养周期的方法-CN201210229723.X无效
发明人：李兴林;高洁;曹爱佳;韩杨;肖天剑;赵俊;张黎明;满淑丽;高文远 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2012-07-05 - 公布日： 2012-12-26 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：一种缩短植物细胞悬浮培养周期的方法，本发明属于生物技术领域。首先，选定p53基因的两个保守区分别为正向片段I、II以及对应的反向序列I’和II’；构建I-GU-II’-II-AG-I’的RNAi片段；筛选出其插在pCAMBIA2300植物表达载体的根瘤农杆菌工程菌。然后，以甘草为例，农杆菌介导法依次获得p53转化的愈伤组织及其稳定表达的悬浮细胞。再次，通过看护培养，利用悬浮细胞，筛选生长速度快、效果好的单细胞系愈伤组织以及由此形成的悬浮细胞系。最后，通过培养工艺优化，获得悬浮细胞生长和产物积累的最佳发酵工艺参数。利用本发明方法获得的培养周期短、密度大、成本低、生产效率高的细胞系，为大规模开发和生产药用植物有效成分提供优质种源。
一种缩短植物细胞悬浮培养周期方法

[发明专利]一种利用碱蓬细胞悬浮培养生产脯氨酸的方法-CN201210229844.4无效
发明人：李兴林;周鑫;韩杨;曹爱佳;崔兴华;王丹丹;赵俊;满淑丽;张黎明;高文远 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2012-07-05 - 公布日： 2012-10-10 - 主分类号： C12P13/24 文献下载
摘要：一种利用碱蓬细胞悬浮培养生产脯氨酸的方法，属于生物技术和生物工程领域。为适应盐碱环境碱蓬细胞分泌脯氨酸，以此细胞为发酵生物，可以进行大规模悬浮培养生产脯氨酸。首先，制备碱蓬无菌苗，用其子叶诱导愈伤组织，并经过继代培养获得松散型愈伤组织；然后，用松散型愈伤组织进行振荡培养制备悬浮细胞体系；过筛后继代培养获得稳定的、分散度好的悬浮细胞系；经过看护培养筛选高产细胞系；再次，确定碱蓬细胞积累脯氨酸的NaCl添加时期和添加量；最后，优化其悬浮细胞培养基和培养条件，获得其细胞生长和脯氨酸积累的最适碳氮源、pH、温度、溶氧量、和最佳植物激素组合和接种量等主要发酵工艺参数，为大规模细胞悬浮培养提供依据。本发明为碱蓬细胞悬浮培养生产脯氨酸提供了工艺流程。
一种利用细胞悬浮培养生产脯氨酸方法

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