[发明专利]一种从冷榨杏仁粕中制备杏仁肽的方法

摘要

本发明旨在于提供一种多酶分步酶解法从冷榨杏仁粕中制备低聚肽及其制备方法。本方法能够改善杏仁蛋白加工特性，释放蛋白中的功能性肽段，解决现有技术的发展瓶颈，促进蛋白溶解，提高提取效率，同时改善蛋白的功能特性，获得产物为小分子低聚肽，产物活性较高且具有较强的抗氧化功能。凭借酶解反应较高的特异性使得制备过程易于控制反应、副产物生成少。本申请所提供的工艺可以丰富杏仁蛋白深加工产品，提高杏仁深加工利用率和产品附加值，推动整个杏仁蛋白产业的发展。

主权项

1.一种从冷榨杏仁粕中制备低聚肽的方法，其具体制备方法步骤如下：（1）将冷榨杏仁粕与石油醚按W/V比例1：2混合，并连续搅拌60min，静止至上层有机溶剂澄清，回收有机溶剂，重复操作至脱脂完全，自然风干12h得到脱脂杏仁粕；（2）将脱脂杏仁粕粉碎，过60目筛，得到脱脂杏仁粕粉；（3）将上述步骤获得的脱脂杏仁粉与水按W/V1：（25‑45）混合，加入0.5mol/L NaOH调整pH至8.0‑12.0，温度40‑60℃，搅拌提取50‑90min，3500r/min离心25min，取上清液，沉淀再按固液比按W/V1：10提取两次，并将三次上清液混合；酸沉采用0.5mol/L HCl调上清液pH至4.5，离心，收集沉淀，水洗2‑4遍后得到杏仁蛋白；（4）将杏仁蛋白按质量体积比（W/V）为1：10，加水2L搅拌均匀，用0.5mol/L NaOH调pH至9，加入Alcalase酶进行第一步酶解，Alcalase酶的用量为4500‑6500U/g，55℃酶解45min，得到第一酶解液；（5）调节所述第一酶解液的pH值为6.0‑8.0，加入中性蛋白酶和风味蛋白酶解进行第二步酶解，中性蛋白酶与风味蛋白酶加入按照质量比例为1：1混合，复合酶总用量为3000‑7000U/g，45‑65℃酶解90‑210min；将酶解液温度升至95℃，维持10min，然后冷却至室温，离心分离，收取清液，制得低聚肽粗液；（6）将低聚肽粗液先经3000rpm的转速进行离心，将清液用1000‑100nm陶瓷膜进行粗滤，收取滤过液，再用50‑4nm陶瓷膜进行精滤，收取滤过液；（7）将上述步骤获取的滤过液蒸发浓缩后，向浓缩液中加入3‑11g活性炭，搅拌脱色30min，过滤除去活性炭，最后用真空冷冻干燥制成杏仁低聚肽粉。