[发明专利]一种用于新药物开发的免疫毒性评价方法有效
| 申请号： | 201410270454.0 | 申请日： | 2014-06-17 |
| 公开（公告）号： | CN105200110B | 公开（公告）日： | 2018-10-26 |
| 发明（设计）人： | 杨代常;付凯 | 申请（专利权）人： | 武汉大学 |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02 |
| 代理公司： | 北京律诚同业知识产权代理有限公司 11006 | 代理人： | 黄韧敏;黄萍 |
| 地址： | 430072*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提供了人外周血单核细胞用于新药物开发的免疫毒性评价的应用，其中所述人外周血单核细胞用于新药物毒理评价包括以下步骤：(1)制备人外周血单核细胞；(2)用对照药品和待测新药物处理步骤1所获得的人外周血单核细胞；(3)分别用CCK‑8法和CFSE染色法检测步骤(2)获得的人外周血单核细胞中T细胞的增殖；(4)用流式细胞术测定步骤(2)获得的人外周血单核细胞中的T细胞亚群；(5)用CBA试剂盒和BD流式细胞仪人检测步骤(2)获得的外周血单核细胞的细胞因子。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 药物 开发 免疫 毒性 评价 方法 | ||
【主权项】：
1.人外周血单个核细胞在重组蛋白质新药物的免疫毒性评价中的应用，包括以下步骤：（1）制备人外周血单个核细胞；其中，新鲜血浆用RPMI‑1640稀释2倍后，再与淋巴细胞分离液以2:1比例进行密度梯度离心分离人外周血单个核细胞；（2）用对照药品和待测新药物处理步骤1所获得的人外周血单个核细胞；其中，培养的血清浓度在10%‑20%范围之间；（3）分别用CCK‑8法和CFSE染色法检测步骤（2）获得的人外周血单个核细胞中的T细胞增殖；其中人外周血单个核细胞中的T细胞增殖的培养时间为24，48 和72小时；（4）用流式细胞术测定步骤（2）获得的人外周血单个核细胞中的T细胞亚群CD4+和CD8+；（5）用CBA试剂盒和BD流式细胞仪人检测步骤（2）获得的外周血单个核细胞与免疫毒性相关的细胞因子。
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