[发明专利]外周血不成熟DC细胞外泌体制备方法在审
| 申请号： | 201910045312.7 | 申请日： | 2019-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN109679906A | 公开（公告）日： | 2019-04-26 |
| 发明（设计）人： | 周海涛 | 申请（专利权）人： | 药鼎（北京）国际细胞医学技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0784 | 分类号： | C12N5/0784 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 赵丽娜 |
| 地址： | 101300 北京市顺义区*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及一种外周血不成熟DC细胞外泌体制备方法，包括：1)将从外周血中分离得到的PBMC细胞使用培养基A培养，得到离体不成熟树突状细胞；2)将所述离体未成熟树突状细胞在培养基B中培养后，将培养液低温离心以去除死细胞和碎片，过滤去除囊泡；得到的液体进行超速离心，弃上清，得到不成熟DC细胞外泌体；其中，所述培养基A在AIM‑V培养基的基础上额外添加了自体血浆、GM‑CSF、IL‑4以及PEG‑2；所述培养基B在AIM‑V培养基的基础上额外添加了无外泌体自体血浆、GM‑CSF、IL‑4、TGF‑β、VEGF。该方法不仅能够有效抑制DC成熟，还具有较高的外泌体收率。 | ||
| 搜索关键词： | 培养基 外周血 自体血浆 成熟 离体 去除 培养液 未成熟树突状细胞 成熟树突状细胞 超速离心 低温离心 有效抑制 死细胞 囊泡 收率 过滤 | ||
【主权项】：
1.一种外周血不成熟DC细胞外泌体制备方法，其特征在于，包括：1)将从外周血中分离得到的PBMC细胞使用培养基A培养，得到离体不成熟树突状细胞；2)将所述离体未成熟树突状细胞在培养基B中培养后，将培养液低温离心以去除死细胞和碎片，过滤去除囊泡；得到的液体进行超速离心，弃上清，得到不成熟DC细胞外泌体；其中，所述培养基A为额外添加包括下列成分的AIM‑V培养基：0.8～1.2v/v％自体血浆、GM‑CSF 40～60ng/mL、IL‑4 10～30ng/mL以及PEG‑2 0.4～0.6μg/mL；所述培养基B为额外添加包括下列成分的AIM‑V培养基：0.8～1.2v/v％无外泌体自体血浆、GM‑CSF 30～50ng/mL、IL‑4 30～50ng/mL、TGF‑β10～20ng/mL、VEGF 40～50ng/mL。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于药鼎（北京）国际细胞医学技术有限公司，未经药鼎（北京）国际细胞医学技术有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201910045312.7/，转载请声明来源钻瓜专利网。
