[发明专利]一种西瓜血瓤病诊断及病原物检测的RPA方法在审
申请号: | 201910026699.1 | 申请日: | 2019-01-11 |
公开(公告)号: | CN109468417A | 公开(公告)日: | 2019-03-15 |
发明(设计)人: | 吴元华;焦裕冰;夏子豪;蒋均匀 | 申请(专利权)人: | 沈阳农业大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844 |
代理公司: | 北京君泊知识产权代理有限公司 11496 | 代理人: | 王程远 |
地址: | 110000 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明公开了一种西瓜血瓤病诊断及病原物检测的RPA方法,结合现代分子生物学研究技术手段,建立了一套高效、经济以及快速检测CGMMV的技术体系,发明了RPA快速检测方法,即在一个RPA反应中以带毒样品的cDNA为模板,加入一对检测引物,水浴锅恒温(37‑40℃)反应20‑30min,灵敏度达到10‑6,灵敏度更高实现快速、准确地检测CGMMV的目的,同时缩减了鉴定时间,节约了生化试剂,降低了成本,为CGMMV这种检疫性病害的监测、预测预报和防治提供理论基础和技术保障。 | ||
搜索关键词: | 快速检测 灵敏度 病原物 检测 分子生物学研究 西瓜 检疫性病害 诊断 技术保障 技术手段 技术体系 检测引物 理论基础 生化试剂 预测预报 水浴锅 监测 节约 防治 | ||
【主权项】:
1.一种西瓜血瓤病诊断及病原物检测的RPA方法,其特征在于,包括以下步骤:A、提取待测病毒样品的总RNA;B、以步骤A得到的总RNA为模板,采用特异性引物对进行RPA扩增,得到扩增产物;按照如下方法判断待测病毒是否为黄瓜绿斑驳花叶病毒:若所述扩增产物含有140bp的DNA片段,则所述待测病毒为黄瓜绿斑驳花叶病毒;若所述扩增产物不含有140bp的DNA片段,则所述待测病毒不为黄瓜绿斑驳花叶病毒。
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